糖肾康饮对糖尿病肾病足细胞NLRP3炎性复合物的作用研究

摘要

目的:
　　通过研究糖肾康饮含药血清对高糖诱导下体外培养肾小球足细胞凋亡及NLRP3炎性复合物的影响，初步探讨糖肾康饮治疗早期糖尿病肾病的作用机制，为指导临床提供理论依据。
　　方法:
　　1.采用MTT方法检测高糖及含药血清对足细胞凋亡的影响。
　　2.流式细胞仪分析足细胞凋亡率。
　　3.使用ELISA方法检测各组足细胞产生的IL-1β含量。
　　4.应用Western Blot检测足细胞上清液中的NLRP3、ASC及Caspase-1的蛋白表达。
　　结果:
　　1.高糖可以诱导足细胞凋亡增加，并且和时间有一定的相关性。
　　2.高浓度组糖肾康饮含药血清对高糖诱导下足细胞凋亡有显著影响。
　　3.流式细胞仪分析细胞周期发现，高糖环境诱导下足细胞凋亡率增加，糖肾康饮含药血清干预下可以显著抑制足细胞凋亡。
　　4.高糖组足细胞产生的IL-1β浓度显著高于正常对照组(P＜0.05);高糖加含药血清组IL-1β浓度显著低于高糖组(P＜0.05)。
　　5.高糖组NLRP3、ASC及Caspase-1的蛋白表达量显著高于正常对照组（P＜0.05）;高糖加含药血清组的其各组分蛋白表达显著低于高糖组（P＜0.05）。
　　结论:
　　1.高糖诱导可激活足细胞NLRP3炎性复合物。
　　2.糖肾康饮对高糖诱导的足细胞凋亡具有抑制作用。
　　3糖肾康饮可能是通过抑制NLRP3炎性复合物的表达而减少IL-1β释放，从而起到延缓DN进展的作用。

目录

缩略词表

摘要

前言

文献综述

1．糖尿病肾病的病理改变

1．1 糖尿病肾病系膜细胞病变特点

1．3 糖尿病肾病足细胞病变特点

2．炎症免疫反应与DN

2．1 与DN相关的炎性因子

2．2 NLRP3炎性复合物

2．3 针对NLRP3炎性复合物治疗糖尿病的相关研究

3．中医对糖尿病肾病的认识及进展

3．1 消渴病肾病的病因

3．2 消渴肾病的病机

3．3 现代医家对消渴肾病认识

4．1 方药分析

4．2 单味糖肾康饮药物组成的研究进展

实验部分

1．实验准备

1．1 实验细胞株

1．2 实验动物

1．3 试剂、药物及实验耗材

1．4 仪器与设备

1．5 试剂配制

1．6 细胞培养过程

2．实验条件筛选及分组

2．1 筛选最佳高糖浓度及实验时间

2．2 筛选糖肾康饮含药血清干预时间及浓度

2．3 实验分组

3．实验方法

3．1 MTT法检测足细胞活性

3．3 Western Blot检测各组NLRP3蛋白的表达

3．4 流式细胞术检测

4．统计方法

实验结果

1．MTT法检测高糖诱导下对足细胞凋亡的影响

2．不同浓度糖肾康饮含药血清对足细胞凋亡的影响

3．流式细胞仪检测高糖诱导下对足细胞凋亡率的影响

4．酶联免疫吸附法(ELISA)检测足细胞中IL-1β的含量

5．免疫印迹法(Western Blot)检测足细胞NLRP3炎性复合物的表达情况

讨论

1．立题依据

2．关于实验结果的分析

3．关于实验方法

4．关于含药血清

5．关于高糖诱导足细胞损伤

6．糖肾康饮方药分析

7．总结与展望

结论

参考文献

附录

致谢

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