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红松抗氧化成分分析及对 60Co 射线诱导损伤防护作用
ANTIOXIDANT COMPOSITION ANALYSIS ANDRADIOPROTECTIVE EFFECT OF PINUSKORAIENSIS EXTRACT ON DAMAGE INDUCEDBY 60Co RAY
摘 要
Abstract
目 录
Content
第 1 章 绪 论
1.1 课题背景及研究的目的和意义
1.2 电离辐射损伤与自由基反应
1.2.1 辐射损伤的直接效应与旁效应
1.2.2 抗氧化与辐射损伤防护/修复作用概述
1.2.3 合成辐射防护剂应用的局限性
1.3 植物化学物质防辐射损伤研究
1.3.1 植物化学物质体外抗氧化作用
1.3.2 植物化学物质的免疫增强作用
1.3.3 植物化学物质减轻辐射造成的器官萎缩
1.3.4 植物化学物质调节抗氧化酶的活性与表达
1.3.5 植物化学物质调节氧化应激损伤标志物的含量
1.3.6 调节 MAPK/ERK 信号途径实现辐射防护/修复
1.3.7 植物化学物质通过调节 MAPK/PI3/AKT 途径实现辐射损伤修复
1.3.8 植物化学物质通过调节 Nrf2/ARE 信号途径实现体内抗氧化辐射防护/修复作用
1.3.9 植物化学物质通过多信号通路调节实现器官损伤修复
1.4 松科植物化学成分与生物学活性以及开发价值研究
1.4.1 松科松属类植物挥发性化学成分研究概况
1.4.2 松科多酚类化学成分研究现状
1.4.3 松科植物生物学活性与林产化工应用研究
1.5 本课题主要研究内容
第 2 章 实验材料与研究方法
2.1.1 实验原料
2.1.2 实验动物
2.1.3 主要仪器设备
2.1.4 实验应用试剂
2.2 红松提取物的制备、分级
2.2.1 原料预处理
2.2.2 红松提取物的制备
2.2.3 红松粗提物的分级
2.2.4 红松提取物分级萃取物的柱色谱分段与分离
2.2.5 红松提取物 DMEPKB 组分分级产物的结晶产物核磁共振分析
2.2.6 红松提取物与分级组分的多酚含量的测定
2.2.7 红松提取物与分级组分的黄酮含量的测定
2.2.8 红松提取物与分级组分的原花青素含量的测定
2.3 石油醚组分分析（GC/MS）
2.4 液质联用分析（Q-TOF
2.5.1 超氧自由基(O2－·)清除能力测定
2.5.2 DPPH 自由基清除能力测定
2.5.3 ABTS+·清除能力测定
2.5.4 红细胞保护作用的测定
2.5.5 总还原能力测定
2.5.6 铜离子(Cu2+)-还原活性
2.6 细胞实验
2.6.1 大鼠脾脏原代淋巴细胞的制备
2.6.2 辐射模型的建立
2.6.3 刀豆蛋白 A 诱导的大鼠脾细胞增殖
2.6.4 单细胞凝胶电泳
2.6.5 最佳抗辐射组分稳定性实验
2.7 动物实验
2.7.1 60Co 辐照损伤 ICR 小鼠模型
2.7.2 脏器指数测定
2.7.3 体重和存活率变化
2.7.4 外周血象和白细胞损伤分析
2.7.5 小鼠骨髓细胞微核实验
2.7.6 小鼠骨髓细胞染色体畸变实验
2.7.7 ICR 小鼠碳廓清指数的计算
2.7.8 ICR 小鼠脾/小肠损伤形态观察
2.7.9 ICR 小鼠生化指标检测
2.7.10 小鼠免疫组化分析
2.8 统计分析
第 3 章 红松不同提取物体外抗氧化/抗辐射活性比较
3.1 引言
3.2 红松提取物提取溶剂的选择
3.3 三种溶剂提取物体外抗氧化活性
3.3.1 三种溶剂提取物清除超氧自由基能力
3.3.2 三种不同溶剂提取物清除 ABTS+·能力
3.3.3 三种不同溶剂提取物总还原力
3.3.4 三种不同溶剂提取物清除非生理自由基 DPPH·能力
3.3.5 三种不同溶剂提取物对 H2O2 诱导红细胞损伤的保护作用
3.3.6 三种不同溶剂提取物的铜离子还原作用
3.3.7 多酚与黄酮含量的测定以及不同抗氧化评价体系的 EC50
3.4 三种不同溶剂提取物对脾细胞的毒性/增殖作用
3.5三种不同溶剂的提取物对原代肝细胞辐射 48小时后 MDA含量的影响
3.6 三种不同溶剂的提取物对大鼠大脑原代细胞辐射后培养 72 小时后脂褐素含量的影响
3.7 95EEP、40AEP 以及芦丁对脾细胞的辐射防护比较
3.8 分级萃取物的制备
3.9 分级萃取物的多酚黄酮的含量的测定
3.10 本章小结
第 4 章 功能示踪法筛选红松 95%乙醇提取物组分
4.1 引言
4.2 分级萃取物的总还原力
4.3 分级萃取物的 DPPH 清除能力
4.4 分级萃取物的对脾细胞的增殖/毒性分析
4.5 95EEP 分级萃取物的对脾细胞的辐射防护作用
4.6 EAEPKB 与 NBEPKB 对辐射引起脾细胞微核发生率的影响
4.7 正丁醇组分 ODS 反相柱甲醇洗脱物的抗氧化和抗辐射作用
4.7.1 正丁醇组分 ODS 反相柱甲醇洗脱物的 DPPH 自由基清除作用
4.7.2 NBEPKB 分级萃取物的原花青素含量分析
4.7.3 NBEPKB 分级萃取物的对脾细胞的辐射防护作用
4.7.4 NBEPKB 对脾细胞的 DNA 损伤的保护作用
4.7.5 NBEPKB-50ME对脾细胞辐射后的 MDA,SOD,CAT含量/活力的影响
4.7.6 NBEPKB-50ME 对外周血中白细胞分型的影响
4.8 本章小结
第 5 章 各组分分析、鉴定及原花青素组分稳定性研究
5.1 引言
5.2 石油醚组分的气质联用分析
5.3 二氯甲烷组分硅胶柱层析
5.4 二氯甲烷组分核磁共振解析
5.5 NBEPKB-50ME 的液质联用分析
5.6 NBEPKB-50ME 的稳定性研究
5.6.1 温度对 NBEPKB-50ME 中原花青素含量的影响
5.6.2 pH 值对 NBEPKB-50ME 中原花青素含量的影响
5.6.3 光照对 NBEPKB-50ME 中原花青素含量的影响
5.6.4 金属离子对 NBEPKB-50ME 中原花青素含量的影响
5.7 本章小结
第 6 章 红松原花青素组分对辐射诱导氧化应激的防护
6.1 引言
6.2 NBEPKB-50ME 对辐照 ICR 小鼠存活率/体重的改变
6.3 NBEPKB-50ME对60Co辐照ICR小鼠血象的改变
6.4 NBEPKB-50ME 对辐照 ICR 小鼠脏器指数的改变
6.5 NBEPKB-50ME 对碳廓清指数和脾淋巴细胞增殖的影响
6.6 NBEPKB-50ME 对小肠形态学的影响
6.7 NBEPKB-50ME 对辐射小鼠体内相关氧化酶活性影响
6.7.1 NBEPKB-50ME 对 SOD 的影响
6.7.2 NBEPKB-50ME 对 CAT 的影响
6.7.3 NBEPKB-50ME 对 GSH-PX 的影响
6.7.4 NBEPKB-50ME 对髓过氧物酶(MPO)的影响
6.8 NBEPKB-50ME 对丙二醛(MDA)含量的影响
6.9 NBEPKB-50ME 对乳酸脱氢酶(LDH)影响
6.10 NBEPKB-50ME 对 GSH 含量的影响
6.11 NBEPKB-50ME 对小鼠细胞 DNA 损伤的影响
6.11.1 NBEPKB-50ME 对骨髓细胞微核率的影响
6.11.2 NBEPKB-50ME 对小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响
6.11.3 NBEPKB-50ME 对小鼠脾细胞 DNA 损伤的影响
6.12 抗（促）氧化酶与脾细胞增殖/突变相关性分析
6.13 脾组织中 ERK、p-ERK、AKT、P-AKT、Nrf2、HO-1 的表达
6.14 本章小结
结 论
创新点
展望
参考文献
附录一
附录二
缩略语
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果
哈尔滨工业大学学位论文原创性声明及使用授权说明
致 谢
个人简历
