声明
第1章 绪 论
1.1 课题背景及研究的目的和意义
1.1.1 结直肠癌
1.1.2 CREPT
1.1.3 HuR
1.1.4 目的和意义
1.2 国内外研究现状
1.2.1 结直肠癌国内外研究现状
1.2.2 CREPT的研究进展
1.2.3 microRNA的研究进展
1.2.4 HuR的研究进展
1.3 本文的主要研究内容
第2章 HuR在结直肠癌中对CREPT的调控作用
2.1 前言
2.2 实验材料
2.2.1 菌种和细胞株
2.2.2 试剂和抗体
2.2.3 实验试剂配制
2.2.4 主要仪器与设备
2.3 实验方法
2.3.1 感受态细胞的制备及转化
2.3.2 质粒提取
2.3.3 细胞培养
2.3.4 细胞转染
2.3.5 基因表达的检测
2.3.6 统计学分析
2.4 实验结果及讨论
2.4.1 CREPT在正常结直肠上皮细胞株和不同结直肠癌细胞株的表达情况分析
2.4.2 对结直肠癌细胞株HuR蛋白表达敲降si-HuR的选择
2.4.3 HuR对结直肠癌细胞中CREPT蛋白表达的调控作用
2.4.4 HuR对结直肠癌细胞中CREPT mRNA表达的调控作用
2.4.5 HuR对CREPT mRNA稳定性的影响
2.4.6 HuR与CREPTmRNA互作研究
2.4.7 确定HuR和CREPT mRNA可能结合位点的确定
2.5 本章小结
第3章 HuR对结直肠癌细胞株生长作用的影响
3.1 前言
3.2 实验试剂和材料
3.3 实验仪器与设备
3.4 实验方法
3.4.1 CCK-8法
3.4.2 划痕实验
3.4.3 克隆形成实验
3.4.4 Annenxin V-FITC细胞凋亡
3.4.5 细胞周期检测
3.4.6 统计学分析
3.5 实验结果及讨论
3.5.1 HuR对结直肠癌细胞HCT116β/ω生长增殖的影响
3.5.2 HuR对结直肠癌细胞株HCT116β/ω克隆形成的影响
3.5.3 HuR对结直肠癌细胞株HCT116β/ω迁移的影响
3.5.4 HuR对结直肠癌细胞株HCT116β/ω细胞凋亡的影响
3.5.5 HuR对结直肠癌细胞株HCT116β/ω细胞周期的影响
3.6 本章小结
第4章 HuR与miR-383对CREPT表达共调控作用及细胞功能研究
4.1 引言
4.2 实验试剂和材料、仪器和方法
4.3 实验结果及讨论
4.3.1 HuR与miR-383对结直肠癌细胞中CREPT蛋白表达的调控作用
4.3.2 HuR与miR-383对结直肠癌细胞中CREPT mRNA表达的调控作用
4.3.3 HuR、miR-383和CREPT mRNA互作研究
4.3.4 HuR与miR-383对结直肠癌细胞株HCT116β/ω生长增殖的影响
4.3.5 HuR与miR-383对结直肠癌细胞株HCT116β/ω克隆形成的影响
4.3.6 HuR与miR-383对结直肠癌细胞株HCT116β/ω迁移的影响
4.3.7 HuR与miR-383对结直肠癌细胞株HCT116β/ω细胞凋亡的影响
4.3.8 HuR与miR-383对结直肠癌细胞株HCT116β/ω细胞周期的影响
4.4 本章小结
结论
参考文献
攻读硕士学位期间承担的科研任务与主要成果
致谢
