食品中金黄色葡萄球菌的分布及其肠毒素基因的研究

摘要

金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)是引起细菌性食物中毒的重要病原菌之一，广泛存在于自然环境中，对各种理化因素都有较高的抵抗力。无论在发达国家还是在发展中国家由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒在细菌性食物中毒中均占有较大比例。在美国由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的比例约为33％，加拿大约占45％，某些欧洲国家如匈牙利、芬兰等占5096以上，我国每年由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件也是屡见不鲜。 本试验通过对采自生牛乳、生鲜肉(猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉)、肉制品、水产品、速冻食品、果蔬、豆制品等510份样品，进行了金黄色葡萄球菌的分离与鉴定，结果在7类样品中均检出了该菌，金黄色葡萄球菌总检出率为21.9％，证实了该地区金黄色葡萄球菌污染食品的广泛性，同时也表明保定市及其周边地区金黄色葡萄球菌的污染程度较高，值得注意。在不同种类食品样品中，金黄色葡萄球菌的检出率存在明显差异，其中生牛乳和速冻食品中金黄色葡萄球菌的检出率偏高，说明该菌污染这两类食品的机率较大，应该重视奶制品及速冻食品的质量问题，以免引起食源性疾病的爆发。此外，金黄色葡萄球菌检出率较低的食品种类和人们的日常饮食也是息息相关。所以，食品的卫生问题应引起高度重视。 金黄色葡萄球菌引起的食物中毒主要是由于进食了含有金黄色葡菌球菌肠毒素的食物。目前，金黄色葡萄球菌肠毒素按血清学分型常可分为14型(A、B、C、D、E、G、H、I、J、K、L、M、N、O)，在爆发性食物中毒中最常见的血清型是A型。本试验设计合成金黄色葡萄球菌SEA、SEB、SEE致病基因引物，进行PCR鉴定，以研究这三种金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布状况。在分离得到的295株金黄色葡萄球菌中，有145株菌至少含有金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)、金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)、金黄色葡萄球菌肠毒素E(SEE)中的一种。其中含SEA基因的菌株有58株，含SEB基因的菌株有69株，含SEE基因的菌株有5株；含SEA、SEB两种基因的菌株有12株，含SEA、SEE两种基因的菌株有1株。本研究表明，所分离的金黄色葡萄球菌的带毒率较高。 在我国人群、家畜及食品中，金黄色葡萄球菌的污染状况及该病原菌的流行情况有待于进一步研究，以便为金黄色葡萄球菌引起的疾病的监控、爆发流行的检测以及追踪污染源提供依据。

目录

文摘

英文文摘

声明

1.引言

1.1 目的意义

1.2研究现状

1.2.1 金黄色葡萄球菌生物学特征

1.2.2 金黄色葡萄球菌的流行病学

1.2.3致病性

1.2.4分离鉴定方法

1.3研究目的和内容

2.材料和方法

2.1试验材料

2.1.1标准菌株

2.1.2样品的采集

2.1.3培养基

2.1.4主要试剂

2.1.5主要仪器设备

2.2试验方法

2.2.1样品的采集

2.2.2 金黄色葡萄球菌的分离

2.2.3 金黄色葡萄球菌的鉴定

2.2.4 金黄色葡萄球菌致病因子——肠毒素基因的鉴定

3.结果与分析

3.1金黄色葡萄球菌的自然分布研究

3.1.1 菌株的鉴定

3.1.2 金黄色葡萄球菌在各大类样品中的分布

3.1.3 金黄色葡萄球菌的分布状况分析

3.2金黄色葡萄球菌致病因子——肠毒素的基因鉴定及其分布研究

3.2.1 SEA的PCR鉴定（扩增片段长度为121bp）

3.2.2 SEB的PCR鉴定（扩增片段长度为217bp）

3.2.3 SEE的PCR鉴定（扩增片段长度为306bp）

3.3金黄色葡萄球菌的污染状况和产毒分析

4.讨论

4.1金黄色葡萄球菌的鉴定

4.2金黄色葡萄球菌的自然分布

4.3预防措施

4.4金黄色葡萄球菌肠毒素基因分布

5.结论

参考文献

在读期间发表的学术论文

作者简历

致谢