有氧间歇训练结合利拉鲁肽对糖尿病大鼠肝脏脂毒性的影响

摘要

选题背景及研究目的： 2型糖尿病是一种内分泌代谢疾病，其患病率在全球范围内呈逐年增高趋势，是危害人类健康的主要慢性病之一。肝脏是机体主要的代谢器官，其在糖尿病作用下产生的脂毒性使糖尿病病情恶化，改善肝脏脂毒性对糖尿病的治疗具有重要作用。近年来，体医结合是治疗糖尿病的研究热点和发展趋势，因此，本研究采用有氧间歇训练结合利拉鲁肽干预糖尿病大鼠，观察肝脏脂毒性的症状变化，初步探讨干预的可能机制，为拓宽糖尿病临床治疗，提供理论依据和实践指导。 研究材料与方法： 选取8周龄Wistar雄性大鼠60只，体重200±20g，随机分为正常空白对照组（C组）和糖尿病模型组，后者是采用高糖高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素（STZ,30mg/kg）复制而成。糖尿病大鼠模型复制成功的判断标准是：STZ注射后连续两次空腹血糖＞11.1mmol/L。待模型稳定两周后，进行运动和药物干预，随机将糖尿病模型大鼠分为糖尿病对照组（D组，8只）、有氧间歇训练干预组（DE组，8只）、利拉鲁肽药物干预组（DL组，8只）和有氧间歇训练结合利拉鲁肽干预组（LE组，8只）。DE组与 LE组的有氧间歇训练方案为10min热身运动，7min?4次的强度为85%-90%VO2max的运动和3min?4次的强度为50%-60%VO2max的运动，10min放松。有氧间歇训练训练5天/周，共8周。DL组与LE组的给药方案为0.2mg/kg/d，D组则注射相同体积的生理盐水，共8周。实验期间，每两周记录大鼠的空腹血糖和体重，8周干预结束后，应用酶法检测各组大鼠的血清空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平；ELISA法检测血清空腹GLP-1含量、血清空腹胰岛素（FINS）、肝脏组织游离脂肪酸（FFA）及二酰甘油（DAG）含量；计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）及胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）；实验结束后，取部分肝脏组织多聚甲醛固定进行HE染色与油红O染色观察组织形态学变化；免疫印迹法检测肝脏组织的FAT/CD36、CPT-1A、PPAR?及GLP-1R的蛋白表达。 研究结果： ①有氧间歇训练与利拉鲁肽分别干预以及二者结合都可以降低糖尿病大鼠的血糖血脂水平，主要表现为空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯降低（P＜0.05）；同时有氧间歇训练与利拉鲁肽可使糖尿病大鼠血清空腹胰岛素水平升高（P＜0.01），胰岛素抵抗指数降低（P＜0.05），胰岛β细胞功能指数升高（P＜0.05），并且二者结合的效果更佳（P＜0.01）。 ②有氧间歇训练、利拉鲁肽及二者结合可以改善糖尿病大鼠的肝功能损害，表现为血清谷丙转氨酶与谷草转氨酶水平明显下降（P＜0.01），且运动结合药物效果更好；同时形态学观察显示，二者结合可明显减轻肝细胞形态结构的改变。 ③有氧间歇训练、利拉鲁肽及二者结合可以降低糖尿病大鼠肝脏脂质蓄积，表现为肝脏组织游离脂肪酸和二酰甘油含量明显降低（P＜0.01），且运动结合药物效果更好；同时形态学观察显示，二者结合可明显降低肝细胞内脂质含量。 ④有氧间歇训练、利拉鲁肽以及二者结合均可以降低糖尿病大鼠肝脏FAT/CD36蛋白的表达水平，提高肝脏组织CPT-1A蛋白的表达水平（P＜0.05或P＜0.01）；有氧间歇训练、利拉鲁肽以及二者结合能显著提高糖尿病大鼠肝脏PPAR?蛋白的表达水平（P＜0.01）；利拉鲁肽及其与运动结合都能提高糖尿病大鼠肝脏GLP-1R蛋白的表达水平（P＜0.05或P＜0.01）。 研究结论： （1）本研究采用高糖高脂膳食加小剂量腹腔注射链脲佐菌素（30mg/kg）方法成功复制2型糖尿病模型。 （2）有氧间歇训练结合利拉鲁肽可显著降低糖尿病大鼠的血糖血脂水平，改善胰岛素抵抗，提高糖尿病大鼠肝功能，减轻肝细胞病理损伤，降低肝脏的脂质堆积，缓解糖尿病大鼠肝脏脂毒性。 （3）有氧间歇训练结合利拉鲁肽改善糖尿病大鼠肝脏脂毒性的分子机制：一方面，有氧间歇训练与利拉鲁肽协同激活肝脏PPAR?，增加PPAR?表达，进而降低CD36的表达，增加CPT1A的表达；另一方面，利拉鲁肽上调肝脏GLP-1R蛋白表达，二者共同调控实现的。

目录

声明

缩略词

引言

1 文献综述

1.1 糖尿病与肝脏脂毒性

1.2 有氧间歇训练与糖尿病

1.3 利拉鲁肽与糖尿病

1.4 肝脏脂代谢相关蛋白研究

2 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 指标检测方法

2.4数据统计分析

3 实验结果

3.1 成功复制糖尿病大鼠模型

3.2 实验过程中各组大鼠体重及血糖的变化

3.3 实验结束后各组大鼠血清各指标的变化

3.4 实验结束后各组大鼠血清AST与ALT含量的变化

3.5 实验结束后各组大鼠肝脏组织形态学观察

3.6 实验结束后各组大鼠肝脏组织中FFA、DAG含量的变化

3.7 实验结束后各组大鼠肝脏脂代谢相关蛋白的表达

4 分析与讨论

4.1 糖尿病大鼠模型分析

4.2 有氧间歇训练与利拉鲁肽对糖尿病大鼠肝脏脂毒性的干预效果

4.3 运动结合药物干预对糖尿病大鼠肝脏脂毒性改变的可能机制分析

结论

参考文献

附录

致谢

攻读学位期间取得的科研成果清单