血管内皮生长因子基因多态性与上皮性卵巢癌发病风险的关联研究

摘要

目的:卵巢恶性肿瘤是女性生殖器三大恶性肿瘤之一,由于其发病隐匿,缺乏特异性早期发病指征,往往在确诊时就已发生转移,因此卵巢癌患者的5年生存率仅30％左右,其死亡率居妇科恶性肿瘤首位。虽然迄今卵巢癌的病因和发病机制尚不明确,但已有研究表明,血管生成在包括卵巢癌在内的人类实体肿瘤的发生、发展和浸润、转移中起重要作用。在已知的血管生成因子中,血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)是一种特异的、强烈的血管内皮细胞促分裂因子和血管生成因子,它与肿瘤的生长、浸润及转移密切相关。人类的VEGF基因启动子区存在一些多态性位点,这些多态性位点可能通过改变基因的转录活性而影响蛋白的表达,导致了人类对癌症易感性的个体差异。本研究旨在探讨VEGF基因启动子区-1154G/A、-460C/T单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism,SNP)与上皮性卵巢癌发病风险的关系,从分子生物学水平为卵巢癌的预防及诊治提供依据。
　　 方法:本研究采用病例-对照研究方法,收集303例上皮性卵巢癌患者和303例健康对照个体的静脉抗凝血各5ml,同时记录其病史和个人及家族相关资料。采用蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析方法检测VEGF基因启动子区-1154G/A、-460C/T基因多态位点的基因型频率分布。
　　 数据统计分析采用SPSS11.5版软件包(SPSS Company,Chicago,Illinois,USA)进行。病例组与对照组的年龄差异行t检验。比较各位点基因型频率的观察值与预期值并进行卡方检验行Hardy-Weinberg平衡分析。两组间的基因型分布比较采用行×列表x2检验。以非条件Logistic回归法计算表示相对风险度的比值比(odds ratio,OR)及95％可信区间(confidenceinterval,CI)。采用EH软件和2LD软件分别分析VEGF基因启动子区-460C/T,-1154 G/A2个多态性位点的单倍型频率和等位基因连锁不平衡状态。P＜0.05作为差异有显著性的标准。
　　 结果:
　　 1.健康对照组中VEGF基因启动子区-1154G/A、-460C/T两个多态位点基因型频率分布均符合Hardy-weinberg平衡(P＞0.05)。
　　 2.在卵巢癌组和对照组中,VEGF基因启动子区-1154G/A多态的三种基因型频率(A/A、G/A、G/G)分别是1.7％、17.8％、80.5％和2.3％、26.1％、71.6％,两组比较差异有统计学意义(P=0.037);在卵巢癌组和对照组中,等位基因频率分布(G、A)分别是89.4％、10.6％和84.7％、15.3％,两组比较差异有统计学意义(P=0.013);与G/A+A/A基因型相比,携带G/G基因型可能明显增加上皮性卵巢癌的发病风险(OR=1.64,95％CI=1.12～2.39)。
　　 3.VEGF基因启动子区-460C/T多态C、T等位基因频率在卵巢癌组和对照组分别为19.3％、21.3％和80.7％、78.7％,两组相比差异无统计学意义(P＞0.05);C/C、C/T、T/T基因型频率在卵巢癌组和对照组分别为4.0％、30.7％、65.3％和5.6％、31.4％、63％,两组相比差异无统计学意义(P＞0.05);与C/T+T/T基因型相比,T/T基因型可能与卵巢癌的发病风险无关,OR值为1.11(95％CI=0.79～1.54)。
　　 4.VEGF基因启动子区-1154G/A和-460C/T SNPs位点间不存在连锁不平衡(D'=0.426)。
　　 结论:
　　 1.VEGF基因启动子区-1154G/A多态可能与上皮性卵巢癌的发病风险明显相关,即携带G/G基因型可能显著增加上皮性卵巢癌的发病风险。
　　 2.VEGF基因启动子区-460C/T单核苷酸多态可能与上皮性卵巢癌的发病风险无关。
　　 3.VEGF基因启动子区-1154G/A和-460C/TSNPs位点间不存在连锁不平衡。

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