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不同强度跑台运动对大鼠心肌细胞糖脂代谢关键因子的影响

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前言

材料与方法

1 仪器及试剂

1.1 主要仪器

1.2 主要试剂

1.3 引物

2 大鼠模型制作

3 实验流程

3.1 大鼠心肌组织RNA提取

3.2 总RNA含量和纯度检测

3.3 引物扩增

3.4 Real time PCR程序

3.5 大鼠心肌组织全蛋白粗提

3.6 Western blotting检测

3.7 全自动生化分析仪化验血糖和甘油三脂。

4 统计学处理

结果

1 核酸电泳检测结果

2 不同运动强度后大鼠血糖、血脂的变化

3 不同强度跑台运动对大鼠心肌细胞糖脂代谢关键因子基因和蛋白表达水平的影响

3.1 不同强度运动对大鼠心肌细胞GLUT4基因和蛋白表达水平的影响

3.2 不同强度跑台运动对大鼠心肌细胞脂代谢关键因子FAT/CD36、CPT1基因表达水平的影响

3.3 不同强度运动对大鼠心肌细胞脂代谢关键因子FAT/CD36、CPT1蛋白表达水平的影响

附图

附表

讨论

1 不同运动强度对大鼠血糖、心肌GLUT4mRNA及蛋白表达的影响

2 不同运动强度对大鼠血脂、心肌FAT/CD36mRNA及蛋白、CPT1mRNA及蛋白表达的影响

2.1 不同强度运动对血脂的影响

2.2 不同强度运动对心肌FAT/CD36mRNA及蛋白的影响。

2.3 不同强度运动对CPT1mRNA及蛋白表达的影响

结论

参考文献

综述:糖脂代谢关键因子研究进展

致谢

个人简历

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摘要

目的:探讨不同强度跑台运动后大鼠血清脂肪酸和碳水化合物含量变化;探讨不同强度跑台运动对大鼠心肌细胞脂肪酸代谢和碳水化合物代谢关键因子的影响。探讨运动强度与大鼠心肌能量底物转换应用的关系,总结最有利于心脏健康的运动模式,为制订科学合理的运动和训练方案提供科学的参考依据。
  方法:健康雄性SD大鼠19只,随机分为3组。按训练强度不同随机分为如下3组:对照组(Control group,C,n=7)、低强度运动组(Low intensity exercise group,LE, n=6)(68%VO2max)、中强度运动组(Moderate intensity exercise group,ME,n=6)(78%VO2max),训练时间为8周,每周5d。运动训练结束取大鼠下腔静脉血及心脏,做好标记后迅速置于液氮中冷冻,然后转移至-80℃冰箱保存。测定不同组别大鼠血糖及甘油三酯的水平,应用PCR和Western Blot方法分别检测大鼠心肌GLUT4、CPT1、FAT/CD36基因及蛋白表达水平,探讨不同强度跑台运动对大鼠心肌细胞糖脂代谢关键因子的影响。
  结果:
  1与C组比较,LE组血糖降低,差异有极显著性(P<0.01),ME组血糖降低,差异无显著性(P>0.05);与LE组相比,ME组血糖显著升高,差异有极显著性(P<0.05)。
  2与C组比较,LE组TG降低,差异有显著性(P<0.05);ME组TG降低,差异无显著性(P>0.05);与LE组相比,ME组TG升高,差异有显著性(P<0.05)。
  3糖代谢关键因子基因表达比较:与C组相比,LE组GLUT4mRNA表达增加,差异无显著性(P>0.05),ME组GLUT4 mRNA表达显著增加(P<0.05);与LE组相比,ME组GLUT4 mRNA表达增加,差异无显著性(P>0.05)。
  4糖代谢关键因子蛋白表达比较:与C组相比,LE组GLUT4蛋白表达明显增加,且差异有极显著性(P<0.01);ME组GLUT4蛋白表达有增加趋势,差异无显著性(P>0.05)。与LE组相比,ME组GLUT4蛋白表达显著降低(P<0.05)。
  5脂代谢关键因子基因表达:与C组相比,LE组FAT/CD36mRNA的水平显著增加(P<0.05),ME组FAT/CD36 mRNA的水平增加,差异无显著性(P>0.05);与LE组相比,ME组FAT/CD36 mRNA的水平减少,差异无显著性(P>0.05)。与C组相比,LE组CPT1mRNA的水平增加,差异有极显著性(P<0.01),ME组CPT1mRNA的含量有减少趋势,但差异无显著性(P>0.05);与LE组相比,ME组CPT1mRNA的含量减少,且差异有极显著性(P<0.01)。
  6脂代谢关键因子蛋白表达比较:与C组相比,LE组FAT/CD36蛋白表达显著减少(P<0.05),ME组FAT/CD36蛋白表达明显增加(P<0.05)。与LE组相比,ME组FAT/CD36蛋白表达增加,且差异有极显著性(P<0.01)。与C组相比,LE组CPT1蛋白的表达量减少,差异有极显著性(P<0.01),ME组CPT1蛋白的相对表达量减少,差异有极显著性(P<0.01);与LE组相比,ME组CPT1蛋白的相对表达量减少,差异有极显著性(P<0.01)
  结论:低强度跑台运动(58%VO2max)时,心肌能量代谢底物来源可能以葡萄糖占优势,其机制可能通过上调糖代谢关键因子GLUT4基因及蛋白表达而达到;在中强度运动(78%VO2max)时,心肌对底物脂肪酸利用减少,可能通过下调 CPT1蛋白表达而达到。

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