声明
摘要
1引言
1．1立题背景
1．2生物膜
1．2．1生物膜的发现
1．2．2生物膜的形成
1．2．3生物膜的研究方法
1．2．4食品中生物膜的危害和控制方法
1．2．5抑制生物膜形成的调控机制
1．3香芹酚和百里香酚
1．3．1香芹酚和百里香酚的理化性质
1．3．2香芹酚和百里香酚的应用
1．4研究的目的与意义
1．5研究的内容
2材料和方法
2．1材料和试剂
2．2仪器与设备
2．3试验方法
2．3．1香芹酚和百里香酚对菌株生物膜形成的抑制作用
2．3．2 E．cloacae C4全基因组测序
2．3．3香芹酚和百里香酚对生物膜相关基因表达量变化的影响
2．3．4 HNS蛋白与RcsA启动子的相互作用
2．4数据统计
3结果与分析
3．1香芹酚和百里香酚对生物膜形成的抑制作用
3．1．2最小抑菌浓度(MIC)和生长曲线
3．1．3细菌生物膜形成量
3．1．4菌体泳动能力
3．1．5生物膜内菌落总数
3．1．6 SEM观察细菌生物膜微观形态
3．1．7 CLSM观察细菌生物膜微观结构
3．1．8胞外多糖含量
3．1．9对成熟生物膜的杀菌效果
3．2 E．cloacae C4全基因组测序
3．2．1测序数据产出及质量控制
3．2．2基因组的基本特征
3．2．3基因功能分析
3．2．4全基因组图谱
3．2．5生物膜形成相关基因的预测
3．3香芹酚和百里香酚对生物膜形成相关基因相对表达量的影响
3．3．1 E．faecalis R612生物膜形成相关基因的相对表达量
3．3．2 E．cloacae C4生物膜形成相关基因的相对表达量
3．4 HNS蛋白与RcsA启动子的相互作用
3．4．1目的基因hns的扩增
3．4．2重组质粒hns-pDE 1的构建
3．4．3表达菌株hns-pDEl-BL21的构建
3．4．4重组蛋白HNS纯化
3．4．5 RcsA启动子基因的扩增
3．4．6 HNS蛋白与RcsA启动子的结合作用
4讨论
4．1香芹酚和百里香酚对生物膜形成的抑制作用
4．2 E．cloacae C4全基因组测序
4．3香芹酚和百里香酚对生物膜形成相关基因相对表达量的影响
4．4 HNS蛋白与RcsA的相互作用
5结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
