鸡生长与免疫抑制综合征病毒对肉仔鸡CD3、CD4、CD8、SIgA和ND、IBD特异性抗体的影响

摘要

鸡生长与免疫抑制综合征（暂定名，缩写为CSIS）是近年来造成家禽生长和免疫抑制的重要传染性疾病。本课题在前期研究的基础上，开展了鸡生长与免疫抑制综合征病毒（CSISV）对肉仔鸡CD3+、CD4+、CD8+、SIgA和ND、IBD特异性抗体的影响研究，为进一步研究CSISV的免疫抑制机理，更好地防治该病奠定基础。 将5日龄ROSS308肉仔鸡人工感染CSISV后，用流式细胞仪FITC/PE双染色法测定血液、胸腺、脾脏、法氏囊中的CD3+、CD4+、CD8+T细胞含量，并计算CD4+/CD8+比值；用间接ELISA试剂盒测定血清中SIgA的含量。用血凝抑制试验（HI）测定ND的抗体滴度：用琼脂扩散试验（AGP）测定IBD的抗体滴度；数据以mean±SD表示，SPSS11．0软件t检验分析组间差异性。 （1）肉仔鸡主要免疫器官重量于感染后一定时间段内均显著低于对照组，但并不完全保持同步。胸腺重量在感染后168～408h显著低于对照组（P<0．05），脾脏重量在感染后336～456h显著低于对照组（P<0．05），法氏囊重量在感染后216～336h显著低于对照组（P<0．05）。 （2）血液中CD3+水平与对照组差异不显著，主要免疫器官于不同时段与对照组存在显著差异，总体呈现24h先降低，72h前有所升高，96h后均低于对照组的趋势。血液中的CD3+水平在感染后24～192h高于对照组，感染后216～432h低于对照组，但差异都不显著（P>0．05）。胸腺中的CD3+水平在感染24h后极显著低于对照组（P<0．01）：感染后48～72h显著高于对照组（P<0．05）；感染后96～432h均低于对照组，但只在168～264h差异显著（P<0．05）。脾脏中的CD3+水平在感染后24h低于对照组，感染后48～96h高于对照组，但与对照组差异都不显著（P>0．05）；感染后120～432h低于对照组，但仅在120、192、216和288h差异显著（P<0．05）。法氏囊中的CD3+水平在感染后24～48h高于对照组，但差异不显著（P>0．05）：感染后72～432h低于对照组，其中，在72、168、216～264、384h差异显著（P<0．05）。 （3）血液和主要免疫器官的CD4+水平在不同的时段与对照组存在显著差异。血液中的CD4+水平在感染后24h高于对照组，但差异不显著（P>0．05）；感染后48～408h低于对照组，其中，在48～96h和144h差异显著（P<0．05）。胸腺中的CD4+水平在感染后24～360h低于对照组，但只在144h和216h差异显著（P<0．05）；感染后384～432h高于对照组，但差异不显著（P>0．05）。脾脏中的CD4+水平在感染后24～48h显著低于对照组（P<0．05）；感染后72～192h高于对照组，但差异不显著（P>0．05）；感染后216～432h低于对照组，差异也不显著（P>0．05）。法氏囊中的CD4+水平在感染后24～168h高于对照组，其中，24～72h差异显著（P<0．05）；感染后192～432h低于对照组，但只在在216h和312h差异显著（P<0．05）。 （4）胸腺、脾脏、法氏囊CD8+水平的变化趋势相一致，血液在96～288h变化趋势也相一致。胸腺中CD8+水平在感染后24h低于对照组，但差异不显著（P>0．05）； 48～216h高于对照组，其中，在72、96、120、192、216h差异极显著（P<0．01）或显著（P<0．05）。脾脏的CD8+水平在感染后24～264h高于对照组，其中，48、72、240、264h差异显著（P<0．05）。法氏囊的CD8+水平在感染后24～288h均高于对照组，其中，在24～72、120、192、216、384h差异极显著（P<0．01）或显著（P<0．05）。血液中的CD8+水平在感染后24～72h低于对照组，但差异不显著（P>0．05）； 96～384h高于对照组，但仅在216h和264h差异显著（P<0．05）。 （5）胸腺、脾脏、法氏囊和血液中CD4+/CD8+比值在感染后整个试验期基本都低于对照组。胸腺CD4+/CD8+比值在感染后24～192h与对照组相比差异显著（P<0．05）；脾脏CD4+/CD8+比值在感染后24～96h和384h差异显著（P<0．05）；法氏囊CD4+/CD8+比值在感染后24、48、168、240～288h差异显著（P<0．05）。血液CD4+/CD8+比值在感染后144～240、336、360h差异显著（P<0．05）。 （6）肉仔鸡感染CSISV后96～264h促进SIgA的产生，288h到试验期末抑制SIgA的产生；整个试验期都抑制ND和IBD抗体的产生。试验组SIgA的含量在感染后96～240h高于对照组，且在感染后96、192、216h与对照组差异极显著（P<0．01）；其它时间均低于对照组，在感染后24～72h和312～336h差异显著（P<0．05）。试验组ND抗体滴度在整个试验期明显低于对照组，在22日龄时最高下降2．33个滴度，与对照组差异显著（P<0．05）。试验组IBD抗体滴度在整个试验期明显低于对照组，在25日龄时最高下降2．67个滴度，与对照组差异显著（P<0．05）。 综上所述，CSISV在感染的中期和后期对肉仔鸡的细胞免疫产生了一定的抑制作用，对体液免疫产生了明显的抑制作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

致谢

第一章 文献综述

1 鸡CD4 和CD8 分子研究进展

1.1 鸡CD4、CD8 与T细胞发育及分布

1.2 鸡CD4 和CD8 的分子结构

1.3 鸡CD4 和CD8 的基因

1.4 鸡CD4 和CD8 分子的生物学效应

1.5 T细胞亚群检测的意义

2 家禽的免疫球蛋白

2.1 Ig的基本结构

2.2 Ig的分类与特征

2.3 禽各类免疫球蛋白的理化特性及生物学功能

2.4 免疫球蛋白的生物效应

3 鸡生长与免疫抑制综合征(CSIS)研究进展

3.1 流行病学和临床症状

3.2 病毒的结构形态

3.3 病毒的生长特性

3.4 病毒的鉴定

3.5 病毒的归类

3.6 病毒检测方法的建立

3.7 病毒造成生长和免疫抑制的机理

引 言

第二章CSISV对肉仔鸡CD3+、CD4+、CD8+T细胞的影响

1 材料和方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果与分析

2.1 肉仔鸡人工感染CSISV的临床症

2.2 CSISV对主要免疫器官重量的影响

2.3 CSISV感染后CD3+T细胞的变化

2.4 CSISV感染后CD4+T细胞的变化

2.5 CSISV感染后CD8+T细胞的变化

2.6 CSISV感染后CD4+/CD8+比值的变化

3 讨论

3.1 关于流式细胞仪测定T细胞亚群

3.2 CD分子水平与细胞免疫功能的关系

4 小结

第三章CSISV对SIgA和ND、IBD特异性抗体的影响

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果与分析

2.1 CSISV对SIgA含量的影响

2.2 CSISV对ND特异性抗体产生的影响

2.3 CSISV对IBD特异性抗体产生的影响

3 讨论

3.1 CSISV对SIgA含量的影响

3.2 CSISV对ND、IBD特异性抗体产生的影响

4 小结

结论

参考文献

附图