梨属（Pyrus L.）植物RAPD反应体系的建立及其应用研究

摘要

梨为蔷薇科(Rosaceae),梨亚科(Pomoideae)之梨属(Pyrus L.)植物.世界梨属植物约有60余种,分布于欧、亚、北美洲及南半球温带地区.中国是世界梨属植物的起源中心之一,蕴藏的梨属种质资源极为丰富.该研究借助RAPD技术对鸭梨及其9个变异系和其它44个梨属植物进行了DNA水平上的研究,旨在探讨RAPD技术在梨树芽变鉴定中的作用,通过对梨属部分种质进行鉴定和亲缘关系分析,解决例如苹果梨等在分类上存在争议的品种的归属问题,为梨属种质的科学利用和分子标记辅助育种提供参考.

目录

文摘

声明及授权书

文献综述

1梨属植物种质资源的研究

1.2梨属植物的起源和演化

1.3种质鉴定和分类研究

2 RAPD技术在果树种质资源研究中的应用

2.1 RAPD技术原理及特点

2.2 RAPD技术在果树种质资源研究中的应用

2.3 RAPD技术的局限性及其应用前景

3梨树种质资源的RAPD分析

引言

材料与方法

1材料

1.1供试样品

1.2供试药品

2方法

2.1 DNA提取

2.2 RAPD 扩增

2.3 RAPD扩增产物检测

2.4结果记录与分析

结果与分析

1基因组DNA的提取和检测

2 RAPD分析最佳体系的建立

2.1 DNA浓度对RAPD扩增结果的影响

2.2 dNTP浓度对RAPD扩增结果的影响

2.3 Taq酶对RAPD扩增结果的影响

2.4 Mg2+浓度对RAPD扩增结果的影响

2.5引物浓度对RAPD扩增结果的影响

2.6 PCR反应循环参数对RAPD扩增结果的影响

3高效率引物的筛选

4鸭梨及其变异类型的RAPD分析

5供试类型的RAPD分析

5.1供试类型的RAPD扩增结果

5.2供试类型的聚类结果

5.3供试类型聚类结果分析及其亲缘关系分析

5.4品种间的聚类结果及亲缘关系分析

讨论

1影响梨树基因组DNA提取的主要因素

2不同实验室间梨属植物RAPD分析最佳反应条件的比较

3关于RAPD的稳定性与可行性

4关于鸭梨及其变异类型的RAPD分析

5梨属植物遗传多样性研究

6苹果梨的分类地位研究

7库尔勒香梨的分类地位研究

8 RAPD技术在梨属植物种质资源研究中的应用价值

结论

参考文献

附表

致谢