P53、MDM2及PTEN蛋白在人口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌中的表达及相关性研究

摘要

背景:口腔扁平苔藓(OLP)是一种伴有慢性浅表性炎症的粘膜角化异常性疾病,可单独发生于皮肤及粘膜或可同时发病。其患病率约为0.51％。OLP是WHO公认的癌前状态,恶变率为0.4％-10％,其中口腔鳞状细胞癌的发生占重要比重,有研究报道其近十年的癌变率在1％-10％之间。口腔鳞状细胞癌(OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤,约占全部口腔颌面部恶性肿瘤的90％以上,占全身恶性肿瘤的3％-5％。而在我国,口腔颌面部恶性肿瘤中鳞状细胞癌也最为多见,占80％以上。肿瘤的发生、发展和转移是一个多阶段、多因素、受多种基因的调控的复杂过程,其分子生物学基础是癌基因的激活和抑癌基因的失活。目前已经明确的有多种关键基因与OSCC有关,其中抑癌基因P53、PTEN,癌基因MDM2也与之有着密切关系。
　　 P53基因家族作为研究最为深入的肿瘤抑制基因,在细胞周期调控、细胞生长抑制、肿瘤细胞凋亡诱导以及肿瘤治疗等方面发挥重要作用,P53基因的缺失或失活与人类50％以上肿瘤的发生发展相关。MDM2是一个高度扩增的癌基因,在人类许多肿瘤中,如肺癌、乳腺癌及结肠癌中,都有MDM2基因的扩增表达。PTEN是发现的第一个具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因,它主要通过磷酸酶活性的完成从而抑制肿瘤的发生。目前,国内外对P53、MDM2及PTEN蛋白在OLP及OSCC中的表达及相关性研究鲜见报道。
　　 目的:采用免疫组化技术进行检测,观察P53、MDM2及PTEN蛋白在人正常口腔粘膜、口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌组织中的表达,以探讨P53、MDM2及PTEN蛋白在人口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌发生发展中的相互作用及临床意义,为癌变潜能监测提供诊断标准。
　　 材料与方法:参照WHO1996年颁布的标准,实验所需标本是搜集存档于郑州大学第一附属医院病理科2008年1月至2009年12月的蜡块和口腔颌面外科活检的组织或手术切除的组织(经10％多聚甲醛固定,石蜡包埋)。包括正常口腔粘膜组织(normoloral mucosa NOM)12例作为正常对照。口腔糜烂型扁平苔藓(e-OLP)29例,口腔非糜烂型扁平苔藓(ne-OLP)20例,共49例。口腔鳞状细胞癌41例(OSCCⅠ级13例,OSCCⅡ级12例,OSCCⅢ级16例)。采用免疫组化学技术对所选标本进行P53、MDM2及PTEN蛋白的染色,观察染色情况并计数阳性细胞,计算出各自的阳性表达率,运用SPSS17.0统计软件进行各组数据统计分析处理。
　　 结果:
　　 1.突变型P53蛋白NOM中多为阴性表达,仅有2例为阳性表达。在NOM、OLP及OSCC组织中的阳性表达率依次为16.6％、71.4％、90.2％,呈明显的逐渐升高趋势,各组表达强度均有统计学意义。eOLP阳性表达稍低于neOLP,两组之间差异无明显统计学意义。而在OSCC不同分级之间差异均有统计学意义。
　　 2.MDM2蛋白NOM中不表达,在OLP中呈现弱阳性表达,在OSCC不同病理分级中的阳性表达率依次增高。从NOM、OLP到OSCC,阳性率依次为0％、10.2％、80.5％,各组表达均有统计学意义。在两型OLP中表达差异无显著性。而在OSCC各分级之间表达强度明显不同,差异具有显著性。
　　 3.PTEN蛋白从NOM、OLP及OSCC组织中表达缺失率分别是91.7％、87.8％、56.1％。PTEN蛋白在这个病变过程中的表达强度逐渐降低,各组表达强度均有统计学差异。而在鳞癌不同分级之间的差异统计学上均有意义。
　　 4.突变型P53蛋白与MDM2蛋白表达的相关性:突变型P53蛋白与MDM2蛋白在鳞癌组织中的表达差异呈显著正相关性。
　　 5.MDM2蛋白与PTEN蛋白表达的相关性:MDM2蛋白与PTEN蛋白阳性表达率呈显著负相关性。MDM2蛋白阴性表达率与PTEN阳性表达率呈显著正相关性。
　　 6.突变型P53蛋白与PTEN蛋白表达的相关性:PTEN蛋白阳性率的逐渐下降与口腔粘膜组织恶性度显著负相关。PTEN蛋白阴性率和突变型P53阳性率的逐渐升高与口腔粘膜组织恶性度呈显著正相关。
　　 结论:
　　 1.P53蛋白基因突变和PTEN蛋白表达缺失,在OSCC的发生中有一定协同作用,可以作为OSCC早期诊断的基因标志物。
　　 2.MDM2蛋白在OSCC中过度表达,与OLP癌变及OSCC的发生发展相关,有助于评价OLP恶性潜能和OSCC的恶性程度及预后。
　　 3.P53、MDM2蛋白是OLP及OSCC发生过程中的重要分子事件。
　　 4.PTEN和MDM2两种蛋白异常与OSCC发展进程有相关性。