HMGB1和BF-κB p50、NF-κB p50在甲状腺癌中的表达及意义

摘要

背景:
　　 甲状腺癌是内分泌系统及头颈部最常见的恶性肿瘤，占90％以上，也是近年来发病率增长最快的恶性肿瘤之一。甲状腺癌的病理类型有乳头状癌(papillarythyroidcarcinoma,PTC)、滤泡癌(follicularthyroidcarcinoma,FTC)、未分化型癌(undifferentiatedthyroidcarcinoma，UTC)和髓样癌(medullarythyroidcarcinoma，MTC)。甲状腺癌的类型及其亚型繁多复杂，各类型发展规律不同，预后也有很大差别，所以有必要对甲状腺癌进行详细分类和分型。目前，甲状腺癌的诊断方法很多，镜下形态特征的病理诊断和鉴别诊断是其中最重要的方法，但是对一些形态不太典型的甲状腺癌或者微小癌单靠形态鉴别还有一定困难，因此应用分子生物学辅助诊断成为一种重要的鉴别方法，并可能为肿瘤分子诊断和疗效评估提供重要依据。
　　 高迁移率族蛋白B1（highmobilitygroupbox1，HMGB1）在40年前首次在牛胸腺中发现，并确定了该蛋白质具有较高的电泳迁移率，故而命名为高迁移率族蛋白。HMGB1是一种核内结合蛋白，在DNA重组、修复、复制和基因转录中起重要作用。但近年来发现HMGB1与多种肿瘤的侵袭和转移有关，如胃癌、结直肠癌、胰腺癌等。HMGB1的促炎效应主要通过两大信号通路，其中一种是Ras、MAPK途径，该途径是使MAPKs磷酸化，活化核转录因子(NF-κB)，诱导炎症发生并促进免疫细胞迁移;另一种是通过激活Cdc42和Rac，导致细胞骨架重建，在神经元的生长发育期中调控神经轴突的生长。其与肿瘤发生发展的相关机制还不完全清楚，可能与上述两种通路有关。
　　 NF-κB(nuclearfactorkappa-light-chain-enhancerofactivatedBcells)是一种重要的核转录因子，存在于真核细胞中，其和基因上启动子区的固定核苷酸序列结合启动基因转录，从而完成细胞增殖与分化、肿瘤形成与转移等一系列重要生物学功能。目前研究证实，NF-κB与胰腺癌、食管癌等多种肿瘤相关。所有的动物细胞都存在NF-κB，参与细胞对一些刺激（如细胞因子、自由基、紫外线照射、细菌或病毒抗原）的反应。NF-κB在调节免疫系统对感染的反应上起着关键的作用（免疫球蛋白κ轻链是免疫系统的重要组成部分）。现已证实NF-κB的失控与癌症、炎症和自身免疫性疾病、感染性休克、病毒感染等有关。NF-κB在突触可塑性和记忆的过程也发挥着重要作用。在哺乳动物中，NF-κB家族成员有五个亚单位，其中p50和p65是最重要的两个。p50是DNA结合的部位，p65通过Rel同源结构域的协同作用增强转录活性，并可促进p50与DNA的结合。
　　 目前关于HMGB1和NF-κBp50、NF-κBp65在甲状腺癌中相互作用关系的研究尚未见报道。本研究采用免疫组织化学法检测100例甲状腺癌组织和60例非癌组织中HMGB1和NF-κBp50、NF-κBp65蛋白表达情况，探讨HMGB1、NF-κBp50、NF-κBp65之间的相关关系，试图阐明三者表达与甲状腺癌发生及浸润转移之间的关系及作用，为甲状腺癌的诊断提供理论依据。
　　 目的:
　　 探讨甲状腺癌、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、正常甲状腺组织中HMGB1和NF-κBp50、NF-κBp65蛋白的表达及三者与甲状腺癌的浸润、转移的关系。
　　 方法:
　　 1.利用免疫组织化学SP方法分别检测58例甲状腺乳头状癌组织、20例滤泡癌组织、22例髓样癌组织、20例甲状腺腺瘤组织、20例结节性甲状腺肿组织和20例正常甲状腺组织中HMGB1、NF-κBp50和NF-κBp65蛋白的表达，并探讨三者的关系。
　　 2.统计学处理:所有数据经SPSS17.0统计学软件处理，率的比较采用x2检验(chi-square)，相关分析采用Spearmen相关分析。显著性水准α=0.05。
　　 结果:
　　 1.100例甲状腺癌组织中HMGB1蛋白阳性表达率为70.0％(70/100)，20例甲状腺腺瘤组织中HMGB1蛋白阳性表达率为30.0％(6/20)，20例结节性甲状腺肿组织中HMGB1蛋白阳性表达率为25.0％(5/20)，20例正常甲状腺组织中HMGB1蛋白阳性表达率为10.0％(2/20)。在甲状腺癌组织中，HMGB1蛋白的表达与患者年龄、性别、肿瘤组织类型无关(P＞0.05），而与肿瘤组织直径大小、是否淋巴结转移密切相关(P＜0.05)。
　　 2.100例甲状腺癌组织中NF-κBp50蛋白阳性表达率为72.0％(72/100)，20例甲状腺腺瘤组织中NF-κBp50蛋白阳性表达率为35.0％(7/20)，20例结节性甲状腺肿组织中NF-κBp50蛋白阳性表达率为30.0％(6/20)，20例正常甲状腺组织中NF-κBp50蛋白阳性表达率为10.0％(2/20)。在甲状腺癌组织中，NF-κBp50蛋白的表达与患者年龄、性别、肿瘤组织类型无关(P＞0.05），而与肿瘤组织直径大小、是否淋巴结转移密切相关(P＜0.05)。
　　 3.100例甲状腺癌组织中NF-κBp65蛋白阳性表达率为89.0％(89/100)，20例甲状腺腺瘤组织中NF-κBp65蛋白阳性表达率为40.0％(8/20)，20例结节性甲状腺肿组织中NF-κBp65蛋白阳性表达率为35.0％(7/20)，20例正常甲状腺组织中NF-κBp65蛋白阳性表达率为15.0％(3/20)。在甲状腺癌组织中，NF-κBp65蛋白的表达与患者年龄、性别、肿瘤组织类型无关(P＞0.05)，而与肿瘤组织直径大小、是否淋巴结转移密切相关(P＜0.05)。
　　 4.在甲状腺癌组织中，HMGB1蛋白和NF-κBp50蛋白的表达呈正相关(r=0.467，P＜0.05);HMGB1蛋白和NF-κBp65蛋白的表达呈正相关(r=0.398，P＜0.05);NF-κBp50蛋白和NF-κBp65蛋白的表达呈正相关(r=0.350，P＜0.05)。
　　 结论:
　　 1.HMGB1和NF-κBp50、NF-κBp65蛋白在正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿组织、甲状腺腺瘤组织、甲状腺癌组织中的阳性表达率呈现逐渐升高趋势，且在癌组织中的表达显著高于在非癌组织中的表达，提示HMGB1和NF-κBp50、NF-κBp65蛋白可能参与了甲状腺癌的发生。
　　 2.HMGB1和NF-κBp50、NF-κBp65蛋白的阳性表达率随着肿瘤直径的增大和淋巴结的转移而逐渐升高，表明HMGB1和NF-κBp50、NF-κBp65的高表达可能和甲状腺癌的发展及淋巴结转移有关。
　　 3.HMGB1和NF-κBp50、NF-κBp65蛋白在甲状腺癌中均呈现高表达，两两之间分别呈正相关关系，提示三者可能在甲状腺癌的发生发展及淋巴结转移的过程中发挥了协同作用。

目录

声明

摘要

中英文缩写词

前言

材料与方法

1 实验材料

2 免疫组化实验方法

3 统计学处理

结果

1 HMGB1和NF-κB p50、NF-κB p65的表达

2 HMGB1、NF-κB p50和NF-κB p65蛋白的表达与甲状腺癌临床病理参数的关系

3 HMGB1和NF-κB p50、NF-κB p65在甲状腺癌中表达的相关性

讨论

1 甲状腺癌中HMGB1蛋白的表达及意义

2 甲状腺癌中NF-κB蛋白的表达及意义

3 甲状腺癌中HMGB1、NF-κB p50、NF-κB p65蛋白表达的相关性

结论

附图

参考文献

综述

致谢

个人简历