脑胶质瘤组织中解旋酶RECQ1表达与PCNA表达相关性分析

摘要

目的:人脑胶质瘤是最常见的颅内原发性肿瘤，手术难以根除，对放、化疗不敏感，因此如何有效的控制甚至治愈胶质瘤仍是亟待解决的难题，文献报道，WHO分级3级的胶质瘤患者平均生存期约3-5年，多形性胶质母细胞瘤患者平均生存期不足1年，寻找胶质瘤治疗新靶点及调整治疗策略，是我们当前亟待解决的难题。因此明确胶质瘤致病机理，进一步筛选高效特异性的治疗靶点尤为重要。而随着基因技术的不断深入研究，如何能利用基因有效治疗胶质瘤成为研究热点。
　　解旋酶是一类能解开核苷酸双链的酶，它广泛存在于多种生物体中，参与细胞内DNA复制、修复、转录重组以及RNA接拼、核糖体组装、蛋白质翻译，端粒稳定。最近研究表明，解旋酶第二大家族中的RECQ解旋酶亚家族在核酸代谢过程中起关键作用。研究表明RECQ1对肿瘤细胞增殖作用主要与其能够诱导肿瘤细胞DNA修复有关。
　　增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen，PCNA)在脑胶质细胞瘤组织中的表达能够反应胶质瘤恶性程度及胶质瘤细胞增殖能力，常用于胶质瘤患者预后评估。
　　探讨解旋酶RECQ1在不同级别人脑胶质瘤中表达情况，对于脑胶质瘤发生进展过程中核酸代谢特点进行初步探讨，明确PCNA对脑胶质瘤患者预后评估。对RECQ1和PCNA二者在胶质瘤细胞瘤增殖方面的内在联系做出初步推测，为脑胶质瘤患者预后评估及进一步放、化疗及基因治疗奠定基础。
　　方法:
　　1收集河北医科大学第二医院神经外科及保定市第一医院神经外科2012年11月-2013年10月期间83例经手术中切除并获的新鲜人脑胶质瘤组织及18例正常人脑组织，正常人脑组织取自急症行颅脑外伤内减压术患者。所取的肿瘤组织标本经两名以上神经病理医师进行诊断并确诊。83例患者，包括男性47例，女性36例。其中低级别胶质瘤（WHO分级1-2级）35例，高级别胶质瘤（WHO分级3-4级）48例。肿瘤位于大脑半球74例，小脑4例，丘脑3例，第三脑室1例，脑干1例。单发80例，多发3例。所有患者术前均无未接受放、化疗和免疫治疗史;标本取材后，生理盐水去除血渍，首先将部分投至液氮中速冻，进行半定量PCR检测，另一部分标本用10％甲醛固定，石蜡包埋，进行免疫组织化学染色。同时记录患者性别、年龄，病理级别。
　　2应用免疫组织化学方法，对实验组及对照组标本RECQ1和PCNA表达进行分析。
　　3同时对术中所取的新鲜胶质瘤组织运用液氮保存，应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chine reaction，RT-PCR)方法检测各组标本RECQ1 mRNA的表达。
　　4应用SPSS17.0统计软件对数据进行分析，组间比较采取x2检验，相关性检验采用Spearman相关分析。
　　结果:
　　1 RECQ1免疫组织化学结果显示:RECQ1蛋白着色于胶质瘤细胞细胞核。所有级别胶质瘤组织中的阳性表达率为56.6％(47/83)，对照组18例正常脑组织中RECQ1均呈阴性表达，在高级别胶质瘤组阳性表达率72.9％(35/48)，而在低级别胶质瘤组其阳性表达率为34.3％(12/35)，高级别胶质瘤组RECQ1表达高于低级别脑胶质瘤组，具有统计学差异(P＜0.05)。
　　2 PCNA免疫组织化学结果显示，阳性表达位于细胞核，在胶质细胞瘤中的阳性表达率为80.7％(67/83)，并且随胶质细胞瘤病理级别的增高而表达增高，而在正常脑组织中呈阴性表达。
　　3半定量-PCR研究结果:RECQ1 mRNA在正常脑组织、低级别胶质瘤组及高级别胶质瘤组中相对表达量分别为0.37±0.02，1.05±0.08和2.22±0.14，RECQ1在高级别脑胶质瘤组织中的表达高于低级别脑胶质瘤，二者均高于正常脑组织中表达，差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论:
　　1高级别脑胶质瘤组织中RECQ1表达高于低级别脑胶质瘤组，在正常脑组织中不表达。
　　2 RECQ1 mRNA在高级别脑胶质瘤组织中含量高于低级别脑胶质瘤组，在正常脑组织中呈低表达。
　　3 RECQ1蛋白表达与PCNA表达呈正相关，二者表达与肿瘤病理级别相关。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 试验材料

2 实验方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 老年高级别胶质瘤综合治疗

致谢

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