利用活体生测体系筛选棉花立枯病高效生防菌和化学药剂

摘要

由立枯丝核菌（Rhizoctonia solani Kühn）引起的棉花立枯病是棉花苗期主要病害之一，目前仍然缺乏高效、环保的防治措施。利用活体微生物农药是防治作物土传病害行之有效的措施之一，而如何快速筛选高效生防菌是开发微生物农药的重要基础。生防菌防治作物土传病害的机制包括抑菌作用、竞争作用和诱导抗性等。综合考虑生防菌的防病作用机制，建立防治棉花立枯病快速、高效生防菌的活体生测体系，为生防菌的筛选和微生物源农药的开发提供技术支持。本研究建立了棉花立枯病活体生测体系，获得6株能有效防治棉花立枯病的生防细菌和6种化学药剂，生防菌的防效和化学药剂的防效相当。
　　1、棉花立枯病活体生测体系的建立。以棉花立枯病为防治对象，在室内条件下通过对病原菌接种物以及接种数量和接种深度进行优化，确定利用谷粒壳为载体进行病原菌接种，接种深度距棉籽4.5cm。在此条件下可以获得棉花立枯病的理想发病率，可供高效生防菌和化学药剂的筛选。
　　2、利用棉花立枯病活体生测体系，对2000余株拮抗细菌进行筛选，获得6株生防效果较高的生防细菌，为菌株HMB27756、HMB27703、HMB27723、HMB28179、HMB27676和HMB28593，对立枯病的平均防效分别为63.58％、55.32％、53.10％、44.73％、35.61％和33.55％.
　　3、分别利用gyrB基因、16S rDNA和Biolog微生物鉴定系统对菌株HMB27756、HMB27723、HMB27703、HMB28179、HMB27676和HMB28593进行了鉴定，明确菌株HMB27756和HMB28179为解淀粉芽胞杆菌，菌株HMB27723、HMB27703、HMB27676和HMB28593为枯草芽胞杆菌。
　　4、比较6株生防细菌对棉花生长的影响，发现筛选到的6株生防菌都对棉花的根长、株高、地上部鲜重和地下部鲜重有不同程度的促生作用，其中菌株HMB27756对棉花的根长、株高、地上部鲜重和地下部鲜重有显著的促生作用。
　　5、采用平板对峙培养法测试了菌株HMB27756、HMB27723、HMB27703、HMB28179、HMB27676和HMB28593对棉花立枯菌、棉花枯萎菌、棉花黄萎菌和番茄灰霉菌的抑菌活性，发现这6株生防细菌对植物病原真菌均表现较强的抑菌活性。
　　6、利用棉花立枯病活体生测体系对防治作物土传病害的14种化学农药进行了筛选，获得6种对棉花立枯病防效较理想的化学农药，分别为精甲·咯·嘧菌、咯菌腈、多福、唑醚·代森联、福美双和多抗霉素，平均防治效果分别为56.87％、55.92％、52.31％、47.64％、36.54％和34.80％.

目录

声明

摘要

1 引言

1．1 棉花立枯病的危害及分布

1．2 棉花立枯病的防治措施

1．2．1 农业防治

1．2．2 化学防治

1．2．3 生物防治

1．3 获得生防微生物菌株的筛选方法以及存在的问题

1．4 生防菌的鉴定

1．5 研究目的及意义

2 试验材料

2．1 供试菌株

2．1．1 致病菌菌株

2．1．2 拮抗菌来源

2．2 供试棉花品种

2．3 试剂及主要仪器设备

2．3．1 所用培养基

2．3．2 主要化学试剂

2．3．3 主要化学农药

2．3．4 主要仪器设备

3 试验方法

3．1 棉花立枯病活体生测体系的建立

3．1．1 立枯丝核病菌的制备

3．1．2 生防菌发酵液的制备

3．1．3 育苗土的制备

3．1．4 棉种催芽

3．1．5 播种

3．1．6 管理和病情调查

3．2 生防菌的筛选

3．2．1 控温生长室盆栽筛选生防菌

3．2．2 生防菌对棉花生长的影响

3．2．3 平板抑菌测定筛选生防菌

3．3 生防菌的鉴定

3．3．1 生防菌的分子鉴定

3．3．2 生防菌的Biolog微生物鉴定

3．4 筛选防治棉花立枯病的化学农药

3．4．1 立枯丝核病菌的制备

3．4．2 化学药剂的制备

3．4．3 育苗土的制备

3．4．4 棉种催芽

3．4．5 播种

3．5 数据统计分析

4 结果与分析

4．1 棉花立枯病活体生测体系的建立

4．1．1 不同接种物对棉花出苗率和死苗率的影响

4．1．2 不同接种深度对棉花出苗率和死苗率的影响

4．2 生防菌的筛选

4．2．1 生防菌对棉花立枯病的盆栽防治效果

4．2．2 六株生防菌对棉花生长的影响

4．2．3 平板抑菌测定筛选生防菌

4．3 生防菌的鉴定

4．3．1 生防菌的分子鉴定结果与分析

4．3．2 Biolog微生物鉴定结果与分析

4．4 防治棉花立枯病化学农药的筛选结果与分析

5 讨论

5．1 棉花立枯病活体生测体系的分析

5．2 关于对棉花立枯病活体生测体系应用的分析

5．3 关于棉花立枯病高效生防菌株鉴定的分析

6 结论

参考文献

作者简历

致谢