声明
摘要
1前言
1．1细胞色素P450研究进展
1．1．1细胞色素P450命名
1．1．2细胞色素P450结构特征
1．1．3细胞色素P450分布
1．1．4细胞色素P450功能
1．2 RNA干扰技术在昆虫细胞色素P450中的应用
1．3研究的目的及意义
2材料与方法
2．1试验昆虫
2．2试验仪器
2．3试验药剂
2．4黏虫细胞色素P450基因获得
2．4．1基因寻找与引物设计
2．4．2总RNA的提取
2．4．3 cDNA的合成
2．4．4 PCR扩增
2．4．5 PCR产物回收和纯化
2．4．6连接反应
2．4．7转化反应
2．4．8测序
2．4．9基因命名与序列分析
2．5基因时空表达的研究
2．5．1不同发育阶段表达研究
2．5．2不同组织表达研究
2．6不同杀虫剂处理对黏虫P450基因表达研究
2．6．1高效氯氟氰菊酯对黏虫P450基因表达研究
2．6．2氯虫苯甲酰胺对黏虫P450基因表达研究
2．7不同植物次生代谢物质对黏虫P450基因表达研究
2．8胡椒基丁醚(PBO)对黏虫P450基因表达研究
2．9黏虫细胞色素P450基因生物学功能分析
2．9．1 dsRNA的体外合成
2．9．2 dsRNA的注射
2．10 RNA干扰后黏虫对2种杀虫剂的敏感性分析
3结果与分析
3．1黏虫CYP4G200基因的验证与分析
3．1．1黏虫CYP4G200基因cDNA序列验证与分析
3．1．2黏虫CYP4G200氨基酸序列系统进化分析
3．2黏虫CYP4G200基因的时空表达
3．2．1黏虫不同发育阶段CYP4G200基因的表达
3．2．2黏虫不同组织CYP4G200基因的表达
3．3不同杀虫剂对黏虫CYP4G200基因表达的影响
3．3．1高效氯氟氰菊酯对CYP4G200基因表达的影响
3．3．2氯虫苯甲酰胺对CYP4G200基因表达的影响
3．4不同植物次生代谢物质对黏虫CYP4G200基因表达的影响
3．4．1香豆素对黏虫CYP4G200基因表达的影响
3．4．2吲哚-3-甲醇对黏虫CYP4G200基因表达的影响
3．5胡椒基丁醚(PBO)对黏虫CYP4G200基因表达的影响
3．6黏虫CYP4G200基因的生物学功能分析
3．6．1黏虫CYP4G200基因沉默效率分析
3．6．2 CYP4G200基因沉默后黏虫对杀虫剂的抗药性分析
4讨论
4．1试验材料的选择
4．2 CYP4G200基因序列分析
4．3 CYP4G200基因的时空表达
4．4杀虫剂对CYP4G200基因表达的影响
4．5植物次生代谢物质对CYP4G200基因表达的影响
4．6 PBO对CYP4G200基因表达的影响
4．7 CYP4G200的生物学功能研究
5结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
