复方半边莲和复方杏香兔耳风保肝活性研究

摘要

本论文由三章组成。第一章论述复方半边莲提取物体外抗氧化及其体内保肝活性研究。第二章论述复方杏香兔耳风及其拆方提取物体外抗氧化活性和体内保肝活性研究。第三章综述复方杏香兔耳风研究现状。
　　第一章复方半边莲体外抗氧化及其体内保肝活性研究
　　1.首次对复方半边莲清除二苯代苦味肼基自由基(DPPH)、2，2-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐自由基(ABTS)和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)进行研究。结果表明，乙醇提取物清除DPPH自由基能力大于水提取物;乙醇提取物清除ABTS自由基能力(IC50=29.26±0.49μg/mL)大于水提取物(IC50=42.09±2.44μg/mL)，但均低于阳性对照二丁基羟基甲苯(Butylated hydroxytoluene，BHT)(IC50=2.47±0.09μg/mL);乙醇提取物还原Fe3+的能力大于水提取物，但均低于阳性对照药物BHT。结果表明，复方半边莲水提取物和乙醇提取物均具有一定的体外抗氧化活性，且乙醇提取物活性强于水提取物。
　　2.通过检测给予复方半边莲提取物的小鼠血清中GOT和GPT活力，肝脏匀浆液中SOD活力和MDA含量，考察其对急性肝损伤小鼠的保护作用。体内实验结果显示:水提取物和乙醇提取物均能极显著降低急性肝损伤小鼠血清中的GPT和GOT活力及小鼠肝组织中的MDA含量升高，也能极显著升高SOD的活力。可见，复方半边莲水提取物和乙醇提取物对CCl4所致急性肝损伤小鼠具有一定的的保护作用，其保肝机制与其提高肝细胞抗氧化能力有关，且未见相关文献报道，有望用于开发防治肝脏疾病的药物。
　　第二章复方杏香兔耳风及其拆方体外抗氧化活性和体内保肝活性研究
　　本章分为2节，2.1介绍复方杏香兔耳风提取物体外抗氧化活性和体内保肝作用。结果发现，乙醇提取物清除DPPH自由基的能力强于水提醇沉物但均低于阳性对照药物BHT、没食子酸丙酯(PG)和丁基羟基茴香醚(BHA);乙醇提取物清除ABTS自由基能力(IC50=17.12±0.52μg/mL)大于水提醇沉物(IC50=42.01±4.74 mg/mL)，但二者均低于 BHT(IC50=4.39±0.17μg/mL)、PG(IC50=0.98±0.04μg/mL)和BHA(IC50=2.86±0.06μg/mL)，乙醇提取物还原Fe3+的能力(FRAP=1086.67±125.06μmol/g)大于水提醇沉物的还原能力(FRAP=616.67±95.77μmol/g)。体内保肝实验结果表明:复方杏香兔耳风乙醇提取物和水提醇沉物各剂量组均能显著降低GOT和GPT活力;复方杏香兔耳风乙醇提取物和水提醇沉物均能降低MDA含量和显著升高SOD活力。结果表明，复方杏香兔耳风乙醇提取物和水提醇沉物均有清除DPPH、ABTS自由和Fe3+还原的能力的作用。此外，均能降低CCl4诱导急性肝损伤小鼠血清中GOT、GPT活力及小鼠肝脏匀浆液中MDA含量，升高SOD的活力。由此说明，复方杏香兔耳风具有一定程度的体外抗氧化活性和体内保肝作用，且体内保肝活性与其抗氧化活性有一定相关性。
　　2.2研究了复方杏香兔耳风拆方提取物体外抗氧化和保肝活性。在质量浓度范围内，杏香兔耳风乙醇提取物清除DPPH自由基的能力强于杏香兔耳风水提醇沉物，然而白术乙醇提取物和白术水提醇沉物仅有微弱的清除DPPH自由基的能力。在清除ABTS自由基的能力方面，杏香兔耳风提取物均强于白术提取物，且杏香兔耳风乙醇提取物IC50值为12.20±0.54μg/mL，杏香兔耳风水提醇沉物IC50值为16.88±0.00μg/mL;质量浓度为108.10μg/mL时，白术乙醇提取物和白术水提醇沉物清除率分别为30.14％和14.58％。在还原Fe3+的能力方面，杏香兔耳风2种提取物均强于白术2种提取物，且杏香兔耳风乙醇提取物、杏香兔耳风水提醇沉物、白术乙醇提取物和白术水提醇沉物FRAP值分别为1371.67±104.74μmol/g、918.33±61.86μmol/g、124.38±16.69μmol/g和59.17±7.29μmol/g，且均低于阳性对照BHT、PG和BHA。结果表明，杏香兔耳风有一定清除DPPH自由基能力，有很好的清除ABTS自由基能力和还原Fe3+的能力，而白术提取物仅有微弱清除DPPH和ABTS自由基且及还原Fe3+的能力。因此，杏香兔耳风可能为该方剂的主要抗氧化药材。进一步研究杏香兔耳风活性发现，杏香兔耳风甲醇提取物清除DPPH自由基的能力强于乙酸乙酯提取物，但均低于阳性对照。杏香兔耳风甲醇提取物(IC50=13.83±1.24μg/mL)清除ABTS自由基的能力略强于乙酸乙酯提取物(IC50=14.25±1.75 mg/mL)，且均弱于阳性对照。杏香兔耳风甲醇提取物还原Fe3+的能力(FRAP=680.52±67.04μmol/g)强于乙酸乙酯提取物(FRAP=328.85±66.38μmol/g)，但均低于阳性对照。对苯二酚有较强清除ABTS自由基(IC50=1.04±0.00μg/mL)和还原Fe3+的能力(FRAP=11035.25±1030.21μmol/g)，且清除ABTS自由基能力强于阳性对照BHT(IC50=4.39±0.17μg/mL)、和BHA(IC50=2.86±0.06μg/mL)。表明杏香兔耳风可能为复方杏香兔耳风主要抗氧化药材，且对苯二酚有较强的抗氧化活性，甲醇提取物和乙酸乙酯提取物有一定的抗氧化活性。急性肝损伤实验结果显示，杏香兔耳风甲醇提取物和乙酸乙酯提取物均能非常显著降低急性肝损伤小鼠血清中的GPT（甲醇提取物高剂量组除外）和GOT活力及小鼠肝组织中的MDA含量（甲醇提取物低剂量组除外），均能显著升高SOD的活力。对苯二酚高、中、低剂量组均能显著降低GOT;中、低剂量组能显著降低GPT活力;高、低剂量组均能显著降低MDA含量;高剂量组能显著升高SOD活力，表明杏香兔耳风和对苯二酚对急性肝损伤均有一定保护作用，保肝机制与其提高肝细胞抗氧化能力有关。
　　第三章复方杏香兔耳风研究进展
　　本章从药效成分、药理作用、临床应用、含量测定、质量控制等诸多方面综述复方杏香兔耳风研究进展。

目录

声明

摘要

绪论

第一章 复方半边莲提取物体外抗氧化及体内保肝活性研究

1．1 材料、试剂和仪器

1．1．1 材料

1．1．2 主要试剂、试药

1．1．3 主要仪器

1．2 实验方法

1．2．1 三种微量法测定抗氧化活性

1．2．2 四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤及体内指标测定

1．2．3 统计学处理

1．3 实验结果

1．3．1 DPPH法

1．3．2 ABTS法

1．3．3 FRAP方法

1．3．4 复方半边莲提取物对急性肝损伤小鼠血清中GOT和GPT影响

1．3．5 复方半边莲提取物对急性肝损伤小鼠MDA和SOD的影响

1．4 讨论

1．4．1 体外抗氧化活性

1．4．2 体内保肝作用

1．5 结论

参考文献

第二章 复方杏香兔耳风及其拆方抗氧化及保肝活性研究

2．1 复方杏香兔耳风抗氧化活性和保肝作用研究

2．1．1 材料与仪器

2．1．2 实验方法

2．1．3 结果

2．1．4 讨论

2．1．5 结论

2．2 复方杏香兔耳风拆方体外抗氧化与保肝活性研究

2．2．1 材料、试剂和仪器

2．2．2 实验方法

2．2．3 实验结果

2．2．4 讨论

2．2．5 结论

参考文献

第三章 复方杏香兔耳风研究进展

3．1 复方杏香兔耳风药理作用

3．1．1 杏香兔耳风的药效成分

3．1．2 白术的药效成分

3．1．3 复方杏香兔耳风抗菌作用

3．2 临床应用

3．2．1 阴道炎

3．2．2 子宫内膜炎

3．2．3 盆腔炎

3．2．4 宫颈炎、宫颈糜烂

3．3 复方杏香兔耳风质量控制

小结

参考文献

结论

论文创新点

硕士期间发表论文

致谢