益生菌对雏鸡免疫器官免疫功能及β-防御素-1mRNA表达的影响

摘要

以1日龄雏鸡为研究对象，应用荧光定量PCR等技术，结合器官组织石蜡切片及组织化学染色等方法，通过免疫器官——胸腺、脾脏、法氏囊鸡β-防御素-1(Gal-1) mRNA表达，浆细胞数量及其核浆比，TANAE+细胞数量等有关指标动态变化的检测，较全面系统的研究了不同种类益生菌对雏鸡免疫器官免疫功能和Gal-1mRNA表达的影响，旨在为益生菌及其制剂在动物生产中的应用及其研发新产品提供科学实验依据，研究结果发现:
　　(1)雏鸡单独应用双歧杆菌后，胸腺、脾脏、法氏囊中TANAE+细胞数量均于7～13日龄时较对照雏鸡明显增多(P＜0.05);脾脏、法氏囊和胸腺中的浆细胞数量分别于10～13日龄和7～10日龄时较对照雏鸡明显增多(P＜0.05);但Gal-1mRNA表达于10～13日龄时较对照雏鸡明显提高（P＜0.05或P＜0.01）。
　　(2)雏鸡单独应用乳酸杆菌后，脾脏和法氏囊中浆细胞和TANAE+细胞数量以及Gal-1mRNA均于7～13日龄时显著或极显著高于对照组雏鸡（P＜0.05或P＜0.01），而胸腺中浆细胞和TANAE+细胞数量于7～10日龄时明显多于对照组雏鸡（P＜0.05），但Gal-1mRNA表达于7日龄时较对照雏鸡明显提高(P＜0.05或P＜0.01)。
　　(3)双歧杆菌和乳酸杆菌联合应用雏鸡后，胸腺、脾脏和法氏囊中的TANAE+细胞数量分别于7～10、13和10～13日龄时明显多于对照组雏鸡（P＜0.05）;免疫器官中的浆细胞均与7日龄时明显多于对照组雏鸡（P＜0.05）;但Gal-1mRNA表达于10～13日龄时较对照雏鸡明显提高（P＜0.05或P＜0.01）。
　　乳酸杆菌对雏鸡免疫器官T淋巴细胞和浆细胞数量及Gal-1 mRNA表达的作用效果优于双歧杆菌。

目录

声明

摘要

1 引言

1．1 益生菌研究进展

1．1．1 益生菌的概念

1．1．2 益生菌的种类及其特点

1．1．3 益生菌的作用机制与功能

1．1．4 益生菌的应用

1．2 禽免疫系统研究进展

1．2．1 禽类免疫系统的特点

1．2．2 禽类B淋巴细胞

1．2．3 禽类T淋巴细胞

1．3 防御素研究进展

1．3．1 抗菌肽简介

1．3．2 防御素的定义及其分类

1．3．3 防御素的主要生物学活性

1．3．4 防御素的应用

1．4 鸡β-防御素研究进展

1．4．1 鸡β-防御素的分子结构特点和分布

1．4．2 鸡β-防御素的诱导表达及抗菌、抗感染机制

1．5 研究的目的和意义

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 实验动物

2．1．2 菌种

2．1．3 主要化学试剂和生物制剂

2．1．4 主要仪器设备

2．2 实验方法

2．2．1 益生菌微胶囊的制备

2．2．2 实验动物分组及其处理

2．2．3 被检材料采取

2．2．4 检测指标及方法

2．3 数据处理

3 结果与分析

3．1 鸡免疫器官Gal-1mRNA表达与Real Time-PCR检测方法的建立

3．1．1 总RNA提取

3．1．2 雏鸡免疫器官Gal-1 mRNA表达的变化

3．2 益生菌应用雏鸡免疫器官功能及Gal-1mRNA表达的变化

3．2．1 益生菌应用雏鸡免疫器官Gal-1mRNA表达的变化

3．2．2 益生菌应用雏鸡免疫器官免疫功能的变化

4 讨论

4．1 益生菌对雏鸡Gal-1mRNA表达的影响及其机制

4．2 益生菌对雏鸡免疫器官免疫功能的影响及其机制

4．2．1 益生菌对雏鸡免疫器官细胞免疫功能的影响及其机制

4．2．2 益生菌对雏鸡免疫器官体液免疫功能的影响及其机制

5 结论

致谢

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的学术论文