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【6h】

D-核糖对应激性胃溃疡和心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

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目录

声明

摘要

引言

1 综述

1.1 D-核糖的代谢途径

1.2 D-核糖的功能研究

1.2.1 D-核糖对骨骼肌的影响

1.2.2 D-核糖对心血管疾病的影响

1.2.3 D-核糖在其他方面的作用

1.3 D-核糖的毒理性研究

1.4 D-核糖的应用

1.4.1 D-核糖在医疗上的应用

1.4.2 D-核糖在工业上的应用

1.4.3 D-核糖在食品上的应用

1.5 展望

2 D-核糖对应激性胃溃疡的影响

2.1 实验材料

2.1.1 主要仪器

2.1.2 主要试剂

2.2 实验方法

2.2.1 浸水-束缚应激

2.2.2 超氧化物歧化酶活力检测

2.2.3 丙二醛含量测定

2.2.4 ELISA检测髓过氧化物酶活力

2.2.5 Real-Time PCR检测IGF-1和TIMP-2基因表达水平

2.3 实验结果

2.3.1 胃黏膜组织的形态学观察

2.3.2 血清和胃黏膜组织中SOD活力的比较

2.3.3 血清和胃黏膜组织中MDA含量的比较

2.3.4 胃黏膜中MPO活力的比较

2.3.5 胃黏膜中IGF-1基因表达水平的比较

2.3.6 胃黏膜中TIMP-2基因表达水平的比较

2.4 讨论

2.4.1 应激性胃溃疡

2.4.2 D-核糖对应激性胃溃疡SOD活力和MDA含量的影响

2.4.3 D-核糖对应激性胃溃疡MPO活力的影响

2.4.4 D-核糖对应激性胃溃疡IGF-1基因表达水平的影响

2.4.5 D-核糖对应激性胃溃疡TIMP-2基因表达水平的影响

3 D-核糖对心肌细胞缺氧/复氧的影响

3.1 实验材料

3.1.1 主要仪器

3.1.2 主要试剂

3.2 实验方法

3.2.1 原代心肌细胞培养及活力测定

3.2.2 D-核糖毒性研究

3.2.3 缺氧/复氧模型的建立

3.2.4 D-核糖浓度筛选

3.2.5 心肌细胞中SOD活力检测

3.3 实验结果

3.3.1 心肌细胞的培养和形态学观察

3.3.2 心肌细胞活力

3.3.3 D-核糖毒性实验结果

3.3.4 D-核糖浓度筛选结果

3.3.5 心肌细胞中SOD活力的比较

3.4 讨论

3.4.1 原代心肌细胞培养

3.4.2 心肌细胞缺氧/复氧损伤模型

3.4.3 D-核糖对心肌细胞抗氧化能力的影响

结论

参考文献

附录

缩略词

致谢

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摘要

应激性胃溃疡严重影响人的生活质量,市场上治疗胃溃疡的药物需要肝脏代谢,肾脏排出,加重了肝脏和肾脏的负担,影响肝肾功能。本实验研究D-核糖对应激性胃溃疡的保护作用,旨在找出一种治疗胃溃疡且不给身体造成其它负担的物质。同时,在细胞水平探讨了D-核糖对心肌抗氧化作用的影响。
  本研究以SD大鼠为对象,通过浸水束缚应激建立了胃溃疡模型,黄嘌呤氧化酶法检测血清和胃黏膜组织中SOD活力,硫代巴比妥酸法检测血清和胃黏膜组织中MDA含量,ELISA法检测胃黏膜组织中MPO活力,荧光定量PCR技术检测胃黏膜组织中IGF-1和TIMP-2基因表达水平。体外培养原代心肌细胞,利用倒置相差显微镜观察心肌细胞生长状态,MTT排斥法检测细胞活力和D-核糖毒性,黄嘌呤氧化酶法检测心肌细胞的SOD活力。结果显示,D-核糖可显著提高SOD活力,降低MDA含量和MPO活力,下调IGF-1基因表达水平,上调TIMP-2基因表达水平。表明,D-核糖可减少氧自由基产生,维持氧化与抗氧化平衡,避免氧化应激的发生、中性粒细胞浸润和炎症反应,保持细胞结构和功能的完整。因此,D-核糖可能具有预防和治疗胃溃疡的作用。成功建立了心肌细胞体外培养方法,证明D-核糖对心肌细胞无毒性作用,浓度为5 mg/mL、10 mg/mL和15mg/mL的D-核糖溶液对细胞抗氧化作用最强。体外建立的心肌细胞缺氧/复氧模型成功模拟了在体心肌缺血再灌注损伤,D-核糖显著提高了SOD活力,提高了机体抗氧化水平。表明,D-核糖可能具有预防和治疗心肌细胞缺氧复/氧损伤的作用。

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