猪肉及鸡蛋中四环素类抗生素残留检测方法研究

摘要

四环素类抗生素(tetracy clines,TCs)是一类广谱抗菌药,可作为预防和治疗畜禽疾病或促进畜禽生长的饲料添加剂,但过量使用会造成药物残留于动物体内,或是残留在蛋、奶、脏器组织中,最终影响人类的健康。为了保证四环素类药物在养殖厂的规范使用,保护人类的身体健康以及畜牧业的健康发展,故应建立完善的残留监控体系。
　　 本试验借鉴目前普遍研究的高效液相色谱法(HPLC)检测猪肉和鸡蛋中四环素类抗生素(土霉素、四环素、金霉素)含量的前处理方法及检测过程,参照国标检测要求,建立超高效液相色谱法(UPLC)检测猪肉和鸡蛋中的四环素类抗生素(土、四、金)含量,根据两种检测方法的测定结果,进行分析比较其溶剂用量、分离度、线性关系、精密度、准确度、灵敏度等,来探索更新、更精密的适用于动物性食品中四环素类抗生素残留的检测方法。为兽药残留监控体系提供科学的检测依据。
　　 在猪肉和鸡蛋中四环素类抗生素(土、四、金)残留检测的结果如下:(1)HPLC法测定猪肉中三种四环素类抗生素(土、四、金)的出峰顺序是土霉素、四环素、金霉素,保留时间依次是2.120min、2.458min、3.765min。在50μg·kg-1、100μg·kg-1、200μg·kg-1三个浓度水平的土霉素回收率78.2％～98.4％,日内变异系数6.5％～9.2％,日间变异系数2.1％～5.6％;四环素回收率86.3％～98.9％,日内变异系数5.2％～8.6％,日间变异系数2.8％～4.5％;金霉素回收率82.6％～89.5％,日内变异系数5.8％～9.2％,日间变异系数4.3％～6.1％。HPLC法测定三种四环素类抗生素(土、四、金)在猪肉中的最低检测限均为10μg·kg-1,最低定量限均为20μg·kg-1。(2)HPLC法测定鸡蛋中三种四环素类抗生素(土、四、金)的出峰顺序是土霉素、四环素、金霉素,保留时间依次是2.120min、2.458min、3.765min。在50μg·kg-1、100μg·kg-1、200μg·kg-1三个浓度水平的土霉素回收率71.5％～83.4％,日内变异系数3.8％～8.9％,日间变异系数3.1％～5.1％;四环素回收率77.5％～82.3％,日内变异系数4.1％～8.7％,日间变异系数4.8％～6.1％;金霉素回收率71.7％～79.5％,日内变异系数3.1％～7.6％,日间变异系数3.9％～5.8％。HPLC法测定三种四环素类抗生素(土、四、金)在鸡蛋中的最低检测限均为25μg·kg-1,最低定量限均为50μg·kg-1。(3)UPLC法测定猪肉中三种四环素类抗生素(土、四、金)的出峰顺序是土霉素、四环素、金霉素,保留时间依次是0.581min、0.864min、1.552min。在50μg·kg-1、100μg·kg-1、200μg·kg-1三个浓度水平的土霉素回收率96.8％～103.5％,日内变异系数3.8％～7.3％,日间变异系数2.4％～4.2％;四环素回收率95.4％～102.2％,日内变异系数3.9％～8.1％,日间变异系数2.7％～5.9％;金霉素回收率94.4％～98.5％,日内变异系数4.5％～6.9％,日间变异系数2.2％～4.6％。UPLC法测定三种四环素类抗生素(土、四、金)在猪肉中的最低检测限为土霉素0.001ng·kg-1,四环素0.001ng·kg-1,金霉素0.010ng·kg-1;最低定量限为土霉素0.25ng·kg-1,四环素0.25ng·kg-1,金霉素0.50ng·kg-1。(4)UPLC法测定鸡蛋中三种四环素类抗生素(土、四、金)的出峰顺序是土霉素、四环素、金霉素,保留时间依次是0.581min、0.864min、1.552min。在50μg·kg-1、100μg·kg-1、200μg·kg-1三个浓度水平的土霉素回收率82.5％～99.8％,日内变异系数2.9％～7.5％,日间变异系数2.3％～4.8％;四环素回收率82.5％～94.9％,日内变异系数2.6％～7.1％,日间变异系数2.8％～5.1％;金霉素回收率83.0％～97.0％,日内变异系数2.1％～7.2％,日间变异系数4.1％～6.2％。UPLC法测定三种四环素类抗生素(土、四、金)在鸡蛋中的最低检测限为土霉素0.01ng·kg-1,四环素0.01ng·kg-1,金霉素0.02ng·kg-1;最低定量限为土霉素2.5ng·kg-1,四环素2.5ng·kg-1,金霉素5.0ng·kg-1。
　　 上述结果表明:(1)应用HPLC法和UPLC法测定猪肉和鸡蛋中四环素类抗生素(土、四、金)残留量的结果均符合国家标准检测要求;(2)UPLC法较HPLC法分析时间短、准确度、精密度、灵敏度高,可作为检测动物性食品中四环素类抗生素残留的一种更加节约、快速、准确及灵敏的方法。