普罗布考对脑梗塞大鼠脑组织Notch1及p53表达的影响及其神经保护作用机制的研究

摘要

目的:缺血性脑血管病是一种严重威胁人类健康的疾病,据世界卫生组织统计,我国脑卒中的发病率约为1/400,位居世界第二位。脑血管病具有高患病率、高致残率、高病死率、高复发率以及治疗费用高的特点,因此,对于缺血性脑血管病的治疗以及预防的研究至关重要。近年来,有关于脑缺血后神经损伤的病理生理机制的研究有了巨大进展。目前,脑缺血后的炎症反应与凋亡对脑组织造成的进一步损伤已得到重视与研究,并为临床治疗提供了新的思路。脑缺血后引起的Notch1因子表达上调与其所诱导的炎症反应,及其下游因子p53激活后所介导的细胞凋亡反应在缺血后继发性脑损伤中发挥着极其关键的作用。而应用有效药物对Notch通路进行干预是脑缺血后治疗的重要方向。普罗布考(probucol)最初被作为一种降脂药使用,除具有降低血脂的作用外,近来有报道发现,其还具有抗氧化、抗炎以及改善内皮功能等作用。最近实验表明,应用普罗布考还可抑制脑缺血后的神经细胞凋亡反应,但有关于普罗布考在脑缺血后减轻神经损伤作用机制的研究甚少。本实验应用大鼠永久性大脑中动脉闭塞(permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO)脑缺血模型,观察局灶脑缺血后大鼠大脑皮层Notch1和p53的表达,以及普罗布考在脑缺血急性期的神经保护作用及其对Notch信号通路的影响。
　　 方法:应用改良的Longa线栓法,使用成年雄性健康SD(Sprague-Dawley)大鼠建立大鼠右侧MCAO模型。实验动物随机分为假手术组(Sham)、MCAO组、普罗布考小剂量组(MCAO+probucol150mg/kg,Low dose)、普罗布考大剂量组(MCAO+probucol300mg/kg,High dose)四组。普罗布考大剂量组与小剂量组大鼠于线栓梗死后,立即进行腹腔注射普罗布考混悬液,而MCAO组和Sham组则腹腔注射等量的生理盐水。造模成功术后24小时对SD大鼠进行神经功能评分,评分完毕后将大鼠进行断头处死,完整取出脑部,之后使用干湿重法测定脑组织含水量,并用免疫组化法测定脑皮层神经细胞p53及Notch1的表达。
　　 结果:
　　 1.MCAO组、普罗布考小剂量组和普罗布考大剂量组大鼠均表现出程度相异的左侧肢体偏瘫。普罗布考小剂量组和普罗布考大剂量组大鼠神经功能评分平均值均低于MCAO组(MCAO组3.30±0.33,小剂量组2.60±0.31,大剂量组2.40±0.26),但各组间差异不具有统计学意义(P＞0.05)。
　　 2.普罗布考小剂量组和普罗布考大剂量组病变侧脑组织的含水量均低于MCAO组,普罗布考小剂量组与MCAO组相比差异具有统计学意义(MCAO组85.19％±7.80％,小剂量组为82.72％±8.03％,P＜0.05);普罗布考大剂量组与MCAO组相比差异具有统计学意义(大剂量组81.56％±8.12％,MCAO组85.19％±7.80％,P＜0.05);普罗布考小剂量组和普罗布考大剂量组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　 3.普罗布考小剂量组和普罗布考大剂量组Notch1和p53免疫组化阳性细胞数目均较MCAO组减少,普罗布考小剂量组与MCAO组相比差异具有统计学意义(P＜0.05);普罗布考大剂量组与MCAO组相比差异具有统计学意义(P＜0.05):普罗布考小剂量组和普罗布考大剂量组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　 结论:脑缺血后皮层Notch1和p53表达上调,而应用小剂量与大剂量的普罗布考均可以减轻脑水肿,下调Notch1和p53的表达。

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文摘

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前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 分子凋亡及其研究进展

致谢

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