嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila HB310-59菌株杀虫活性的研究

摘要

该研究从10种昆虫病原线虫中分离出250个共生菌菌株,通过生物测定,筛选出胃毒活性较强的菌株,并对其杀虫活性进行了深入的研究,现将主要研究结果总结如下:1.筛选出高毒力菌株—XenorkabdusnematophilaHB310-59菌株和对昆虫病原线虫共生菌敏感的昆虫—菜青虫.2.HB310-59菌株有很广的杀虫谱,对小菜蛾、马铃薯瓢虫均可在72h校正死亡率达100﹪:对菜青虫在120h校正死亡率为100﹪,对其致死中浓度LC<,50>.为3.2105×10<'6>个cells/ml.3.对HB310-59菌株胞外和胞内物质杀虫活性的研究结果,胞外和胞内均含有胃毒素,胞内蛋白粗提物和胞外蛋自粗提物对初孵棉铃虫的体重抑制率分别为98.13﹪、93.77﹪.4.HB310-59菌株理化特性的研究.5.HB310-59菌株胞外的SDS-PAGF,电泳图谱的13条带在胞内也都含有,而且胞内含有的蛋白种类要比胞外的多,相应种类的蛋白含量也是胞内比胞外的高.6.胞内蛋白粗提物对5龄初棉铃虫围食膜的影响,主要是作用于两种蛋白质,一种是分子量在76kDa左右,作用时间是从30min到28h,另一种是分子量约在87kDa左右,作用时间是从8h到48h.

目录

文摘

声明及授权书

文献综述

1共生细菌的分类

2共生菌的型变

3共生菌与线虫的关系

4共生细菌的致病性

5共生细菌的其他代谢物质

6共生菌的安全性

引言

材料和方法

1实验材料

1.1供试线虫品系

1.2供试菌株

1.3供试昆虫

1.4供试培养基

1.5供试试剂

1.6溶液及电泳凝胶的配比

1.7仪器及透析袋

2实验方法

2.1共生菌的分离

2.2共生菌菌液的制备

2.3生物测定方法

2.4昆虫病原线虫共生菌对不同昆虫寄主的敏感性比较和高度力菌株的筛选

2.5 HB310-59菌株生长曲线的测定

2.6不同培养时间对HB310-59菌株杀虫活性的影响

2.7HB310-59菌株杀虫物质的粗提取

2.8对HB310-59菌株胃毒活性的测定

2.9 HB310-59菌株粗提物的血腔活性

2.10HB310-59菌株部分理化性质的测定

2.11HB310-59菌株胞内蛋白粗提物对棉铃虫中肠围食膜的组织病理学影响

结果与分析

1昆虫病原线虫共生菌对不同昆虫寄主的敏感性比较和高度力菌株的筛选

2对HB310-59菌株生长曲线及不同培养时间对其杀虫活性影响的测定

3 HB310-59菌株对不同昆虫胃毒活性的生物测定

3.1对不同昆虫的胃毒活性的测定

3.2对菜青虫的致死中浓度(LC50)

4 HB310-59菌株胃毒活性的测定

4.1不同部位杀虫活性的检测

4.2粗提物对1、3龄棉铃虫胃毒活性的生物测定

5 HB310-59菌株粗提物的血腔活性

5.1胞外和胞内蛋白粗提物的血腔活性检测

5.2胞内蛋白粗提物对大蜡螟致死中量的测定

6对HB310-59菌株部分理化性质的测定

6.1温度对其胃毒活性的影响

6.2紫外线对其胃毒活性的影响

6.3试剂对其胃毒活性的影响

6.4在4℃时的稳定性及SDS-PAGE电泳

7 HB310-59菌株胞内蛋白粗提物对棉铃虫中肠围食膜的组织病理学影响

7.1围食膜的解剖镜观察

7.2围食膜的SDS-PAGE电泳分析

讨论

结论

参考文献

ABSTRACT

致谢