选择性头部亚低温治疗新生儿缺氧缺血性脑病超氧化物歧化酶与丙二醛的变化

摘要

目的:新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic ischaemic encephalopathy,HIE)是围产期严重的并发症,中、重度HIE常遗留有神经系统后遗症。目前缺乏有效的治疗方法。其发病机制复杂,目前尚未完全阐明,病理过程包括原发性损伤和再灌注损伤。氧化应激是脑缺血/再灌注损伤中的的主要因素。自由基连锁反应则是脑组织缺氧缺血再灌注损伤的核心病理环节。超氧化物歧化酶(superoxide dismutase SOD)是体内清除氧自由基最主要的酶,能够有效地清除并终止氧自由基引发的连锁反应,其活力的高低间接反映了机体清除氧自由基的能力。丙二醛(Malondialdehyde MDA)是脂质过氧化的最终产物,其在血清中的水平反映机体细胞氧化损伤的程度。因此对HIE患儿中血清超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平的测定是早期辅助诊断HIE及判断病情严重程度及治疗效果评价的重要指标。
　　 亚低温(mild hypothermia)治疗是指采用人工诱导方法将体温下降2-6℃,以达到治疗目的。近年来大量研究表明,亚低温对新生动物缺氧缺血性脑损伤(hypoxic ischaemic brain damage,HIBD)具有明显的神经保护作用,是目前最有前途的治疗方法之一。其机制主要有以下方面:降低脑细胞耗能和无氧代谢,减少兴奋性神经递质过量释放及其受体的激活,阻断细胞内钙离子积聚,抑制氧自由基和一氧化氮大量生成,减轻脑水肿,抑制少突胶质细胞活化,抗神经细胞凋亡等。本文通过测定亚低温治疗前后这两项指标浓度地动态变化,进一步了解亚低温对HIE氧化应激损伤的影响以及神经保护机制。为其在临床治疗缺氧缺血性脑病提供理论依据。
　　 方法:
　　 一、研究对象及分组
　　 1.研究对象:2010年1月至12月入住河北省儿童医院新生儿科重症监护病房,出生在6小时以内的新生儿,胎龄≥37周,体重≥2500g,诊断标准及分度符合2004年11月中华医学会儿科学分会新生儿学组于长沙修订的新生儿缺氧缺血性脑病诊断标准,随机分为亚低温治疗组和常规治疗组,所有患儿均给予常规对症支持治疗(维持正常的血压和动脉血气,维持酸碱平衡以及限制入液量,控制惊厥及降颅压及营养支持,必要时给予呼吸支持治疗)。选本院同期产的出生在6小时以内的10名健康足月新生儿作为对照组。
　　 2.分组:将诊断为缺氧缺血性脑病的患儿随机分为亚低温治疗组(A组)和常规治疗组(B组),健康足月新生儿作为正常对照组(C组)。
　　 亚低温治疗组(A组)28例,平均日龄:7.65±4.8h,胎龄39.3±1.07w,出生体重3.55±0.31kg,(入选病例30例,其中1例放弃治疗退出试验,1例因为标本溶血剔除);
　　 常规治疗组(B组)26例,平均日龄:7.86±5.4h,胎龄38.8±1.26w,出生体重3.63±0.29kg,(入选病例30例,2例放弃治疗,2例因为标本不全或溶血原因剔除);
　　 正常对照组(C组)10例,平均日龄:7.46±4.4h,胎龄38.9±1.49w,出生体重3.50±0.33kg,为本院同期生后24小时内的足月健康新生儿,除外其母亲孕期感染,先天畸形、先天性代谢异常、宫内感染、高度疑似产前和产时感染、严重颅内出血、颅骨骨折。
　　 二、实验步骤
　　 1.亚低温治疗组和常规治疗组均接受常规治疗,提供足够的氧和葡萄糖,维持正常的血压和动脉血气,维持酸碱平衡以及限制入液量,控制惊厥及降颅压治疗。全程观察患儿生命体征,监测患儿体温、呼吸、血压、尿量、血常规、凝血机制、抽搐情况及有无皮肤硬肿发生。
　　 2.入院1小时内开始亚低温治疗。起始应用亚低温治疗时(0h)及治疗24小时(24h)、48小时(48h)、72小时(72h)、7天后取静脉血2ml。用3500r/min离心10min,提取血清置于-70℃冰箱保存备用。B组于以入院时间为起点开始计,在0时(Oh)24小时(24h)、48小时(48h)、72小时(72h)、7天分别取静脉血,提取血清后置于-70℃冰箱保存备用。C组于生后0时(Oh),24小时(24h)、48小时(48h)、72小时(72h)、7天分别取静脉血2ml,提取血清后置于-70℃冰箱保存备用。
　　 3.试验方法:应用黄嘌呤氧化酶法测定SOD,硫代巴比妥比色法测定MDA,检测步骤及方法按药盒说明进行。
　　 4.应用Spss13.0软件进行统计学分析。对计量资料进行方差分析及齐性检验,服从正态分布及方差齐性的数据。以均数±标准差(-x±s)表示。计数间比较采用卡方检验。两组患儿各时间点的变化采用方差分析,对资料进行正态性及球对称性检验,不满足球对称性条件时,使用Greenhouse-Geisser(G-G)法的球对称系数进行校正。检验水准定为0.05。
　　 结果:
　　 1.在正常组对照中,SOD和MDA在0h、24h、48h、72h、7天之间相互比较,P＞0.05,无统计学意义。
　　 2.正常对照组与常规治疗患儿组在0h、24h、48h、72h、7天各个时间段之间的两两相互比较,P＜0.05,具有统计学意义。
　　 3.亚低温治疗组与常规治疗患儿组在0h、24h、48h、72h、7天各时间点SOD和MDA浓度相互比较,P＜0.05,具有统计学意义。
　　 结论:
　　 1.缺氧缺血再灌注后氧自由基产生增多,清除氧自由基的SOD被大量消耗,血脂质过氧化反应增强,脂质过氧化产物MDA生成增多,造成对神经组织的损害,进一步促进HIE恶化。
　　 2.亚低温是治疗缺氧缺血性脑损伤的一种新疗法,能降低脑组织氧耗量;抑制内源性毒性产物对脑细胞的损伤作用;减少钙离子内流;抑制细胞凋亡;减少自由基、抑制自由基清除剂的消耗与脂类氧化的联锁,减少脑细胞蛋白破坏,促进脑结构和功能恢复;保护血脑屏障,减轻脑水肿,改善缺血后低灌注及再灌注损伤等。
　　 3.本实验结果表明选择性亚低温能抑制氧自由基生成,氧自由产生和连锁反应受到了抑制,减少了SOD的消耗,保氧化酶,保护脑组织抗氧化能力,同时能稳定细胞各种质膜,从而减轻脂质过氧化,减少其代谢产物MDA的生成,减轻对脑组织的损害,因而减低了缺血后神经细胞膜和细胞器的损害程度,从而保护脑组织。

目录

文摘

英文文摘

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 新生儿缺氧缺血性脑病研究新进展

致谢

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