XIAP对肝癌和肝癌干细胞的调控及其在原发性肝癌中的意义

摘要

原发性肝癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，在全世界每年新发肿瘤病例数中位居第六位，在所有肿瘤致死病因中位居第二位，严重威胁着人类的健康。肿瘤干细胞(Cancer Stem Cells，CSCs)在恶性肿瘤细胞群中属于一个特殊的细胞亚型，它们不仅具有癌细胞无限制增殖的恶性特征，而且具有自我更新速度快和多向分化能力强的特点。肝癌干细胞不仅能够诱导肝癌的发生，并且能够起到促进肿瘤生长和转移的作用，同时也是导致肝癌对放化疗产生抵抗和治疗后再次复发的重要原因。X染色体性连锁凋亡抑制蛋白(X-link Inhibitors of Apoptosis Proteins，XIAP)是近年来重点研究的肿瘤相关蛋白，属于凋亡抑制蛋白（Inhibitors of Apoptosis Proteins，IAPs）家族的重要成员。XIAP在正常的组织中低表达或不表达，在肝癌组织中多呈现为高表达，研究表明XIAP的高表达是导致包括肝癌等多种肿瘤细胞对VP16及阿霉素等常规化疗药物以及其他新型抗癌药物如TRAIL(TNF-related apoptosis inducing ligand)等诱导调亡的过程产生抵抗的重要分子机制。因此，XIAP就成为肿瘤分子治疗中具有研究价值的关键靶点之一。本文拟研究XIAP是否能通过调控肝癌和肝癌干细胞，促使其自我复制从而诱发肿瘤以及对患者长期生存率的影响等。探索通过调控肝癌和肝癌干细胞治疗肝癌的新方法，为改善肝癌的治疗效果提供新思路。
　　目的：
　　1.研究XIAP对肝癌细胞集落形成能力以及对分离、纯化后的肝癌干细胞成球能力的调控作用。
　　2.通过临床样本分析XIAP与肿瘤干细胞标记分子CD133之间的相关性;基于TCGA数据库，研究肝细胞肝癌患者中XIAP的表达水平和患者预后是否存在特定的相关性。
　　方法：
　　1.通过小分子RNA(siRNA)干扰技术特异性抑制XIAP的表达，研究XIAP对肝癌细胞集落形成能力以及肝癌干细胞成球能力的影响。
　　2.收集肝癌手术样本，应用Western blotting方法检测XIAP以及肿瘤干细胞标记分子CD133在肝癌组织中的表达，分析XIAP与肝癌干细胞标记分子CD133之间的相关性;基于TCGA数据库，研究肝细胞肝癌患者中XIAP的表达水平和肝细胞肝癌患者生存率之间的关系。
　　结果：
　　1.siRNA沉默XIAP基因后，肝癌细胞在体外培养状态下的集落形成能力减弱;并且明显抑制肝癌干细胞的成球能力。
　　2.Western blotting分析发现，肝癌组织中表达较高水平的XIAP，并且肿瘤干细胞标志物CD133表达也显著升高，提示肝癌组织中XIAP与CD133具有相关性;XIAP基因表达与肝癌患者生存率的比较显示，XIAP低表达组总生存时间明显高于高表达组。
　　结论：
　　1.XIAP对肝癌和肝癌干细胞的生存有明显的保护作用，有可能是肝癌和肝癌干细胞存活、复制扩增产生影响的重要调节分子。
　　2.肝癌组织中XIAP与肿瘤干细胞标志物CD133具有相关性，XIAP可能是肝癌干细胞重要的调节分子;XIAP表达量的检测对肝细胞肝癌患者的生存率具有预测价值。

目录

声明

摘要

中英文缩略词对照表

前言

第一部分 XIAP对肝癌细胞集落形成和肝癌干细胞成球能力的影响

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学方法

4 实验结果

5 讨论

第二部分 XIAP与肝癌干细胞标记分子CD133和生存率的相关性

1 实验材料与标本

2 实验方法

3 统计学方法

4 实验结果

4 讨论

结论

参考文献

综述 XIAP在肝癌中的研究进展

个人简历及攻读硕士学位期间的科研成果

致谢