LC3-Ⅱ与STS-1、MyD88在全身型幼年特发性关节炎患儿外周血淋巴细胞中的表达及相关性的初步研究

摘要

目的：通过研究sJIA患儿外周血淋巴细胞中LC3-Ⅱ表达，为进一步探索自噬在sJIA发生发展中的作用提供线索；通过研究MyD88及STS-1的表达，探索MyD88依赖的Toll样受体信号通路及STS-1是否参与sJIA自噬的发生。进而研究三者间是否有一定的相关性，为防治sJIA的发病提供新策略和新靶点，为临床治疗提供新方向。
　　方法：研究对象均来自2015年5月～2017年1月在河北医科大学第二医院小儿内科住院及门诊确诊的sJIA患儿及健康体检的儿童各26例。晨起空腹采血后，用“人外周血淋巴细胞分离液”分离得到淋巴细胞。实验分为两组：①对照组：在我院儿童保健门诊健康查体的儿童外周血淋巴细胞；②实验组：sJIA患儿外周血淋巴细胞。Western blotting检测淋巴细胞中LC3-Ⅱ、STS-1、MyD88蛋白的表达，结果进行统计学分析，检验有无统计学意义；免疫荧光检测LC3-Ⅱ在淋巴细胞胞浆中的表达。统计学处理方法：应用SPSS21.0统计软件进行统计学处理，检测数据服从正态分布时采用均数±标准差表示，两样本间的比较应用t检验；数据为非正态分布时用中位数（四分位数间距）表示，两样本间的比较应用非参数检验；通过线性相关分析对实验组数据进行分析；P>0.1为符合正态分布，P<0.05为差异有统计学意义，P<0.01为具有显著性差异。相关系数r<0.2无相关，0.2～0.4弱相关，0.4～0.7显著相关，r>0.7强相关。实验结果均重复三次以上。
　　结果：
　　1与健康儿童比较，全身型幼年特发性关节炎（sJIA）患儿外周血淋巴细胞STS-1表达增高，经t检验两组间具有统计学意义（P<0.05）。对Western所得条带进行半定量分析得到积分光密度值（IOD）终结果分别为健康儿童0.706±0.166，sJIA患儿1.031±0.275。
　　2全身型幼年特发性关节炎（sJIA）患儿外周血淋巴细胞中MyD88表达水平较健康儿童增高，经t检验两组间具有统计学意义（P<0.05）。Western得到积分光密度值终结果分别为健康儿童0.881±0.509，sJIA患儿1.611±0.623。
　　3全身型幼年特发性关节炎（sJIA）患儿外周血淋巴细胞 LC3-Ⅱ的表达水平较健康儿童表达增高，两组间具有统计学意义（P=0.004<0.05）。Western得到积分光密度值终结果分别为健康儿童0.597±0.179，sJIA患儿0.880±0.435。免疫荧光染色观察LC3-Ⅱ在淋巴细胞胞浆中的表达水平，与Western结果一致。
　　4全身型幼年特发性关节炎（sJIA）患儿外周血淋巴细胞中LC3-Ⅱ与STS-1积分光密度值间的散点图，经直线相关分析无相关性，无统计学意义（Pearson积差相关系数0.336，P=0.093>0.05）。
　　5全身型幼年特发性关节炎（sJIA）患儿外周血淋巴细胞中LC3-Ⅱ与MyD88积分光密度值呈正相关，直线相关分析有统计学意义（Pearson积差相关系数0.478，P=0.013<0.05）。
　　6全身型幼年特发性关节炎（sJIA）患儿外周血淋巴细胞中STS-1与MyD88积分光密度值呈正相关，直线相关分析有统计学意义（Pearson积差相关系数0.817，P=0.000<0.01）。
　　结论：
　　1 sJIA患儿外周血淋巴细胞STS-1高表达，提示STS-1基因在sJIA患儿与正常儿童间存在差异性表达。
　　2 sJIA患儿外周血淋巴细胞LC3-Ⅱ高表达，推测sJIA的发生发展与自噬过度表达有关。
　　3 sJIA患儿外周血淋巴细胞MyD88表达升高，且MyD88与LC3-Ⅱ的表达存在线性相关，提示在sJIA中Toll样受体信号通路参与自噬的发生。
　　4 sJIA患儿外周血淋巴细胞STS-1、LC3-Ⅱ表达不存在线性相关，但是不除外样本量小或者个体差异所致，且文献中有STS-1参与自噬发生的相关报道，推测在sJIA中STS-1通过激活某些信号通路诱导自噬的发生。

目录

声明

英文缩写

前言

材料与方法

1 研究对象

2 研究方法

3 统计学处理

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述:幼年特发性关节炎研究进展

致谢

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