香蓼(Polygonum viscosum)繁殖方法及精油主成分鉴定研究

摘要

香蓼（Polygonum viscosum）为蓼科蓼属植物，是一种具观赏、药用和食用价值的野生资源，全株具奇异的香味，精油具经济价值。本论文以黑龙江省尚志市帽儿山的野生香蓼为供试材料，从组织培养和种子萌发两方面探索了香蓼快速且有效的繁殖途径。在此基础上，利用水蒸气蒸馏法初步研究了香蓼精油提取技术，并对精油成分进行了初步分析。试验结果可为香蓼可持续开发利用和保护香蓼野生资源提供理论参考，同时对精油推广应用具有重要实践意义。主要试验结果如下:
　　1.本试验香蓼种子长度为2.50-3.16mm，直径为1.82-2.16mm。千粒重为4.81g，平均生活力为85.56±1.11％。种皮、胚和胚乳分别占种子总重量的40.29％、4.01％和55.61％。香蓼种胚在形态上发育完全。
　　2.香蓼种子不易萌发的原因之一是香蓼种皮对种子的萌发存在机械阻碍作用，使种胚不能突破种皮正常生长。通过种子无菌试验发现香蓼胚根、子叶不存在休眠现象，但其萌发需要营养做动力。
　　3.香蓼种子在25℃、1900-20001x光照条件下发芽率、发芽势均最高，是其萌发的最佳条件。在机械损伤、外源激素处理同时作用于香蓼种子时，才能提高其萌发率。浓硫酸处理一定程度上提高了香蓼种皮透性，但效果较机械损伤稍差。GA3、6-BA和NAA三种外源激素处理均在一定程度上提高了香蓼破皮种子的萌发率，其中GA3效果最好。浓硫酸处理5min后经200mg·L-1GA3浸种48h，再层积处理30d，能够提高香蓼种子的萌发率，且种苗最健壮。32种处理中，破皮种子经200mg·L-1GA3浸泡48h后，其发芽率和发芽势均最高，分别为58.00％和31.33％，平均发芽速较高为4.36％。
　　4.以香蓼带芽茎段、叶片、叶柄和茎段为外植体，经初代诱导、继代增殖和生根移栽过程建立了香蓼组培再生体系。研究了不同植物生长调节剂的配比组合对香蓼组织培养过程的影响。结果为:香蓼带芽茎段消毒的最好方式为5％NaClO溶液处理10min;叶片最佳消毒方式为0.1％HgCl2处理4min。带芽茎段腋芽诱导的最适宜培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1，诱导率最高，芽苗粗壮。MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1+KT0.5mg·L-1是香蓼腋芽增殖的最适宜培养基，其增殖倍数最高为5.17，分化的小芽颜色翠绿且粗壮。MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1培养基壮苗效果最好，可直接用于生根培养。1/2MS+NAA0.7mg·L-1是香蓼最适宜的生根培养基，诱导出的主根较长、须根较多，植株长势良好。
　　5.水蒸气蒸馏法提取250g香蓼精油的最佳工艺为提取时间3.5h、加水量250ml和NaCl质量分数2％;香蓼叶片的含油量较高。挥发油经GC-MS分析所散发出的清香果香气息主要是以2-甲基丁酸-2-甲基丁酯为主的该精油中低沸点区域所含各种酯类化合物所特有的。

目录

摘要

1 绪论

1．1 引言

1．2 蓼属植物应用价值研究进展

1．3 蓼属植物组织培养研究进展

1．3．1 蓼属植物组织培养诱导类型

1．3．2 蓼属植物外植体的选择

1．3．3 植物生长调节剂对蓼属植物分化的影响

1．4 蓼属植物种子萌发研究进展

1．5 蓼属植物精油研究进展

1．5．1 蓼属植物精油提取方法研究

1．5．2 蓼属植物精油化学成分的研究

1．5．3 蓼属植物精油的利用价值

1．6 研究的目的与意义

2 香蓼种子休眠与萌发特性研究

2．1 试验材料

2．2 试验方法

2．2．1 香蓼种子生物学特性

2．2．2 香蓼种子休眠影响因素研究

2．2．3 香蓼种子萌发技术的研究

2．3 结果与分析

2．3．1 香蓼种子生物学特性试验结果

2．3．2 香蓼种子休眠影响因素研究结果

2．3．3 香蓼种子萌发技术的研究结果

2．4 本章小结

3 香蓼植株再生体系的建立

3．1 试验材料

3．2 培养条件

3．3 试验方法

3．3．1 外植体消毒

3．3．2 初代培养

3．3．3 继代培养与愈伤组织分化

3．3．4 丛生芽壮苗培养

3．3．5 组培苗生根诱导及驯化、移栽

3．3．6 试验数据处理与分析

3．4 试验结果与分析

3．4．1 外植体消毒

3．4．2 初代培养结果与分析

3．4．3 继代增殖培养结果与分析

3．4．4 丛生芽壮苗培养基的筛选结果

3．4．5 组培苗生根诱导及驯化、移栽

3．5 本章小结

3．5．1 外植体的灭菌

3．5．2 初代培养

3．5．3 继代增殖培养

3．5．4 壮苗培养基的筛选

3．5．5 生根诱导及炼苗、移栽

4 香蓼精油提取技术初探

4．1 试验仪器及试剂

4．2 试验方法

4．2．1 水蒸气蒸馏法提取香蓼精油工艺优化方案

4．2．2 不同部位精油提取率的测定

4．3 数据处理

4．4 结果与分析

4．4．1 香蓼精油提取正交试验结果

4．4．2 不同部位精油提取率的测定结果

4．4．3 挥发油成分分析结果

4．5 本章小结

5 结论

参考文献

附录

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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