乳腺浸润性导管癌组织中P-gp、GST-π、ToPoⅡa、TS的表达及意义

摘要

目的：乳腺癌的常用治疗手段包括手术、放疗、化疗、内分泌治疗等。其中化疗能够降低乳腺癌患者术后局部复发及远处转移率，仍是目前治疗乳腺癌主要的辅助手段。但由于肿瘤对药物的原发性耐药，乳腺癌患者对化疗的敏感性差别很大。肿瘤细胞的多药耐药(multidrug resistance，MDR)是直接影响化疗效果的主要原因。MDR是指由一种药物诱导肿瘤细胞产生耐药后，肿瘤细胞不仅对引起耐药的原药耐药，同时对其他多种结构和作用机制完全不同的药物产生交叉耐药的现象。肿瘤细胞MDR的产生与多种机制有关。 本实验通过常规形态观察和免疫组织化学染色等方法，检测56例乳腺浸润性导管癌组织中多药耐药基因表达产物P糖蛋白(P-gp)以及谷胱甘肽S转移酶(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱ(ToPo Ⅱa)、胸苷酸合成酶(TS)的表达情况，同时结合c-erbB-2的表达，探讨它们在乳腺癌组织中的表达情况及其与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移等临床病理参数的关系。 方法：采用河北医科大学第二医院病理科2004-2007年间存档的乳腺浸润性导管癌标本56例，同时选取乳腺腺病及乳腺纤维腺瘤各10例良性病变作为对照，将所有蜡块连续切片(4μm)十一张，进行常规HE染色和免疫组织化学染色。利用特异性抗体检测不同基因蛋白P-gp、GST-π、ToPo Ⅱa、TS、c-erbB-2的表达情况。免疫组织化学染色采用SP法，DAB显色。本研究中采用的免疫组化显色系统为DAB显色系统，阳性结果为在相应的部位显示棕黄色颗粒。P-gp阳性颗粒分布于胞膜、胞浆；GST-π阳性颗粒分布于胞浆；TS阳性颗粒位于胞浆；ToPoⅡα阳性颗粒分布于胞核；c-erbB-2颗粒分布于胞膜，以细胞膜呈清晰的棕黄色为阳性，仅胞浆内和胞核内着色不作阳性判断依据。 随机计数10个高倍视野的癌细胞，P-gp、GST-π、TS、c-erbB-2以阳性细胞数<10％为阴性，10～25％为(+)，25～75％(++)；ToPo Ⅱα要求记数细胞数目为500或1000个，计算阳性细胞的百分率，据此分为四级：Ⅰ级阴性，阳性细胞<25％；Ⅱ级(++)阳性细胞25％-49％；Ⅲ级(+++)阳性细胞50％～74％；Ⅳ级(++++)阳性细胞≥75％。 判断标准以P-gp、GST-π、TS、c-erbB-2≥两个加号具有诊断价值：ToPo Ⅱα≤一个加号具有诊断价值。 数据统计分析采用SPSS10.0统计软件包。 结果：在乳腺癌组织和对照的良性乳腺病变组织内，P-gp、GST-π、ToPo Ⅱα、TS、c-erbB-2均有不同程度的表达。 1.P-gp的表达：乳腺癌组织内P-gp的阳性表达率为46％(26/56)，对照组阳性率为7/20(35％)，其表达率在二组间无显著差异(P>0.05)。P-gp表达与乳腺浸润性导管癌患者性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、TNM分期无明显关系(P>0.05)。 2.GST-π的表达：56例乳腺浸润性导管癌中GST-π阳性率为62％(35/56)，对照组为3/20(15％)。表达率在二组间有显著差异(P<0.01)。统计分析表明GST-π的表达与患者的年龄、肿瘤大小、临床分期无统计学意义，仅与淋巴结转移有统计学意义。有淋巴结转移者GST-π阳性率71％(27/38)高于无淋巴结转移者44％(8/18)，二组相比有统计学意义(P<0.05)。 3 TS的表达：对照组TS阳性率为1/20(5％)。在56例乳腺浸润性导管癌组织内的阳性表达率为43％(24/56)，其表达率在二组间组有显著差异(P<0.01)。TS的表达与患者的年龄、肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移均无统计学意义(P>0.05)。 4 ToPoⅡα的表达：56例乳腺浸润性导管癌组织内的阳性率为64％(36/56)，在对照组中阳性率为15/20(75％)，其表达率在二组间无显著差异(P>0.05)。本研究统计分析结果表明ToPo Ⅱα的表达与患者的年龄、肿瘤大小无关，但与淋巴结转移、临床分期有关。有淋巴结转移者ToPo Ⅱα阳性率55％(21/38)低于无淋巴结转移者83％(15/18)，二组相比有统计学意义(P<0.05)。ToPo Ⅱα阳性率与临床分期有关，临床分期越高其表达率越低，临床分期Ⅰ、Ⅱ之间表达无差别，临床分期Ⅰ+Ⅱ与Ⅲ表达率有差别(P<0.05)。 5 c-erbB-2的表达：可见棕黄色颗粒分布于胞膜上。c-erbB-2主要表达在良性病变的乳腺导管和腺上皮细胞以及乳腺癌内的癌细胞胞膜。c-erbB-2在乳腺癌中阳性率为43％(24/56)，在对照组中阳性率为2/20(10％)，其表达率在二组间有显著差异(P<0.01)。经统计分析c-erbB-2阳性率与与患者的年龄、肿瘤大小无关，但是与淋巴结转移、临床分期均有统计学意义。 6.Pg-p、GST-π、TS、ToPoⅡα、c-erbB-2相关性分析56例乳腺癌组织P-gp、GST-π、TS、ToPoⅡα、c-erbB-2阳性表达率分别为：46％，62％，43％，64％，43％；20例对照中分别为：35％、15％、5％、75％、10％。P-go、ToPoⅡα的表达率在二组间差异无统计意义(P>0.05)，GST-π、TS、c-erbB-2表达差别有统计学意义(P<0.01)。 乳腺癌组织中P-gp和GST-π、TS、ToPoⅡα、c-erbB-2的表达有相关性(X2为8.106，P<0.05)。 结论：检测乳腺浸润性导管癌组织内P-gp和GST-π、TS、ToPoⅡα的表达对肿瘤化疗药物的选择具有重要临床意义；耐药蛋白的表达与淋巴结转移、临床分期等相关。 1.P-gp、ToPoⅡα在乳腺癌中的表达率与良性病变对照组无差别而GST、TS、c-erbB-2在乳腺癌的表达率明显高于良性病变组。 2.P-gp、TS在乳腺癌中的表达与临床各病理参数均无关系；GST-π、ToPoⅡα、c-erbB-2在乳腺癌组织中的表达与淋巴结转移有关，其中ToPoⅡα、c-erbB-2在乳腺癌组织中的表达还与临床分期有关。 3.在乳腺癌组织中ToPoⅡα随临床分期增高其表达率呈下降趋势，而c-erbB-2随临床分期增高表达率也升高。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 多药耐药的研究进展

致谢

个人简历