声明
论文说明
摘要
1引言
1．1奶牛乳房炎
1．2凝固酶阴性葡萄球菌引起的奶牛乳房炎
1．2．1凝固酶阴性葡萄球菌
1．2．2凝固酶阴性葡萄球菌的鉴定
1．2．3凝固酶阴性葡萄球菌引起的奶牛乳房炎的流行
1．2．4凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性
1．2．5木糖葡萄球菌引起的奶牛乳房炎
1．3细菌耐药性
1．3．1细菌对抗菌药物耐药性的发展
1．3．2细菌耐药性已经成为全球关注的热点
1．3．3动物源性细菌耐药性已成为公共安全问题
1．4大环内酯类药物与酰胺醇类药物交叉耐药机制
1．4．2酰胺醇类药物简介
1．4．3大环内酯类药物与酰胺醇类药物作用机制
1．4．4大环内酯类药物与酰胺醇类药物耐药机制
1．5细菌耐药性研究
1．5．1转录组学在细菌耐药性研究中的应用
1．5．2代谢组学在细菌耐药性研究中的应用
1．5．3基因组学在细菌耐药性研究中的应用
1．5．4蛋白质组学在细菌耐药性研究中的应用
1．5．5计算机模拟技术在细菌耐药性研究中的应用
1．6细菌耐药性防治措施
1．7研究目的与意义
2材料和方法
2．1材料
2．1．1菌株
2．1．2质粒
2．1．3药品
2．1．4培养基及试剂
2．1．5试剂盒
2．1．6仪器设备
2．1．7 PCR引物
2．2方法
2．2．1泰乐菌素对木糖葡萄球菌的体外抑菌作用
2．2．2 1/2 MIC泰乐菌素选择压力下木糖葡萄球菌蛋白质组学研究
2．2．3体外诱导试验
2．2．4泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌中差异表达蛋白mRNA水平检测
2．2．5不同水平泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌中耐药蛋白mRNA水平检测
2．2．6泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌中核糖体基因测定
2．2．7计算机分子模拟技术辅助核糖体突变位点的筛选
2．2．8木糖葡萄球菌核糖体突变菌株构建
2．2．9木糖葡萄球菌核糖体突变菌株筛选
2．2．10木糖葡萄球菌核糖体突变菌株鉴定
2．2．11木糖葡萄球菌核糖体突变菌株药物敏感性检测
2．2．12泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌对氟苯尼考交叉耐药机制的研究
3结果与分析
3．2．2 SDS-PAGE电泳
3．2．3酶解肽段浓度测定
3．2．4肽段SCX分级
3．2．5蛋白质鉴定结果
3．2．6蛋白质谱鉴定结果
3．2．7生物信息学分析
3．3泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌的敏感性测定
3．4泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌中差异表达蛋白mRNA水平检测
3．5不同水平泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌中耐药蛋白的mRNA水平检测
3．6泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌核糖体突变分析
3．7计算机分子模拟技术辅助核糖体突变位点确定
3．7．1同源模建
3．7．2模型优化及评估
3．7．3分子对接
3．8木糖葡萄球菌核糖体突变菌株的构建
3．8．1木糖葡萄球菌核糖体突变克隆载体的构建
3．8．2木糖葡萄球菌核糖体突变自杀质粒的构建
3．8．3木糖葡萄球菌核糖体突变菌株的筛选
3．8．4木糖葡萄球菌核糖体突变菌株的鉴定
3．9木糖葡萄球菌核糖体突变菌株敏感性测定
3．10木糖葡萄球菌核糖体突变菌株中耐药蛋白mRNA水平检测
3．11 Syby1分子对接结果
4讨论
4．1泰乐菌素对木糖葡萄球菌蛋白质组学研究
4．2泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌体外诱导研究
4．3泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌中耐药蛋白研究
4．4泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌对氟苯尼考交叉耐药机制的研究
4．4．1泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌中核糖体与交叉耐药机制的相关性研究
4．4．2泰乐菌素耐药木糖葡萄球菌中耐药蛋白与交叉耐药机制相关性研究
5结论
致谢
参考文献
附录
攻读博士学位期间发表的学术论文
