肿瘤浸润淋巴细胞和PD-1/PD-L1与TKI治疗的肺腺癌患者预后的关系

摘要

目的：
　　肺癌发生于支气管黏膜上皮，是全球最常见的恶性肿瘤，同时在肿瘤相关死亡中位居第一位。在我国，居所有恶性肿瘤发病第一位的是肺癌，每年新发病例约73.3万，同时肺癌也居恶性肿瘤死亡第一位，每年死亡病例约59.1万。其中，非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC)约占85％，5年生存率仅为15%。肺腺癌又约占NSCLC的50%。随着近几年环境污染加重，肺癌的发病率居高不下，这也对肺癌的治疗和预后的判断提出了新的挑战。表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）突变型肺腺癌是NSCLC中一种重要的临床亚型。普遍认为，EGFR突变在西方肺腺癌患者中占10%，而在亚洲肺腺癌患者中可高达51.4%，并且在不吸烟的亚洲女性中EGFR突变率更高，中国人EGFR突变率为51.8%。病理TNM分期有助于评估术后病情发展，有助于辅助治疗决策的制定。但同一分期内不同患者的预后也有很大差别。因此，寻找新的预测标志物具有重要的意义。肿瘤浸润淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocytes，TILs）是主要存在于肿瘤微环境（tumor microenvironment， TME）内的一个异质性淋巴细胞群体，在多种肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用。程序性死亡受体-1（programmed death receptor-1，PD-1）是一种抑制性的协同刺激分子，有两个配体 PD-L1和 PD-L2。在肿瘤微环境中，肿瘤细胞上的PD-L1分子是主要的配体，且表达上调。T细胞上的PD-1和肿瘤细胞上的PD-L1结合后可负性调节 T细胞功能，抑制 T细胞的增殖和活化，促进肿瘤细胞免疫逃逸。但 TILs和 PD-1/PD-L1在EGFR突变型肺腺癌患者中的研究较少，意义尚不明确。因此，本研究采用免疫组化的方法，研究在接受酪氨酸激酶抑制剂（Tyrosine kinase inhibitor，TKIs）治疗的EGFR突变型肺腺癌患者中，肿瘤基质中CD3、CD8、CD45RO、Foxp3、PD-1分子和肿瘤上皮内PD-L1分子的表达与预后的关系。
　　方法：
　　1.采用免疫组织化学染色的方法检测CD3、CD8、CD45RO、Foxp3、PD-1和PD-L1分子在EGFR突变型肺腺癌组织中的表达，并分析免疫分子标志物与临床病理特征之间的关系。
　　2.采用 Spearman相关性检验分析 EGFR突变型肺腺癌患者组织中CD8+TILs与PD-L1之间的关系。
　　3.采用Kaplan-Meier法生存分析及Cox比例风险回归模型分析CD3、CD8、CD45RO、Foxp3、PD-1和PD-L1分子的表达与TKI治疗的肺腺癌患者预后的关系。
　　结果：
　　1.CD3、CD8、CD45RO、Foxp3、PD-1和PD-L1分子的表达
　　CD3、CD8、CD45RO、PD-1主要表达于肿瘤浸润淋巴细胞的细胞膜， Foxp3主要表达于肿瘤浸润淋巴细胞的细胞核，PD-L1主要表达于肿瘤细胞和部分间质细胞的细胞膜和细胞质中。50例EGFR突变型肺腺癌患者中，CD3表达阳性者为25例（50%）；CD8表达阳性者为23例（46%）；CD45RO表达阳性者为23例（46%）；Foxp3表达阳性者为23例（46%）；PD-1表达阳性者为24例（48%）；PD-L1表达阳性者为27例（54%）。
　　2.CD8和PD-L1分子的表达水平与临床病理特征的关系
　　在EGFR突变型肺腺癌组织中，CD8分子和PD-L1分子的表达水平与临床病理特征之间均无显著相关性。
　　3.各免疫分子标志物的表达和总生存期（overall survival，OS）的关系
　　CD3分子表达阳性者的OS明显好于阴性者（P=0.039），CD3分子表达阳性患者的中位OS为47m，阴性患者为42m；CD8分子表达阳性者的OS明显好于阴性者（P=0.030），CD8分子表达阳性患者的中位OS为52m，阴性患者为42m；PD-L1分子表达阳性者的OS明显好于阴性者（P=0.002），PD-L1分子表达阳性患者的中位 OS为51m，阴性患者为41m。然而，CD45RO、Foxp3、PD-1分子的表达水平和OS无关（P=0.121， P=0.478，P=0.249）。
　　4.PD-L1分子的表达和CD8+TILs的相关性分析
　　PD-L1分子的表达和CD8+TILs存在相关性（P=0.044），且呈正相关，相关系数为0.286。
　　5.预后多因素的Cox回归分析
　　淋巴结分期（N）、吸烟、CD8和PD-L1为OS的独立预测标志物。其中，N和吸烟为危险因素，风险比分别为1.517和4.863，P值分别为0.034和0.001。CD8和 PD-L1分子为保护性因素，风险比分别为0.469和0.461，P值分别为0.041和0.027。
　　结论：
　　1.在TKI治疗的肺腺癌患者中，PD-L1分子的表达与较好的预后相关。
　　2.在TKI治疗的肺腺癌患者中，PD-L1分子的表达与CD8+TILs呈正相关。
　　3.在TKI治疗的肺腺癌患者中，CD8和 PD-L1分子的表达可作为OS的阳性预测标志物。

目录

声明

英文缩写

前言

材料与方法

1 研究对象

2 免疫组化染色（SP法）

3 统计学方法

结果

1 CD3、CD8、CD45RO、Foxp3、PD-1和PD-L1分子的表达

2 CD8和PD-L1分子的表达水平与临床病理特征的关系

3各免疫分子标志物的表达和OS的关系

4 PD-L1分子的表达和CD8+TILs的相关性分析

5预后多因素的Cox回归分析

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述:非小细胞肺癌中TILs及PD-1/PD-L1与预后的关系

致谢

个人简历