fascin蛋白和E-钙粘蛋白在口腔扁平苔藓中的表达及意义

摘要

目的:口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是口腔粘膜一种常见的非感染性慢性炎症,目前被认为是细胞介导的自身免疫性疾病,于1869年被首次报道,人群发病率国内文献报道约为0.5％-1％,国外文献报道约为0.5％-2.0％。1910年Hallopean首次报道OLP癌变,其后国内外研究相继表明OLP具有癌变倾向,其癌前性质引起广泛关注。1996年WHO正式将OLP确定为癌前状态。研究表明,OLP癌变是多种因素共同作用的结果,在局部免疫制剂、病毒感染、致癌剂和细胞因子等因素的共同作用下,组织发生癌基因活化、染色体突变和抑癌基因的异常,最终导致发生癌变。
　　 Fascin蛋白是一种细胞骨架蛋白,与F-肌动蛋白结合后使肌动蛋白形成有序的束状结构,加强肌动蛋白细胞骨架,抵抗细胞迁移时由细胞突起的运动引起的细胞膜延伸,对细胞移动起着重要作用。Fascin蛋白的异常表达可引起肿瘤细胞运动性显著增强和细胞粘附能力的改变,使肿瘤细胞具有更强的侵袭性,进入淋巴间隙,淋巴管和血管,增加转移几率。研究发现fascin蛋白在多种肿瘤组织和癌前病变组织中呈现阳性表达,其阳性表达的肿瘤组织学分级或者侵袭性往往较高。进一步的研究发现fascin蛋白在口腔白斑和口腔鳞状细胞癌中呈现过高表达。
　　 E-钙粘蛋白(E-cadhemin,E-cad)是介导上皮细胞间粘连的一种钙依赖性的细胞粘附分子,编码基因定位于16q21,是一种重要的细胞粘附分子,参与组织形态发生、胚胎发育过程。在生理条件下调节细胞与细胞之间、细胞与基质之间的粘附反应,维持组织结构形态和完整性。研究发现E-钙粘蛋白是一种重要的抑癌分子,在肿瘤的发生、发展过程中发挥着重要的作用,主要通过加强细胞间的粘附和抑制细胞增殖来发挥抑癌功能。E-cad在多种肿瘤中呈现不表达或表达下降,与肿瘤的分化程度、侵袭能力、淋巴结转移、远处转移的发生和复发率密切相关,在预示肿瘤进展及患者预后方面发挥着重要的作用。
　　 本研究通过免疫组化的实验方法检测fascin蛋白和E-钙粘蛋白在口腔扁平苔癣中的表达,进一步探讨口腔扁平苔癣癌变的发病机制,为扁平苔藓癌变的早期诊断和治疗提供依据。
　　 方法:本研究使用52例口腔扁平苔藓标本蜡块和41例口腔正常粘膜标本蜡块,口腔扁平苔藓标本均经病理检查证实。运用SP免疫组织化学法,以fascin单克隆抗体和E-钙粘蛋白单克隆抗体作为一抗,对切片标本进行免疫组化染色。以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照,用已知的fascin蛋白阳性的口腔鳞癌标本和已知的E-钙粘蛋白阳性的口腔扁平苔癣标本作为阳性对照。观察阳性染色的分布及强度,对表达情况进行研究分析。
　　 Fascin蛋白以细胞膜和细胞浆显示弥漫性棕黄色颗粒为阳性染色,每张切片随机计数10个高倍视野的1000个细胞中阳性细胞所占百分比。将表达情况分为4级:(1)未见棕黄色颗粒为阴性;(2)阳性细胞数＜25％为弱阳性(+);(3)阳性细胞数25％-75％为阳性(++);(4)阳性细胞数＞75％为强阳性(+++)。
　　 E-钙粘蛋白以细胞膜上出现棕黄色膜性染色作为正常表达的阳性标记。而位于细胞浆中或胞膜与胞浆共同有连续线状或斑点状黄色至棕黄色颗粒沉积者为异常阳性表达,无染色者为阴性表达。每张切片随机计数10个高倍视野的1000个细胞中阳性细胞所占百分比。将表达情况分为4级:(1)阴性:无染色,阳性细胞数＜25％;(2)弱阳性:胞浆染色浅,阳性细胞数26％-50％;(3)中度阳性:胞膜胞浆混合染色,阳性细胞数51％-75％;(4)强阳性:胞膜连线状均匀染色,阳性细胞数＞75％。
　　 采用SPSS17.0软件进行统计学分析,单因素研究实验结果采用x2检验,P＜0.05有统计学意义。Fascin及E-cadherin表达的相关性采用相关分析法,P＜0.05有统计学意义。
　　 结果:1、Fascin蛋白的表达:在41例正常口腔粘膜标本中均呈阴性表达,在52例口腔扁平苔藓标本中5例呈现弱阳性表达,其余均呈现阴性表达,阳性率为9.62％,阳性率高于正常口腔粘膜。经统计学分析x2值为4.166,P＜0.05,有统计学意义。
　　 2、E-钙粘蛋白的表达:在41例正常口腔粘膜标本中39例呈强阳性表达,2例呈中度阳性,异常阳性率为4.88％,在52例口腔扁平苔藓标本中25例呈强阳性表达,27例呈现异常阳性表达,异常阳性率为51.92％,经统计学分析x2值为23.64,P＜0.05,有统计学意义。
　　 3、经相关性分析,fascin蛋白和E-钙粘蛋白在口腔扁平苔藓中的表达无相关性。(r=0.078 P＞0.05)
　　 结论:1、在口腔扁平苔藓标本中fascin蛋白阳性表率高于正常粘膜,经x2检验具有统计学意义,提示口腔扁平苔藓潜在恶变的可能。
　　 2、在口腔扁平苔藓标本中E-钙粘蛋白的膜性表达率明显低于正常口腔粘膜,膜性表达的丧失提示口腔扁平苔藓潜在恶变的可能。
　　 3、Fascin蛋白和E-钙粘蛋白在口腔扁平苔藓中的表达无相关性。(r=0.078 P＞0.05)

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结果

附表

附图

讨论

结论

参考文献

综述 Fascin蛋白在肿瘤中的表达及意义

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