mTOR抑制剂依维莫司在体外对人前列腺癌PC-3细胞株的作用及其机制

摘要

目的:在体外研究mTOR抑制剂依维莫司(Everolimus，RAD001)对人前列腺癌PC-3细胞增殖的改变，并探讨其可能的作用机制。
　　方法:体外采用细胞培养技术培养人前列腺癌PC-3细胞株，使用MTT法检测mTOR抑制剂依维莫司(Everolimus，RAD001)1nmol/l干预人前列腺癌PC-3细胞株24h、36h、48h、72h后，PC-3细胞株增殖的变化;流式细胞分析技术(FCM)检测mTOR抑制剂依维莫司(Everolimus，RAD001)干预人前列腺癌PC-3细胞株24h、36h、48h、72h后，细胞周期的变化;Western blot检测mTOR抑制剂依维莫司(Everolimus，RAD001)干预人前列腺癌PC-3细胞株24h、36h、48h、72h后，p-4E-BP1和p-P70-S6K的表达情况。采用SPSS13.0统计软件对实验所得数据分析，P＜0.05有统计学差异。
　　结果:
　　1 MTT结果显示，mTOR抑制剂依维莫司(Everolimus，RAD001)可抑制人前列腺癌PC-3细胞株的增值，且随着药物干预时间的延长，抑制率逐步增大(P＜0.01)。
　　2流式细胞分析技术(FCM)结果显示，人前列腺癌PC-3细胞株经mTOR抑制剂依维莫司(Everolimus，RAD001)干预后，随着药物干预时间的延长，G0/G1期的细胞百分比逐步升高，S、G2/M期的细胞百分比逐步降低，使绝大部分PC-3细胞被中断在细胞周期的G0/G1期(P＜0.01)。
　　3 Western blot检测结果显示，mTOR抑制剂依维莫司(Everolimus，RAD001)干预人前列腺癌PC-3细胞株后，随着药物干预时间的延长，p-4E-BP1和p-P70-S6K的表达逐步被抑制(P＜0.01)。
　　结论:
　　mTOR抑制剂依维莫司(Everolimus，RAD001)能够抑制人前列腺癌PC-3细胞株的增值，其机制可能与PI3K/Akt/mTOR信号传导通路中的mTOR被抑制，继而抑制了其下游的两个重要蛋白(即翻译抑制因子eIF-4E结合蛋白1(4E-BP1)和核糖体蛋白P70-S6K）的磷酸化有关。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 材料与试剂

2 主要仪器

3 工作液的配制与保存

4 方法

结果

1 MTT法检测mTOR抑制剂依维莫司对体外培养的人前列腺癌PC-3细胞株增殖的影响

2 依维莫司对人前列腺癌细胞株PC-3细胞周期变化的影响

3 Western blot检测依维莫司干预人前列腺癌细胞株PC-3后，不同时间内磷酸化的4E-BP1和p70S6K表达的影响

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 PI3K／Akt／mTOR信号传导通路与前列腺癌

致谢

个人简历