饲喂兼性厌氧的纤维素分解菌和固氮菌对泌乳奶牛的影响

摘要

我们实验室通过体外发酵实验发现，将分离自奶牛瘤胃液的兼性厌氧纤维素分解菌(L5)和固氮菌(C1)按照4∶1的比例添加，促进了瘤胃发酵、并提高了纤维素的降解率。我们的假设是:饲喂L5和C1可能具有促进奶牛瘤胃发酵的作用，而这种作用将会在奶牛的营养物质消化和泌乳性能上得以体现。因此，本文旨在通过奶牛饲喂试验来验证我们的假设，并进一步认识奶牛瘤胃L5和C1。
　　菌种活化和现场试验所需菌量的确定
　　(1)首先于-20℃冰箱内取出兼性厌氧的纤维素分解菌L5和固氮菌C1，在室温条件下解冻后，再进行菌株的活化处理。两种菌株的活化为采用液体LB培养基对菌株进行二次复活处理。待培养液内的活菌浓度约达到109 CFU·mL-1及以上程度，再通过稀释涂布平板法测定培养液里实际活菌的数量。
　　(2)奶牛瘤胃内容物容积按56.9 L，瘤胃内容物外流速度每小时按总体积的6％，计算出每头奶牛每1次饲喂所需的活菌总数为3.368×1011 CFU。两种菌剂L5和C1是按照4∶1的比例进行混合的，所以其中含L5为2.694×1011 CFU、C1为0.674×1011 CFU。因为最后菌液要与30％的甘油按照1∶1的比例保存在1.5 mL EP管内。所以在保证每头奶牛每1次饲喂L5为2.694×1011 CFU和C1为0.674×1011 CFU的基础上，要用灭活的LB液体培养基将L5培养液的浓度调整为5.388×1011 CFU·mL-1和C1培养液的浓度调整为1.348×1011CFU·mL-1。即每种菌液吸取0.5 mL与0.5 mL30％的甘油混合混匀后，置于冰箱-20℃条件下保存备用。
　　现场饲喂试验
　　本试验采用单因素试验设计，将18头体重（550±50 kg）相近、泌乳天数（160±20 d）相近和泌乳量（31.72±3.01 kg·d-1）也相近的荷斯坦奶牛随机分为对照组和试验组两个组别。对照组奶牛饲喂奶牛场日常饲粮加上灭活的L5+C1(L5∶C1=4∶1)混合菌剂，试验组饲喂日常饲粮加上L5+C1混合菌剂。试验包括16天的预饲期和4天的采样期，预饲期间观察并熟悉奶牛采食情况、趴卧和排粪等个体行为;采样期进行料样、粪样、奶样和血样样品的采集。结果表明:虽然该混合菌剂对日粮NDF、ADF和Ash的表观消化率没有显著影响(P＞0.5)，但它却可以显著的提高日粮EE的表观消化率（P=0.01）;另外混合菌剂有提高日粮CP利用效率的趋势（P=0.06）。此外，混合菌株对牛奶中乳糖、乳脂、乳蛋白、总固形物和体细胞数等乳常规指标以及血清尿素氮、血糖、胆固醇、谷丙转氨酶和谷草转氨酶的影响也均不显著，但它有提高血清中白蛋白数量的趋势(P=0.0585)。
　　综上所述，给奶牛饲喂兼性纤维素分解菌和固氮菌的混合菌剂影响了饲粮脂肪消化和蛋白质的代谢。具体表现为:它不仅可以提高饲粮粗脂肪的表观消化率，而且也有提高日粮粗蛋白表观消化率和血清当中白蛋白含量的趋势。

目录

声明

摘要

1 引言

1．1 反刍动物瘤胃微生物

1．1．1 瘤胃细菌

1．1．2 瘤胃真菌

1．1．3 瘤胃原虫

1．2 反刍动物瘤胃调控

1．2．1 通过日粮来调控瘤胃发酵

1．2．2 对瘤胃微生物进行调控

1．2．3 添加瘤胃调控剂

1．3 活菌制剂在反刍动物生产上的应用

1．3．1 DFM对瘤胃发酵的影响

1．3．2 DFM对奶牛干物质采食量和饲料消化作用的影响

1．3．3 DFM对血液生化指标的影响

1．3．4 DFM对奶牛泌乳能力和奶成分的影响

1．4 研究的目的与意义

2 材料与方法

2．1 菌剂的制备

2．1．1 试验材料

2．1．2 试验方法

2．2 现场饲喂试验

2．2．2 试验设计

2．2．3 样品的采集与保存

2．2．4 测定指标和方法

2．2．5 数据处理

3 结果与分析

3．1 兼性纤维素分解菌和固氮菌对奶牛养分表观消化率的影响

3．2 兼性纤维素分解菌和固氮菌对奶牛产奶量及乳成分的影响

3．3 兼性纤维素分解菌和固氮菌对奶牛血液生化指标的影响

4 讨论

4．1 兼性纤维素分解菌和固氮菌对奶牛养分表观消化率的影响

4．2 兼性纤维素分解菌和固氮菌对奶牛产奶量及乳成分的影响

4．3 兼性纤维素分解菌和固氮菌对奶牛血液生化指标的影响

5 结论

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术论文