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两种不同类型植物叶片形态解剖学指标观测方法的研究

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声明

摘要

1 前言

1.1 植物叶片的发育和解剖结构

1.1.1 叶片的发育

1.1.2 表皮的解剖结构

1.1.3 叶肉的解剖结构

1.1.4 叶脉的解剖结构

1.2 叶片观测方法的研究进展

1.2.1 表皮的观测方法

1.2.2 横切面的观测方法

1.2.3 脉序的观测方法

1.3 玉米和蓝靛果忍冬的生物学特性

1.3.1 玉米的生物学特性

1.3.2 蓝靛果忍冬的生物学特性

1.4 本研究的目的和意义

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 玉米幼苗的培养方法

2.3 取样

2.4 叶片表皮观测的优化与筛选

2.4.1 指甲油印迹法

2.4.2 胶带印迹法

2.4.3 明胶印迹法

2.5 叶片横切面观测方法的优化与筛选

2.5.1 明胶印迹法

2.5.2 指甲油印迹法

2.6 叶片脉序观测方法的优化与筛选

2.6.1 次氯酸钠离析法

2.6.2 过氧乙酸离析法

2.7 量化指标的测定

2.8 测微尺的校正

2.9 数据处理与分析

3.结果与分析

3.1 玉米叶片形态解剖学指标观测方法的优化与筛选

3.1.1 表皮

3.1.2 横切面

3.1.3 脉序

3.2 蓝靛果忍冬叶片形态解剖学指标观测方法的优化与筛选

3.2.1 表皮

3.2.2 横切面

3.2.3 脉序

3.3 玉米叶片形态解剖学性状的量化指标

3.3.1 玉米叶片表皮的量化指标

3.3.2 玉米叶片叶肉细胞的量化指标

3.3.3 玉米叶片的微脉岛量化指标

3.4 蓝靛果忍冬叶片形态解剖学性状量化指标

3.4.1 蓝靛果忍冬表皮的量化指标

3.4.2 蓝靛果忍冬叶片叶肉细胞的量化指标

3.4.3 蓝靛果忍冬微脉岛的量化指标

4 讨论

4.1 影响印迹法获取植物叶片表皮印迹效果的因素

4.1.1 指甲油和胶带印迹法

4.1.2 明胶印迹法

4.2 印迹法观测植物叶片横切面特征的必要性及可行性

4.3 2种离析法观测植物脉序的优缺点

4.4 印迹法和离析法在植物叶片解剖学指标观测方面的应用前景

5 结论

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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摘要

叶片是植物的重要器官之一,在教学和科研工作中经常要对其形态解剖学指标进行观测。过去关于叶片形态解剖学指标观测方法的研究多局限于叶片表皮细胞,且对影响观测效果的诸多因素没有进行深入的研究,还需要研究适用于不同类型植物的具体方法。叶片横切面和脉序的观测方法较少,还存在操作程序复杂、耗时长、制片效果差等缺点。针对存在的问题,本研究以单子叶禾本科草本植物玉米和双子叶忍冬科木本植物蓝靛果忍冬为材料,采用正交试验的方法,对这两种不同类型植物叶片表皮、横切面和脉序的观测方法进行了较为详尽系统的研究,获得了简单快捷观测其形态解剖学指标的方法及其条件。并应用所得方法对这两种植物叶片表皮、叶肉和脉序的多项量化指标进行了测定。取得的研究结果为简便快捷地观测植物叶片的形态解剖结构、研究叶片的发育机理提供了技术支撑。主要结论如下:
  (1)玉米叶片表皮和横切面简单快捷的观测方法均为指甲油印迹法和明胶印迹法,脉序最佳观测方法为次氯酸钠离析法和过氧化氢离析法。
  其中用指甲油印迹法和明胶印迹法观测玉米叶片表皮特征的最优条件组合分别为:凝固时间12min+胶带面积1.5×1.5cm2+以60°夹角快速揭取、明胶浓度21%+明胶凝固时间8min+甲基绿用量0.018g·100mL-1+环境温度22℃+叶片在凝胶上的放置时间11s;而这两种印迹法观测其横切面的最优组合分别为叶片固定数量6个+指甲油凝固时间50s+以60°夹角慢速揭取或叶片固定数量6个+凝固时间60s+以30°夹角慢速揭取、明胶凝固时间8min+明胶浓度18%+甲基绿用量0.045g·100mL-1+环境温度22℃+叶片在凝胶上的放置时间5s。
  用次氯酸钠离析法和过氧乙酸离析法观测玉米叶片脉序特征的最优条件组合分别为水煮时间4min+NaOH浓度10%+NaOH水浴时间30min+NaClO浓度4%+NaClO水浴温度20℃+NaClO水浴时间30min、过氧乙酸浓度14%+水浴温度70℃+水浴时间3h。
  (2)蓝靛果忍冬叶片表皮和横切面简单快捷的观测方法均为指甲油印迹法和明胶印迹法,用于观测其叶片横切面特征的明胶印迹法的最优条件组合和玉米叶片的最优组合相同。叶片脉序最佳观测方法为次氯酸钠离析法和过氧化氢离析法。
  其中用指甲油印迹法和明胶印迹法观测蓝靛果忍冬叶片表皮特征的最优条件组合分别为:凝固时间20min+胶带面积1.0×1.0cm2+以45°或60°夹角快速揭取、明胶浓度24%+明胶凝固时间8min+甲基绿用量0.036g·100mL-1+环境温度20℃+叶片在凝胶上的放置时间6s;而用于观测横切面的指甲油印迹法的最优组合为叶片固定数量5个+指甲油凝固时间70s+以60°夹角慢速揭取。
  用次氯酸钠离析法和过氧乙酸离析法观测蓝靛果忍冬叶片脉序特征的最优条件组合分别为水煮时间5min+NaOH浓度8%+NaOH水浴时间1.5h+NaClO浓度4%+NaClO水浴温度40℃+NaClO水浴时间35min、过氧乙酸浓度14%+水浴温度60℃+水浴时间3.5h或过氧乙酸浓度12%+水浴温度70℃+水浴时间3.5h。

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