丹参多糖对雏鸡肝损伤保护作用的研究

摘要

在目前的家禽养殖过程中，由于抗生素的滥用以及霉菌毒素的广泛存在，家禽因肝损伤引发的疾病日益严重。本试验为了探讨丹参多糖对雏鸡肝损伤的保护作用及其机制，从体外体内两个方面进行了研究，以期为丹参多糖在家禽养殖业中的应用提供理论依据。
　　体外试验，选取18～20日龄的雏鸡，通过胶原酶两步灌流法分离培养原代肝细胞，用醋氨酚(AP)制备肝细胞损伤模型。用不同浓度的丹参多糖处理受损的肝细胞，通过检测细胞上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)和细胞裂解液中细胞色素P450含量的变化，评价丹参多糖对受损肝细胞的保护作用。结果显示，胶原酶灌流法分离得到的肝细胞形态完整，生长良好，可用于后续研究。AP诱导的肝细胞损伤模型的细胞培养液中ALT、AST较空白组含量显著升高，其最佳造模浓度为15mmol/L。丹参多糖处理损伤的肝细胞后，细胞培养液中的ALT、AST、MDA含量显著回落，GSH含量以及细胞裂解液中CYP450酶的含量显著回升。
　　体内试验，将150只雏鸡随机分为空白对照组、模型组及丹参多糖高、中、低剂量组。采用灌服CCl4建立雏鸡急性肝损伤模型，然后分别用不同浓度的丹参多糖饮水进行预防保护试验。通过检测雏鸡肝脏系数和血清ALT、AST、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)的含量以及肝组织中MDA的含量变化，评价丹参多糖对受损肝细胞的保护作用。结果显示，与空白对照组比较，模型组雏鸡的TP、Alb含量显著降低(P＜0.05)，肝指数、ALT、AST、MDA均显著增高(P＜0.05)。而造模的同时给予不同剂量丹参多糖进行预防保护的雏鸡，其血清中的TP、Alb含量显著高于模型组(P＜0.05)，AST、ALT活性和肝组织中的MDA含量显著低于模型组(P＜0.05)，且与空白对照组相比均无无显著差异(P＞0.05)。
　　结论:丹参多糖可以有效地预防雏鸡的肝损伤;抑制肝损伤所致胞内酶外漏;增强肝脏的合成功能，提高TP、Alb含量;增强肝脏的抗氧化能力，升高GSH含量，降低MDA含量;提高CYP450的含量，加快药物在体内的代谢速率。

目录

声明

论文说明

摘要

缩写词表

1 引言

1．1 丹参药理作用的研究进展

1．1．1 丹参的抑菌消炎作用

1．1．2 丹参的抗氧化作用

1．1．3 丹参的免疫调节作用

1．1．4 丹参的护肝作用

1．1．5 丹参对心血管的改善作用

1．1．6 丹参的抗肿瘤作用

1．2 多糖药理作用的研究进展

1．2．1 多糖的免疫调节作用

1．2．2 多糖的抗肿瘤作用

1．2．3 多糖的抗衰老和氧化作用

1．2．4 多糖的降血糖降血脂作用

1．2．5 多糖的其他作用

1．3 原代肝细胞的分离和培养技术

1．4 细胞色素P450与肝损伤的关系

1．5 研究目的及意义

2 材料和方法

2．1 试验材料

2．1．1 试验动物

2．1．2 主要试剂及药品

2．1．3 主要仪器设备

2．2 试验方法

2．2．1 丹参多糖对雏鸡原代肝细胞损伤的影响

2．2．2 丹参多糖对雏鸡肝损伤的保护作用

2．3 数据处理

3 结果

3．1 醋氨酚对雏鸡原代肝细胞的影响

3．1．1 雏鸡原代肝细胞的数量和成活率

3．1．2 醋氨酚对雏鸡原代肝细胞ALT活力的影响

3．1．3 醋氨酚对雏鸡原代肝细胞AST活力的影响

3．2 丹参多糖对雏鸡原代肝细胞的影响

3．2．1 丹参多糖对ALT、AST活力的影响

3．2．3 丹参多糖对MDA、GSH含量的影响

3．2．3 丹参多糖对CYP450含量的影响

3．3 丹参多糖对雏鸡肝损伤的影响

3．3．1 丹参多糖对急性肝损伤雏鸡肝脏变化的影响

3．3．2 丹参多糖对急性肝损伤雏鸡肝指数的影响

3．3．3 丹参多糖对雏鸡谷丙转氨酶(ALT)含量的影响

3．3．4 丹参多糖对雏鸡谷草转氨酶(AST)含量的影响

3．3．5 丹参多糖对雏鸡肝组织中丙二醛(MDA)含量的影响

3．3．6 丹参多糖对雏鸡总蛋白(TP)含量的影响

3．3．7 丹参多糖对雏鸡白蛋白(Alb)含量的影响

4 讨论

4．1 丹参多糖对肝脏指数的影响

4．2 丹参多糖对ALT、AST的影响

4．3 丹参多糖对MDA、GSH的影响

4．4 丹参多糖对TP、Alb的影响

4．5 丹参多糖对CYP450的影响

5 结论

参考文献

附录

作者简介

致谢