p63、p15和mdm2蛋白在人口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

摘要

背景
　　 口腔扁平苔藓(Oral lichen planus，OLP)是一种常见的慢性炎症性口腔黏膜病。具有癌变潜在性，其癌变率为0.4％-6.25％，世界卫生组织将其列为癌前状态。口腔鳞状细胞癌(Oral squamous cell carcinoma，OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤，占口腔恶性肿瘤的80％以上。临床上可见少数OLP转变为OSCC。研究显示，与OLP和OSCC发生、发展的相关性因素很多，尤其是与某些癌基因和抑癌基因的异常表达密切相关。
　　 p63是近年来发现的基因，属于p53家族新成员，由于选择性剪切而产生不同的亚型。主要有TAp63和△Np63，两者具有不同的功能，分别参与细胞周期阻滞和细胞增殖。p15属于抑癌基因，它主要通过抑制细胞周期素依赖激酶4/6(CDK4/6)来阻止细胞周期前进，从而抑制肿瘤的发生。mdm2属于癌基因，已有研究发现，在人类多种癌组织中都有mdm2基因高表达或扩增，如肺癌、食管鳞状细胞癌、喉鳞状细胞癌等。目前国内对OLP和OSCC中p63、p15以及mdm2蛋白表达及其相互关系的研究比较少见。
　　 目的
　　 采用免疫组化技术检测p63、p15、mdm2蛋白在人正常口腔黏膜、口腔扁平苔藓和口腔鳞鳞状细胞癌组织中的表达情况，探讨p63、p15和mdm2在人口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌发生、发展中的作用，并为临床判定口腔扁平苔藓恶变潜能及口腔鳞状细胞癌早期诊断和早期治疗等提供理论依据。
　　 材料与方法
　　 1.材料选取郑州大学第一附属医院病理科2008年1月至2008年12月存档蜡块及口腔科活检或手术切取组织(经10％多聚甲醛固定，石蜡包埋)。其中口腔扁平苔藓46例(OLPⅠ26例，OLPⅡ20例)，口腔鳞状细胞癌42例(OSCCⅠ14例、OSCCⅡ13例、OSCCⅢ15例)以及15例正常口腔黏膜组织(normal oralmucosa)作为正常对照。42例口腔鳞状细胞癌中有15例有淋巴转移。
　　 2.采用免疫组织化学(S-P法)
　　 (1)主要步骤：将蜡块进行3μm连续切片。将切片放入60℃恒温箱3小时，然后按照说明书进行一系列操作。
　　 (2)判定标准：以背景清晰，细胞核/细胞浆内出现明显棕黄色/棕褐色颗粒为阳性染色。p63、mdm2均表达于细胞核中，p15主要表达于细胞核中，少数标本胞浆胞核都有表达。高倍镜下随机观察5个视野，按阳性细胞所占比例对染色结果进行分级[1]：无染色或阳性率≤5％为(-)，6％～30％为(+)，31％～50％为(++)，>50％为(+++)。
　　 (3)统计分析：运用SPSS10.0统计软件进行统计学处理。
　　 结果：
　　 1.p63蛋白在正常口腔黏膜组中呈高表达，而在口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌组中表达较正常组织减弱。三组间表达差异具有统计学意义(P<0.05)；OLPⅠ和OLPⅡ间表达差异具有显著性(P<0.05)；而在口腔鳞状细胞癌各病理分级间表达无显著性差异(P>0.05)。
　　 2.p15蛋白在正常口腔黏膜组织呈高表达，在口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌组织中表达较正常组织明显减少；从正常组织、口腔扁平苔藓到口腔鳞状细胞癌，p15蛋白的表达强度逐渐减弱，三组间差异有统计学意义(P<0.05)；p15蛋白表达在OLPⅠ和OLPⅡ间差异无统计学意义(P>0.05)，而在口腔鳞状细胞癌各病理学分级间差异具有统计学意义(P<0.05)。
　　 3.mdm2蛋白在正常口腔黏膜组为阴性表达，而在口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌组呈阳性表达，阳性表达率分别为7％(3/46)、71、4％(30/42)，三组间差异具有统计学意义(P<0.05)；而在OLPⅠ和OLPⅡ间以及口腔鳞状细胞癌各病理分级之间差异均无统计学意义(P>0.05)。
　　 4.口腔鳞状细胞癌组织中，p63和mdm2蛋白表达成正相关(r=1.00，P=0.000<0.05).
　　 5.口腔扁平苔藓中，p15和mdm2蛋白表达成负相关(r=-1.00，P=0.000<0.05)。
　　 6.口腔鳞状细胞癌中，p63和mdm2蛋白在有淋巴结转移组的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)，而p15蛋白在有淋巴结转移组阳性表达率明显低于无淋巴结转移组(P<0.05)。
　　 结论：
　　 1.p63可能与OSCC的淋巴结转移有关，但这仍有待于进一步深入研究。
　　 2.p15蛋白低表达与OSCC的病理分级和淋巴结转移有关，提示其低表达可能在OSCC的发生、发展过程中发挥了重要作用。
　　 3.mdm2在OSCC中高表达，提示mdm2可能与OSCC的发生有关，可作为OSCC发生的早期分子事件。
　　 4.p15和mdm2在OLP发展过程中可能存在相互作用，可作为检测OLP是否有高风险癌变的指标。
　　 5.联合检测p15和mdm2蛋白表达可为OSCC的早期诊断以及治疗方案的制定提供理论依据。
　　 6.p63和mdm2在口腔鳞状细胞癌的发生、发展过程中可能有关联。

目录

文摘

英文文摘

英文缩略词表

引言

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

附 图

参考文献

综述部分

参考文献

mdm2与肿瘤

参考文献

个人简历

在学期间发表的学术论文与研究成果

致谢