金鱼杂交种的苗种繁育和遗传多样性研究

摘要

2011年5月17日以北京市通州鑫淼水产总公司的琉金金鱼(红)与龙睛金鱼(红)为实验对象进行了种间杂交试验与自交试验,杂交试验部分包括正交试验琉金♀×龙睛♂与反交试验琉金♂×龙睛♀,自交试验部分包括琉金自交与龙睛自交。研究了金鱼杂交种的苗种繁育技术,并对杂交子一代与自交子一代的胚胎发育过程、形态学特征、染色体核型与同工酶电泳差异作了分析与比较。
　　 试验对金鱼正交子一代、反交子一代及自交子一代的胚胎发育进行了观察,研究了相同条件下金鱼杂交种与亲本型金鱼胚胎(即自交子一代)发育的差异,并研究了金鱼杂交种的苗种繁育技术。对苗种培育120d后进行了形态学数据的测量,分析了杂交种与亲本的染色体核型,并对试验金鱼的肾、肝、心、肌四个组织的四种同工酶(乳酸脱氢酶LDH、苹果酸脱氢酶MDH、酯酶EST、苹果酸酶ME)进行了不连续的垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果表明:
　　 试验获得琉金自交、龙睛自交、正交、反交四种类型受精卵,经统计,琉金受精卵约3200粒,受精率90％,孵化率80%,孵出鱼苗约2300尾;龙睛受精卵约3000粒,受精率89%,孵化率80%,孵出鱼苗约2100尾;正交组合所产的受精卵约3000粒,受精率94%,孵化率90%,孵出鱼苗约2500尾;反交组合所产的受精卵约3500粒,受精率95%,孵化率80%,孵出鱼苗约2300尾。孵化水温为25℃,琉金金鱼的胚胎经过52.4h破膜,龙睛金鱼的胚胎经过56.3h破膜,正交F1的胚胎经过51.3h破膜,反交F1的胚胎经过55.4h破膜。本次试验中培育金鱼夏花数量为:琉金1700尾、龙睛1590尾、正交组合所产后代1850尾、反交组合所产后代1730尾。经过四次挑选,获得优质金鱼数量为:琉金850尾、龙睛790尾、正交组合所产后代920尾、反交组合所产后代860尾。
　　 在所测的22项表型性状的杂种指数中,正交大眼型F1有8项指数为负值,14项为正值,在负值中有6项偏向母本,2项完全偏向母本;在正值中有11项偏向父本,3项完全偏向于父本,表现出偏父本遗传;正交小眼型F1表型性状的杂种指数中,有18项为负值,4项为正值,在负值中有17项偏向母本,1项完全偏向母本;正值中有4项偏向父本,表现出偏母本遗传。在反交大眼型F1表型性状的杂种指数中,有14项指数为负值,8项为正值,负值全部偏向母本,无完全偏向母本的指数,正值全部偏向父本,无完全偏向父本的指数,表现为偏母遗传;反交小眼型F1表型性状的杂种指数中,有5项指数为负值,17项为正值,负值全部偏向母本,无完全偏向母本的指数,正值中有16项偏向父本,1项完全偏向于父本,表现为偏父遗传。
　　 表型性状的单因子方差分析结果为,琉金和正交小眼F1的全长/体长、头长/体长之间差异极显著(P＜0.01),体高/体长、体宽/体长之间差异不显著(P＞0.05);琉金和反交小眼F1的全长/体长、头长/体长、体高/体长之间差异极显著(P＜0.01),体宽/体长之间差异显著(P＜0.05);琉金和正交大眼F1的4个比例参数之间均存在极显著差异(P＜0.01);琉金和反交大眼F1的全长/体长、体宽/体长之间差异不显著(P＞0.05),头长/体长、体高/体长之间差异极显著(P＜0.01)。龙睛和正交大眼F1的全长/体长、头长/体长、体宽/体长之间差异不显著(P＞0.05),体高/体长之间差异极显著(P＜0.01),龙睛和反交大眼F1的全长/体长、体高/体长、体宽/体长之间差异极显著(P＜0.01),头长/体长之间差异不显著(P＞0.05);龙睛和正交小眼F1的全长/体长、体高/体长、体宽/体长之间差异极显著(P＜0.01),头长/体长之间差异不显著(P＞0.05);龙睛和反交小眼F1的全长/体长、体高/体长、体宽/体长之间差异极显著(P＜0.01),头长/体长之间差异不显著(P＞0.05)。
　　 正交大眼型杂交种的核型公式为2n=100,20m+30sm+8st+42t,NF=150,染色体相对长度范围为1.37%～3.46%,小眼型杂交种的核型公式为2n=100,24m+28sm+4st+44t,NF=152,染色体相对长度范围为1.28%～3.66%;反交大眼型杂交种的核型公式为2n=100,24m+30sm+4st+42t,NF=154,染色体相对长度范围为1.37%～3.51%,小眼型杂交种的核型公式为2n=100,22m+28sm+6st+44t,NF=150,染色体相对长度范围为1.11%～3.84%,均未发现异型染色体。
　　 在肝脏、肾脏、肌肉、心脏四个组织中均有LDH酶活性,并且乳酸脱氢酶具有明显的组织特异性,条带呈细带谱型。在肝脏中共检测出12条,肾脏中5条,肌肉中2条,心脏6条。苹果酸脱氢酶在不同试验金鱼、不同组织中的酶谱基本一致,而且试验金鱼具有m-MDH和s-MDH两种类型的苹果酸脱氢酶。苹果酸酶在肌肉和心脏中表达活性较强,存在明显的组织特异性。EST在肝、肾、肌、心中均有表达,在肝脏中活性表达最强,其次是肾脏,具有显著的组织特异性。多数杂交子一代的同工酶表达在一定程度上受到孑双亲的影响,多与亲本表达的酶谱相似,不同个体之间同工酶的表达与否及表达程度差异较小,推断杂交种的成活率高且可顺利繁殖后代。