小孢拟盘多毛孢除草活性物质的分离和除草机理研究

摘要

环境和谐型绿色农药是当代农药发展的必然趋势，从天然化合物中筛选农药活性物质或农药先导化合物是绿色农药研发的重要途径之一。本试验室前期研究发现，来自小孢拟盘多毛孢的代谢产物对多种田间常见杂草均有较强的杀灭活性，且持续期长，具有作为生物除草剂的开发潜力。本试验对固体培养基和液体培养产生除草活性物质的能力进行了比较，探讨了小孢拟盘多毛孢高效产毒的条件，对代谢产物中具有除草活性的组分进行了分离研究，并初步确定了除草活性物质的除草机理以期为该病菌的高效开发利用提供一定的理论依据。试验结果如下：
　　 1.对液体培养和固体培养进行了比较。结果发现，与液体发酵相比，固体发酵具有发酵周期短、除草效果强、成本低廉等特点。因此确定固体发酵培养是小孢拟盘多毛孢最为适合的培养方式。
　　 2.对固体培养的条件进行优化分析。发现，小米和玉米渣是小孢拟盘多毛孢最为适合的固体培养基，最适培养时间为8 d，最适宜温度为30℃，pH值对除草活性物质的产生没有显著影响，此外，在培养基中加入0.5 g葡萄糖可以显著提高除草活性物质的产量。
　　 3.通过对小孢拟盘多毛孢代谢产物的萃取溶剂进行摸索，发现利用乙酸乙酯直接萃取提取的粗毒素除草活性最好。TLC分离的最佳展开剂配方为乙酸乙酯∶石油醚=1∶1和丙酮∶石油醚=2∶1。以TLC分析结果为依据进行连续柱层析分析，结果得到一种粉末状固体。生物测定发现，该物质的除草活性与粗提物相比并没有显著降低。将该物质进行高效液相色谱分析后得到一个具有较高除草活性的纯组分。
　　 4.以马唐为指示杂草，对毒素的稳定性进行了研究，发现毒素的除草活性物质对热相对稳定,80℃水浴6 h除草活性不下降。
　　 5.研究发现，来自小孢拟盘多毛孢得除草活性物质对马唐和反枝苋的种子萌发具有抑制作用，对叶片细胞的细胞膜透性、丙二醛含量、超氧阴离子自由基含量、希尔反应活力、叶绿素含量、β-胡萝卜素以及叶片含水量均具有不同程度的影响，且除草活性与光照具有协同作用。

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1 引 言

2 材料与方法

3 结果与分析

4 讨 论

5 结论

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