不同香烟烟雾暴露时间对大鼠肺组织树突状细胞数量的影响

摘要

目的:吸烟是影响健康的一个重要因素，可显著增加呼吸、心血管系统疾病、肿瘤的发病率。根据我国流行病学调查数据显示:我国每年死于吸烟相关性疾病的人数近100万，给社会带来严重的经济负担。
　　通过研究不同香烟烟雾暴露持续时间对大鼠肺组织CD11c和S100双标记阳性树突状细胞数量的影响，探讨树突状细胞在香烟烟雾暴露所致早期肺组织免疫反应中的变化，为呼吸系统吸烟相关性疾病发生、发展机制提供免疫学理论依据。
　　方法:清洁级雄性Wistar大鼠50只(体重150±20g)，购买于河北医科大学动物实验中心（动物合格证号1309071），饲养于河北省人民医院临床试验中心实验动物房，动物饲养环境符合中国实验动物清洁级动物饲养标准。将50雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、香烟烟雾暴露4周组、香烟烟雾暴露8周组、香烟烟雾暴露12周组、香烟烟雾暴露8周戒烟8周组，每组10只。参照许三林等自制实验性大鼠香烟烟雾暴露装置，香烟烟雾暴露装置为有机玻璃箱(70cm×60cm×40cm)。香烟烟雾暴露组每天香烟烟雾暴露2次（上、下午各一次，两次香烟烟雾暴露时间间隔至少6小时以上），每次吸烟15支，持续时间约2小时。香烟烟雾暴露组吸烟4、8、12周后给予3％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，腹主动脉放血处死后取右肺中叶，4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，病理观察并免疫组化法测定肺组织CD11c和S100双标记阳性树突状细胞表达的变化。
　　结果:
　　1.一般情况改变:
　　香烟烟雾暴露组大鼠香烟烟雾暴露2周后开始出现倦怠、毛发失去光泽、咳嗽、呼吸道分泌物增多;第4周时，大部分大鼠在香烟烟雾暴露时表现为烦燥，具体体现为乱跑、撞击箱子、大鼠间相互撕咬。
　　2.肺组织形态的变化:
　　肺组织HE染色:空白对照组大鼠肺组织结构正常，肺组织未见炎性细胞浸润，肺泡壁结构完整。香烟烟雾暴露组及戒烟组大鼠肺组织存在不同程度的纤毛上皮脱落，管壁周围炎性细胞浸润，血管周围炎性细胞渗出明显。随着香烟烟雾暴露时间的延长，纤毛上皮脱落越严重，管壁周围炎性细胞浸润越明显，香烟烟雾暴露12周组大鼠部分肺组织呼吸性细支气管囊状扩张，肺泡壁变薄或断裂，肺泡相互融合成肺大泡等肺气肿特征性病理改变。香烟烟雾暴露8周戒烟8周组大鼠肺组织，管壁周围仍有炎性细胞浸润，但较香烟烟雾暴露8周组减少，周围血管未见明显炎性细胞渗出。
　　3.肺组织树突状细胞CD11c蛋白免疫组织化学结果比较:
　　CD11c阳性树突状细胞在支气管管壁、炎症区域、血管周围分布明显。香烟烟雾暴露4周组CD11c阳性树突状细胞(10.12±0.82)、香烟烟雾暴露8周组CD11c蛋白阳性树突状细胞(13.51±0.97)、香烟烟雾暴露12周组CD11c蛋白阳性树突状细胞(14.63±1.09)、香烟烟雾暴露8周戒烟8周组CD11c蛋白阳性树突状细胞(12.03±1.39)均比空白对照组CD11c蛋白阳性树突状细胞(8.56±0.87)水平表达升高，香烟烟雾暴露12周组升高最明显，差异具有统计学意义(P＜0.05）。香烟烟雾暴露12周组CD11c蛋白阳性树突状细胞表达明显高于香烟烟雾暴露4周组，香烟烟雾暴露8周戒烟8周组与空白对照组相比，差异具有统计学意义(P＜0.05）。
　　4.肺组织树突状细胞S100蛋白免疫组织化学结果比较:
　　S100阳性树突状细胞在支气管管壁、炎症区域血管周围分布明显。香烟烟雾暴露4周组S100蛋白阳性树突状细胞(10.32±1.08)、香烟烟雾暴露8周组S100蛋白阳性树突状细胞(12.54±1.25)、香烟烟雾暴露12周组S100蛋白阳性树突状细胞(14.23±1.65)、香烟烟雾暴露8周戒烟8周组S100蛋白阳性树突状细胞(13.01±2.09)与空白对照组S100蛋白阳性树突状细胞(8.38±0.84)水平相比，表达明显升高，香烟烟雾暴露12周组升高最明显，差异具有统计学意义(P＜0.05）。香烟烟雾暴露12周组S100蛋白阳性树突状细胞表达明显高于香烟烟雾暴露4周组，香烟烟雾暴露8周戒烟8周组与空白对照组相比，差异具有统计学意义(P＜0.05）。
　　结论:
　　1.香烟烟雾暴露可以导致大鼠肺组织炎性改变，随着香烟烟雾暴露时间的延长，大鼠肺组织炎性改变越明显，逐渐出现肺气肿改变。
　　2.香烟烟雾暴露可以导致大鼠肺组织树突状细胞数量的增加。随着香烟烟雾暴露的延长，大鼠肺组织树突状细胞数量增多越明显，炎症区域可见大量树突状细胞聚集，炎症区域血管周围可见大量树突状细胞分布，提示树突状细胞可能从血液中募集而来。
　　3.戒烟后肺组织炎症细胞减少，树突状细胞数量有所减少。戒烟不能逆转大鼠肺组织慢性炎性改变，但可减缓炎性改变过程。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

3 树突状细胞计数及分析

4 统计学方法

结果

1 一般情况观察

2 大体标本观察

3 肺组织光镜下观察

4 大鼠肺组织树突状细胞CD11c免疫组织化学法测定结果

5 大鼠肺组织树突状细胞S100免疫组织化学法测定结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 香烟烟雾对呼吸系统树突状细胞的影响

致谢

个人简历