大型真菌ITS鉴定及8种野生蕈菌的驯化研究

摘要

我国野生菌物种资源十分丰富。据不完全统计，我国食用菌（包括药用菌）约2000余种，其中已驯化成功的有50余种，主栽品种20多个，支撑了我国食用菌产业的健康、快速发展。本研究首先采用18S rDNA和28S rDNA基因间隔序列(ITS)鉴定技术，对从河北省野生菌产区采集到的27种野生高等真菌子实体及17种来自子实体的菌丝体（分离菌种）进行了鉴定。随后，对其中8种具有一定食用或药用价值的野生菌种开展了驯化研究，取得的主要结果如下:
　　1.通过ITS分子生物学鉴定，结合形态学特征，确定了27种野生菌的分类地位。
　　2.对17个来自子实体分离菌种的ITS分析结果表明，除1种为污染杂菌外，其余菌种身份均得到确认。
　　3.对8种野生菌的驯化研究结果如下:
　　(1)碳源筛选:最适宜橘黄裸伞和朱红栓菌生长的碳源为蔗糖;最适宜肉色香蘑、水粉杯伞、小白蘑和紫丁香蘑生长的碳源为可溶性淀粉;最适宜树舌灵芝和香杏丽蘑生长的碳源为麦芽糖。
　　(2)氮源筛选:最适宜橘黄裸伞、树舌灵芝、水粉杯伞、小白蘑、紫丁香蘑生长的氮源为酵母粉;最适宜朱红栓菌生长的氮源为牛肉膏和硫酸铵;最适宜肉色香蘑生长的氮源为硫酸铵;最适宜香杏丽蘑生长的氮源为蛋白胨。
　　(3)无机盐筛选:最适宜橘黄裸伞、朱红栓菌生长的无机盐为磷酸二氢钾，其次是硫酸镁;最适宜树舌灵芝生长的无机盐为硫酸镁，其次是磷酸二氢钾。
　　(4)正交实验结果:橘黄裸伞最适宜的营养因子最佳组合配方为:蔗糖25g/L，酵母粉8g/L，磷酸二氢钾4g/L，硫酸镁2g/L;朱红栓菌最佳营养因子组合配方为蔗糖25g/L，牛肉膏5g/L，磷酸二氢钾3g/L，硫酸镁1g/L。
　　(5)pH筛选:最适宜橘黄裸伞和紫丁香蘑生长的pH为5.5;最适宜朱红栓菌、肉色香蘑、树舌灵芝生长的pH为5.0。
　　(6)温度筛选:最适宜橘黄裸伞和朱红栓菌生长的温度均为25℃。
　　(7)光照筛选:橘黄裸伞、朱红栓菌两个菌株生长过程中均不需要光照，过多的光照还可能抑制橘黄裸伞菌丝的生长。
　　(8)母种培养基配方筛选:最适合橘黄裸伞、树舌灵芝、水粉杯伞生长的培养基为玉米粉培养基;最适合朱红栓菌生长的培养基为木屑+麸皮煮汁培养基;最适合肉色香蘑、香杏丽蘑、紫丁香蘑生长的培养基为PDA+牛粪煮汁培养基;最适合小白蘑生长的培养基为PDA+蘑菇煮汁培养基。
　　(9)原种培养基配方筛选:最适合橘黄裸伞生长的原种培养基配方为棉籽壳+麸皮培养基(棉籽壳83％，麸皮15％，葡萄糖1％，石膏1％，含水量65％，pH6～7);最适合朱红栓菌、树舌灵芝生长的原种培养基配方为木屑+棉籽壳培养基(木屑40％，棉籽壳43％，麸皮15％，葡萄糖1％，石膏1％，含水量65％，pH6～7);最适合肉色香蘑生长的原种培养基配方为麦粒+牛粪培养基（麦粒78％，干牛粪10％，麸皮10％，葡萄糖1％，石膏1％，含水量65％，pH6～7）。
　　(10)出菇试验:成功获得了橘黄裸伞和朱红栓菌的子实体，橘黄裸伞第一潮菇产量为50g，生物学效率为13.3％;朱红栓菌第一潮菇产量为73g，生物学效率为16.2％。

目录

声明

摘要

引言

文献综述

1 野生蕈菌概况

2 野生菌的价值

2．1 野生菌的食用价值

2．2 野生茵的药用价值

2．3 野生菌的其他价值

3 野生菌开发利用情况

4 野生菌驯化的目的及意义

5 野生菌驯化研究进展

5．1 国外野生菌驯化研究进展

5．2 国内野生菌驯化研究进展

6 野生菌驯化方法

6．1 野生菌鉴定

6．2 菌丝体生理研究

6．3 驯化栽培

7 与本实验有关的8种野生菌研究进展

第一章 27种大型真菌及17种野生菌种的ITS鉴定

1 材料与方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 结果与分析

2．1 27种野生大型真菌的采集及初步鉴定

2．2 27种野生大型真菌的ITS片段扩增

2．3 27种野生大型真菌的ITS鉴定结果

2．4 17种野生菌种的ITS鉴定

3 讨论

第二章 8种野生食药用菌的驯化研究

1 材料与方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 结果与分析

2．1 野生菌种营养条件研究

2．2 野生菌种生长环境条件研究

2．3 野生菌人工驯化栽培研究

3 讨论

结论

参考文献

附图

致谢

攻读学位期间参与的课题及科研成果