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组织化学染色方法在生长板组织学研究中的应用

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综述 生长板组织学

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目的:生长板是位于长骨远端骺与干骺端之间的一层高度器官化的透明软骨。在组织学上根据软骨细胞的不同的分化阶段,可以将生长板分为不同的水平区带,即:静止软骨细胞带、增殖软骨细胞带和肥大软骨细胞带。本研究通过对正常大鼠胫骨标本进行石蜡包埋、切片后分别应用常规HE染色法、Masson三色法、AB-PAS染色法、甲苯胺蓝染色法、藏花红染色法、AZAN染色法、VG染色法、Mallory三色法、番红染色法、固绿染色法、番红.固绿染色法进行染色,比较上述多种组织学染色方法在正常大鼠胫骨生长板组织切片中的染色规律,探讨不同组织化学染色方法在生长板组织形态学研究中的应用。 方法:对正常生长发育期大鼠胫骨标本固定、脱钙后进行石蜡包埋和切片。切片脱蜡至水后分别进行了(1)常规染色:入苏木精染液5分钟;自来水洗1分钟;入1%盐酸酒精分色数秒;自来水洗1分钟;入1%的伊红3分钟;自来水洗1分钟;梯度酒精脱水;二甲苯透明;中性树胶封片。(2)Masson三色法(苯胺蓝复染)染色:入A液5分钟;0.2%醋酸稍洗;入5%磷钨酸5-10分钟;0.2%醋酸洗2次;入B液5分钟;0.2%醋酸洗2次;梯度酒精脱水;二甲苯透明;中性树胶封片。Masson三色法(亮绿复染)染色:入A液5分钟;0.2%醋酸稍洗;入5%磷钨酸5-10分钟;0.2%醋酸洗2次;入B液5分钟;0.2%醋酸洗2次;梯度酒精脱水;二甲苯透明:中性树胶封片。(3)AB(阿尔辛蓝)-PAS(过碘酸-Schiff)染色:蒸馏水浸洗1分钟;入3%醋酸液中3分钟;入阿尔新兰液中30分钟;入3%醋酸液3分钟;蒸馏水冲洗多次;入过碘酸氧化10分钟;自来水冲洗;蒸馏水浸洗2次;在Schi蹴剂中染色10-20分钟(据室温);流水冲洗2-5分钟,蒸馏水洗片刻;用Harris苏木精液淡染核;0.5%盐酸乙醇分化数秒钟;蒸馏水洗多次;95%及无水乙醇脱水;二甲苯透明;中性树胶封固。(4)甲苯胺蓝染色:入甲苯胺蓝溶液30分钟;水洗1分钟;入冰醋酸溶液中于显微镜下分色数秒;蒸馏水洗2次,各2分钟;自然风干;二甲苯透明;中性树胶封片。(5)藏花红染色:入0.1%的藏花红溶液染色2-3分钟;镜下分化数秒;梯度酒精脱水;二甲苯透明;中性树胶封片。(6)

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