酶联免疫吸附、显色原位杂交与免疫组化在检测乳腺癌HER2/neu表达状态的相关性研究

摘要

目的 乳腺癌原癌基因HER2/neu表达状态的研究报告虽然较多，但由于所选的检测标本、目的及检测方法和试剂的不同，检测结果相差较大，难于确切的反映HER2/neu基因在乳腺癌中的真实表达状态。针对上述在检测中存在的问题，我们选择HER2/neu为研究对象，采用酶联免疫吸附(ELISA)、免疫组化(IHC)及显色原位杂交(CISH)分别检测乳腺癌患者的血清及病理组织学标本中HER2/neu的表达状态，探讨如何准确检测乳腺癌HER2/neu表达状态，分析乳腺肿瘤患者血清HER2的水平、影响因素及临床意义；比较CISH与IHC在检测组织HER2/neu表达状态的一致性和差异性，探讨CISH在检测乳腺癌患者组织中HER2/neu基因表达状态的临床应用，为乳腺癌治疗及预后判断提供参考。 材料和方法 收集2005年11月至2006年3月在河南省肿瘤医院住院治疗的83例乳腺肿块患者，其中转移性乳腺癌13例；乳腺良性病变20例；可手术原发性乳腺癌50例，均经病理证实。全部患者治疗前晨起空腹抽取静脉血 2ml，另外收集10例健康女性静脉血作为对照组，分离血清保存于-70℃低温冰箱中，并收集可手术乳腺癌患者术后石蜡病理标本。 采用ELISA方法检测10例正常人、20例乳腺良性病变、50例早期手术乳腺癌及13例晚期转移性乳腺癌患者血清HER2的水平，对乳癌手术组患者术后病理组织标本用IHC检测组织HER2/neu蛋白的表达情况，探讨血清HER2与淋巴结转移、肿瘤负荷及组织HER2/neu的关系；然后采用SPOT-Light HER2 CISHTM试剂盒，以CISH对40例IHC检测分别为(+++)、(++)、(+)和(-)的术后乳腺癌石蜡病理标本进行HER2/neu基因状态的检测，探讨二者的相关性。计量资料采用均数±标准差表示，以t检验进行统计学分析，计数资料采用x<'2>和kappa检验进行统计分析，运算全过程均在SPSS10．0软件包内完成，以a=0．05为检验水准。 结果 1．健康对照组、乳腺良性病变组及原发性乳癌手术组之间的血清HER2水平无明显差异(p>0．05)，晚期转移性乳腺癌组的血清HER2水平与前三组之间有显著性差异(p<0．05)，晚期转移性乳腺癌组的血清HER2阳性率与前三组相比，差异有显著性(p<0．001．)。 2．原发性乳腺癌手术组血清HER2与原发肿瘤大小、淋巴结及组织HER2/neu表达的关系：早期乳癌手术组原发肿块<3cm和≥3cm患者血清HER2阳性率分别为6．06％(2/33)和33．3％(5/15)，差异有显著性(P<0．05)；淋巴结转移阳性和阴性的血清HER2阳性率分别为11．5％(3／26)和16．7％(4/24)，差异无显著性(P>0．05)。原发性乳腺癌手术组中，20例免疫组化阳性患者中，血清HER2升高4例，30例免疫组化阴性患者中，血清HER2升高3例，差异无显著性(P>0．05)。 3．经CISH检测，在IHC(+++)的8例标本中，7例为HER2/neu基因扩增，1例无基因扩增；IHC(++)的13例标本中，5例为HER2/neu基因扩增，8例无扩增；IHC(+)的10例标本中，2例为HER2/neu基因扩增，8例无基因扩增；IHC(-)的9例标本均无基因扩增。两种方法对乳腺癌组织HER2/neu表达状态的检测有较好的一致性(kappa=0．458） 结论 1．血清HERE与肿瘤负荷密切相关，可作为重要的预后因素，在乳腺癌随访监测疗效观察尤其是Herceptin治疗后的疗效观察中发挥其独到的作用。 2．CISH是检测HER2/neu基因扩增的一项经济、简便的新技术，IHC与CISH的检测果有较好的一致性。IHC是初步筛查的首选方法，因IHC(+++～+)与CISH检测结果还存在一定的差异性，仍需进一步作ClSHI检测确诊。

目录

文摘

英文文摘

引 言

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

附 图

参考文献

综述 原癌基因HER2/neu在乳腺癌中的表达及其临床价值

英文缩略词索引

致 谢