Tc标记的一种兔抗植物蛋白抗体（Tc-ZPPAb）在荷H肝癌小鼠体内分布和显像研究

摘要

目的：应用放射性核素99Tc 标记郑氏植物蛋白抗体(99Tc-ZPPAb)，研究99Tc-ZppAb在荷瘤小鼠体内的生物学分布，并利用放射免疫显像原理进行荷瘤鼠显像，探讨郑氏植物蛋白抗体作为一种新型肿瘤阳性显像剂的可行性。 方法：1.显像剂的标记方法及标记率测定：郑氏植物蛋白抗体(ZPPAb)的标记采用预亚锡化法。对照组正常兔IgG的标记方法及处理方法同ZPPAb。99Tc-ZPPAb标记率的测定在乙醇：水：氨=2:5:1-新华一号纸体系中各组份的Rf值为：99Tc-ZppAb 0.6-0.9，99Tc-胶体0，99Tc O40.6-0.9；在生理盐水-新华一号纸体系中各组份的Rf值为：99Tc-ZPPAb 0，99Tc-胶体0，99TcO4 1.0。 2.荷H22肝癌小鼠体内分布实验：选取84只荷H22肝癌小鼠，随机分为4组，每组21只，实验组与对照组荷瘤鼠分别经尾静脉注射0.2ml(7.4MBq)的99Tc-ZppAb和99Tc 标记的正常兔IgG(99Tc-IgG)，改进的实验组与对照组荷瘤鼠分别在注射上述两种显像剂前30min注射人血清白蛋白。各组分别于注射显像剂后0.5h、1h、2h、3h、4h、5h、6h不同时相，从小鼠眼眶取血，处死动物，取心、肝、脾、肺、肾、胃、小肠、骨骼、肿瘤组织及对侧后肢肌肉，称重并测定放射性计数，计算各个脏器每克组织的放射性摄取比率(％ID/g值)及肿瘤与各组织器官的放射性计数比值(T/NT值)。 3.荷H22肝癌小鼠显像实验：选取12只荷瘤小鼠随机分为4组，每组3只，分别为实验组、对照组、改进实验组及改进对照组。实验组与对照组分别经尾静脉注射0.2ml(7.4MBq)的99Tc-ZppAb和99Tc-IgG，改进的实验组与对照组分别在注射上述两种显像剂前30min注射人血清白蛋白。各组分别于注射显像剂后0.5h、1h、2h、3h、4h、5h、6h不同时相进行显像，在采集的荷瘤鼠显像图上利用感兴趣区(ROI)技术，以相同大小的感兴趣区域内计算肿瘤部位(T)和对侧肢体肌肉相应部位(NT)的放射性计数比值(T/NT值)。 结果：1.99Tc-ZPPAb的标记率：99Tc-ZPPAb的标记率约为70％，经葡聚糖凝胶G15柱分离纯化后该标记物的放化纯度大于80％。 2.荷H22肝癌小鼠体内分布实验结果：实验组荷瘤鼠中，肾脏的放射性摄取值最高，其次为肿瘤组织。肿瘤组织的％ID/g值于注入显像剂后5h时达到最大值为0.93％ID/g。肾脏的％ID/g值很高，于注入显像剂5h后达最大值为23.03％ID/g。肝脏的放射性％ID/g值与肿瘤组织相近。胃肠道的放射性摄取值很低。改进实验组的结果与实验组结果大致一致，只是肿瘤组织的％ID/g值较实验组低，于注入显像剂1h后达最大值为0.438％ID/g。四组之间的同时相肿瘤组织的％ID/g值之间进行单因素方差分析和F检验，结果显示差异有统计学意义(F=13.49，P＜0.01)，采用q检验进行两两比较，结果显示实验组分别与对照组、改进实验组、改进对照组同时相肿瘤组织的％ID/g值之间比较差异有统计学意义(P＜0.01)。 实验组荷瘤鼠肿瘤组织与肾脏的T/NT值一直较低，肿瘤组织与肌肉的比值随时间的延长逐渐升高，于注入显像剂6h后达最大值为8.89。改进实验组肿瘤与肌肉的T/NT值在(2.8～5.24)之间，于注入显像剂3h后达最大值为5.24。四组之间的同时相肿瘤组织与肌肉的比值T/NT值之间进行单因素方差分析和F检验，结果显示差异有统计学意义(F=23.69，P＜0.01)，采用q检验进行两两比较，结果显示实验组分别与其它三组的肿瘤组织与肌肉的比值T/NT值之间比较差异有统计学意义(P＜0.01)；改进实验组分别与对照组、改进对照组的肿瘤组织与肌肉的比值T/NT值之间比较差异有统计学意义(P＜0.01)。 3.荷瘤鼠显像结果：实验组与改进实验组荷瘤鼠在注入显像剂0.5h后肿瘤部位即显影，图像清晰，实验组荷瘤鼠于注入显像剂后3h时肿瘤部位放射性核素浓聚较强，随后肿瘤部位放射性浓聚逐渐减淡。对照组与改进对照组荷瘤鼠显像图上腹部及膀胱部位可见放射性核素浓聚影像，而左后肢肿瘤部位未见明显放射性核素浓聚影像。利用感兴趣区(ROI)技术，在荷瘤鼠显像图上计算肿瘤部位(T)和对侧肢体相应部位(NT)的放射性计数比值T/NT值，实验组荷瘤鼠的T/NT值于注入显像剂后3h时达最大值为6.04，至最后其T/NT值有所下降。改进实验组荷瘤鼠的T/NT值较实验组荷瘤鼠的T/NT值低，于注入显像剂后4h时达最大值为5.75。 结论：本实验研究结果显示，肿瘤组织与99Tc-ZppAb存在特异性摄取现象，且在肿瘤组织中可以滞留一段时间，便于显像。99Tc-ZPPAb标记简单，使用方便，对显像仪器设备要求不高，有望成为一种潜在的新型肿瘤阳性显像剂。

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结论

参考文献

综述 郑氏植物蛋白及其抗体的肿瘤学研究进展

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