DNA修复酶XRCC6、ERCC4基因多态性和膀胱癌易感性关系

摘要

目的：与背景
　　 膀胱癌是泌尿系常见的恶性肿瘤。在全世界范围内膀胱癌在泌尿系肿瘤中仅次于前列腺癌居第二位；而在我国,膀胱癌的发病率和死亡率均居泌尿系肿瘤的首位。膀胱癌的发生是复杂、多因素、多步骤的病理变化过程,其确切的病因及发病机制尚不完全清楚。膀胱癌的发生可能和吸烟、饮食习惯、环境致癌因素等相关。环境中的物理化学致癌因素和体内产生的活性氧等都可以引起细胞内DNA的损伤,如果这种损伤不能得到及时准确的修复,或者超出了机体的修复能力,未被修复的损伤可能导致肿瘤的生成。研究表明,DNA修复酶基因多态性是决定个体遗传易感性的重要基础。XRCC6和ERCC4/XPF是人体中重要的DNA修复酶,有报道显示,XRCC6和ERCC4/XPF基因多态性和乳腺癌、肺癌、头颈部肿瘤易感性相关,但与膀胱癌遗传易感性的关系尚不明确,而且国内外文献尚未见报道。因此,本研究采用病例对照研究方法,分别检测XRCC6c.-1310 C>G和ERCC4 Arg415Gln基因型及等位基因的分布,探讨其基因多态性与膀胱癌遗传易感性的关系,以及联合吸烟等环境因素交互作用对膀胱癌的影响,为膀胱癌的发病因为、发病机制及诊断治疗提供有意义的线索。
　　 材料与方法
　　 1.研究对象
　　 研究设计得到郑州大学医学伦理委员会批准,病例组和对照组均为2006年2月～2009年12月在郑州大学第一附属医院泌尿外科和河南省人民医院泌尿外科住院的患者。病例组(313例)为组织病理学确诊的膀胱移行细胞癌患者；对照组(308例)为同期非肿瘤住院患者,均无膀胱癌和其它肿瘤病史。两组所选取对象均为河南省汉族人群,两组年龄、性别构成均衡,具有可比性。
　　 2.流行病学调查
　　 所有研究对象均按照统一设计的流行病学问卷调查表进行有关职业、环境、生活方式、吸烟史及肿瘤相关数据和一般情况调查。
　　 3.基因型检测
　　 研究对象空腹抽取外周静脉血2～3ml,用“酚-氯仿”法提取基因组DNA；应用聚合酶链反应.限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对XRCC6c.-1310 C>G和ERCC4 Arg415Gln位点进行基因型检测分析,根据凝胶电泳结果中目的基因片段出现的情况判断各等位基因和基因型的分布。
　　 4.统计学分析
　　 采用SPSS13.0 for Windows统计软件包,以x2检验检测对照组中基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡,分析病例组和对照组中等位基因和基因型分布的差异以及基因型与环境因素的相互关系。以非条件Logistic回归分析研究环境危险因素与膀胱癌易感性之间的相关性。检验水平a=0.05,以比值比(OR)和95％的可信区间(Confidence Intervals,CI)表示相对危险度。
　　 结果：
　　 1.XRCC6和ERCC4基因吻合度检测
　　 将对照组基因型频率进行基因吻合度检测,结果表明对照组XRCC6 c.-1310C>G和ERCC4 Arg415Gln的基因型频率符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05),说明对照组样本具有良好的代表性。
　　 2.XRCC6 c.-1310 C>G基因型和等位基因分布与膀胱癌易感性的关系
　　 XRCC6 c.-1310 C>G检测到三种基因型:野生型(C/C)、突变杂合子(C/G)、突变纯合子(G/G)。三种基因型在两组中的分布分别为:膀胱癌组62.94％(197/313)、32.27％(101/313)、4.79％(15/313):对照组73.70％(227/308)、23.05％(71/308)、3.25％(10/308)。
　　 通过对XRCC6 c.-1310 C>G基因型在两组间的分布比较发现XRCC6 c.-1310C>G突变型在膀胱癌组和对照组中的分布存在显著性差异(PG突变型频率在膀胱癌组中(37.06％)显著高于对照组(26.30％)(P<0.05,OR=1.65,95％CI1.17-2.32)。
　　 3.ERCC4Arg415Gln基因型和等位基因分布与膀胱癌易感性的关系
　　 ERCC4Arg415Gln检测到三种基因型:野生型(G/G)、突变杂合子(G/A)、突变纯合子(A,A)。三种基因型在两组中的分布分别为:膀胱癌组89.46％(28N313)、9.26％(29/313)、1.28％(4/313)；对照组87.01％(268/308)、12.01％(37/308)、0.98％(3/308)。
　　 ERCC4 Arg415Gln突变型在两组中无显著性差异(P>0.05),ERCC4Arg415Gln各基因型与膀胱癌的易感性之间无显著相关性(P>0.05,OR=0.79,95％Cl0.48.1.29)。
　　 4.吸烟行为与膀胱癌易感性的关系
　　 膀胱癌组吸烟者160例,不吸烟者153例；对照组吸烟者111例,不吸烟者197例。吸烟人群中膀胱癌的发病风险显著高于不吸烟人群(P<0.01,OR=1.86,95％CI1.35.2.56)。当吸烟指数>800时,膀胱癌的发病风险明显增加,膀胱癌的发病风险与吸烟量的多少呈正相关,重度吸烟者患膀胱癌的风险显著增高。
　　 5.XRCC6和ERCC4基因型联合吸烟行为与膀胱癌易感性的关系
　　 在不吸烟人群中XRCC6 c.-1310 C>G基因型在两组中分布差异无统计学意义(P>0.05,OR=1.40,95％C10.89-2.22)；在吸烟人群中野生型和突变型在两组中的差异有统计学意义(P<0.05,OR=2.02,95％CI1.81.3.46),突变型频率在膀胱癌组显著高于对照组。提示XRCC6 c.-1310 C>G基因型与吸烟在膀胱癌的发生中存在交互作用。
　　 ERCC4 Arg415Gln基因型在吸烟组和不吸烟组中的差异均无统计学意义(P>0.05),提示ERCC4基因型与吸烟在膀胱癌的发生中无交互作用。
　　 6.XRCC6和ERCC4基因型与膀胱癌病理分级、分期的关系
　　 XRCC6 c.-1310 C>G和ERCC4 Arg41.5Gln基因型与膀胱癌病理分级和临床分期均无显著性相关。
　　 结论：
　　 1.XRCC6 c.-1310 C>G基因型与膀胱癌关系密切,携带突变型等位基因的个体患膀胱癌的风险显著高于野生型个体；而ERCC4 Arg415Gln各基因型与膀胱癌的发生无显著相关性。
　　 2.XRCC6 c.-1310 C>G基因多态性与吸烟在膀胱癌的发生中存在交互作用,XRCC6 c.-1310 C>G基因突变型吸烟个体可明显增高膀胱癌的发病风险。
　　 3.XRCC6 c.-1310 C>G和ERCC4 g415Gln基因多态性与膀胱癌的病理分级和临床分期均无显著相关性。

目录

文摘

英文文摘

DNA修复酶XRCC6、ERCC4基因多态性和膀胱癌易感性关系

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述部分

DNA修复酶基因多态性和膀胱癌易感性关系研究进展

参考文献

中英文缩略语

个人简历及在学期间发表的学术论文

致谢