在线富集毛细管电泳法与荧光法测定四种兽药残留

摘要

推扫技术是利用胶束电动毛细管色谱模式实现的样品在线富集技术，可大大改进毛细管电泳的检出限。诺氟沙星是一种人兽共用药，利用毛细管电泳在线推扫富集技术实现了对诺氟沙星的在线富集。建立了基于此原理的测定鸡肉中诺氟沙星残留量的毛细管电泳新方法，对影响组分富集的缓冲溶液pH值、硼酸盐浓度、表面活性剂浓度、分离电压、进样压力、缓冲液中甲醇浓度、样品中甲醇浓度进行了优化。优化后的测定条件为：运行缓冲液是含10％(V/V)甲醇、110 mmol/L SDS、pH 9.30的120mmol/L硼酸盐缓冲液；压力进样方式，进样压力为2750.2 kPa×s；运行电压12.5 kv。在确立的最佳分析条件下，诺氟沙星组分的峰值浓度富集倍数可达692倍，检出限为30 μg/L，折合样品后满足国标中对鸡肉组织中诺氟沙星最大残留为50μg/kg的要求。校正曲线的线性范围在50～9000μg/L。本方法用于市售鸡肉中诺氟沙星残留量的测定，并进行了加标试验，最后测定回收率在81.29％～87.06％。结果是可靠的。 依诺沙星、左氧沙星与诺氟沙星同属于氟喹诺酮类抗菌药，也为人兽共用药。根据其荧光光谱特性，确立了利用胶束增敏法同时测定牛奶中残留的依诺沙星、左氧沙星的荧光分光光度法。最终确定测定条件为：柠檬酸.柠檬酸钠缓冲液(含SDS 80mmol/L、柠檬酸盐50 mmol/L，pH 3.65)。在此条件下，依诺沙星和左氧沙星的检出限分别为2.90μg/L和2.11 μg/L，校正曲线的线性范围分别是50μg/L～600μg/L、25μg/L～350μg/L。将此方法应用于市售鲜奶的测定及加标回收试验，回收率分别为：依诺沙星101.29％～113.67％，左氧沙星85.63％～91.93％。 阿苯哒唑，也称丙硫咪唑、肠虫清，是一种常用抗蠕虫药。利用胶束增敏荧光法可使其发射光谱强度增强为增敏前的5倍。通过对表面活性剂的种类、浓度及溶液pH值的优化，最终确定的测定方法为：磷酸一磷酸钠缓冲液(含SDS 20 mmol/L、磷酸盐50 mmol/L，pH=2.12)，检出限为10μg/L，完全满足我国及欧盟、日本等国规定乳中ALB的残留允许限量(MRL)为100μg/L的要求。校正曲线线性范围为125μg/L～2000μg/L。样品加标回收率为80.07％～85.01％。此方法已用于牛奶中残留阿苯哒唑的测定。

目录

文摘

英文文摘

声明

1引言

1.1高效毛细管电泳技术简介

1.1.1高效毛细管电泳的重要发展历程

1.1.2高效毛细管电泳在抗生素分析中的应用

1.1.3毛细管电泳各种浓缩技术研究进展

1.2荧光分光光度法在药物测定中的应用

1.2.1常见的荧光增敏方法

1.3左氧氟沙星、依诺沙星、诺氟沙星及阿苯哒唑分析方法研究进展

1.3.1喹诺酮类药物简介及其分析方法

1.3.2阿苯哒唑简介及其分析方法

2、在线推扫富集法测定鸡肉中残留诺氟沙星

2.1试验部分

2.1.1主要仪器和试剂

2.1.2电泳条件

2.1.3试验方法

2.2结果与讨论

2.2.1分离电压的选择

2.2.2缓冲溶液种类及浓度对峰高的影响

2.2.3缓冲液中表面活性剂浓度的选择

2.2.4进样量的选择

2.2.5缓冲溶液pH值的选择

2.2.6缓冲溶液中甲醇浓度的选择

2.2.7样品中甲醇含量的确定

2.2.8蛋白沉淀方法的确定

2.2.9萃取pH值的确定

2.2.10校正曲线、线性范围和检出限

2.2.11峰值浓度的富集倍数

2.1.12实际样品的分析

2.2.13回收率的测定

2.3结论

3胶束增敏荧光法同时测定牛乳中的残留依诺沙星和左氧沙星

3.1实验部分

3.1.1试剂与仪器

3.1.2实验方法

3.2结果与讨论

3.2.1背景校正波长的选择

3.2.2增敏剂的选择

3.2.3溶液pH值对荧光强度的影响

3.2.4 SDS浓度对荧光强度的影响

3.2.5线性范围、检出限和精密度

3.2.6共存物质的干扰

3.2.7样品分析

3.2.8回收率试验

3.3结论

4胶束增敏法测定牛奶中阿苯哒唑残留量

4.1试验部分

4.1.1仪器与试剂

4.1.2试验方法

4.1.3仪器测定条件

4.2结果与讨论

4.2.1表面活性剂种类对阿苯哒唑荧光强度的影响

4.2.2溶液pH值对荧光强度的影响

4.2.3 SDS浓度对荧光强度的影响

4.2.4蛋白沉淀剂的确定

4.2.5蛋白离心分离时机的确定

4.2.6有机萃取溶剂的选择

4.2.7线性范围、检出限和精密度

4.2.8共存物质的干扰

4.2.9样品分析

4.2.10回收率试验

4.3结论

5结论

参考文献

硕士期间发表学术论文

作者简介

致谢