酢浆草对a-萘异硫氰酸酯所致大鼠肝损伤的干预作用

摘要

目的：用不同方法提取分析酢浆草的活性成分，对酢浆草不同成分进行分析，观察其不同成分对a-萘异硫氰酸酯所致肝损害大鼠模型的保护作用。
　　方法：
　　1.本研究通过提取酢浆草不同的成分，分别是：①将干粉浸入适量蒸馏水并置于磁力搅拌上，加热，搅拌，然后过滤，浓缩，冷冻干燥，得到酢浆草Ⅰ。②加入用盐酸、乙醇提取，浸泡或水浴加热，间隙搅拌，待反应结束后，过滤，浓缩至膏状，得到酢浆草Ⅱ。③加入乙醇，加热回流提取，用乙醚清洗，分离上层溶液，滴加碳酸氢钠溶液，用三氯化碳萃取两次，取水层，加入盐酸溶液，沉淀，干燥后得到酢浆草Ⅲ。对酢浆草提取成分进行结构分析得出其主要成分，对其进行抗氧化、清除超氧自由基等能力进行检测。
　　2.用已提取的酢浆草Ⅰ、酢浆草Ⅱ、酢浆草Ⅲ分别给模型大鼠灌胃，观察酢浆草各活性成分对大鼠肝损伤模型的生活状态、肛温、生化指标、NO等的影响。
　　结果：
　　1.用三种不同方法提取的酢浆草的活性成分，为酢浆草Ⅰ、酢浆草Ⅱ、酢浆草Ⅲ。经结构分析得到酢浆草Ⅰ主要活性成分为多糖类化合物，酢浆草Ⅱ的主要活性成分为花青素类化合物，酢浆草Ⅲ的主要活性成分为黄酮类化合物。三种不同活性成分的性状颜色都不同，并在抗氧化实验及干预肝损伤实验中均有不同作用。抗氧化能力采用体外清除自由基实验，实验结果为，对DPPH自由基的清除率随浓度的增加而增大。
　　2.酢浆草各活性成分在a-萘异硫氰酸酯（ANIT）诱导的大鼠肝损伤模型有一定干预作用，实验中ANIT中毒的大鼠模型出现体重骤减，新陈代谢发生紊乱，出现食欲下降，精神萎靡等症状，表明造模成功。但是当加入酢浆草三种成分提取物溶液时均可一定程度缓解以上大鼠出现的症状。与造模组相比较，酢浆草可以显著增加大鼠的体重，降低大鼠的肛温。但是酢浆草Ⅱ对造模组大鼠的体重没有影响。在测定各组大鼠中碱性磷酸酶（ALP）、谷丙转氨酶（ALT）、总胆素（TB）、谷草转氨酶（AST）的实验结果中，可以清晰看出造模组血清中各ALP、AST、ALT、TB含量显著增高。然而加入酢浆草各成分进行干预，血清中ALP、AST、ALT、TB含量显著低于造模组，其中酢浆草Ⅲ组测定的各指标含量显著低于酢浆草Ⅰ、酢浆草Ⅱ组，这说明酢浆草Ⅲ对肝损伤的保护作用最大，可以显著改善肝损伤。
　　3.本实验还测定肝脏造模后血液中一氧化氮含量发现，血液红细胞中一氧化氮（NO）含量明显升高。NO含量升高会导致氧化应激反应加剧从而使过氧化物增加，影响肝脏的功能。实验结果显示，酢浆草各成分均会使造模后的大鼠血液红细胞中NO含量降低。
　　结论：
　　1.从酢浆草可以提取不同的活性成分依次命名为酢浆草Ⅰ、酢浆草Ⅱ、酢浆草Ⅲ，经结构分析得到酢浆草Ⅰ、酢浆草Ⅱ、酢浆草Ⅲ主要活性成分分别为多糖类化合物、花青素类化合物、黄酮类化合物。
　　2.本研究说明酢浆草具有抗氧化能力等作用，酢浆草对a-萘异硫氰酸酯所致大鼠的肝损伤有保护作用，并且这些作用与酢浆草的活性成分及结构有密切相关。

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英文缩略词表

第一章 文献综述

1.1 肝损伤

1.1.1 肝损伤概述

1.1.2 黄疸肝炎简介

1.1.3 治疗黄疸肝炎现有药物与方法

1.2 肝损伤的致病机制

1.2.1 氧化还原平衡失衡

1.2.2 脂质过氧化与肝细胞损伤

1.2.3 花生四烯酸代谢

1.2.4 肝细胞中钙离子超载

1.2.5 缺血缺氧与肝细胞损伤

1.2.6 细胞因子与肝细胞损伤

1.3 酢浆草的研究现状

1.3.1 酢浆草简介

1.3.2 酢浆草的活性成分

1.3.3 酢浆草的药理作用

参考文献

第二章 实验研究

1 前言

2 材料和仪器

2.1 仪器

2.2 试剂

2.3试验动物

3 实验方法

3.1 酢浆草活性成分提取及性质测定

3.2 酢浆草体外抗氧化作用

3.3 酢浆草干预肝损伤活性研究

3.4 数据分析

4 结果

4.1 酢浆草活性成分提取

4.2 酢浆草抗氧化作用结果

4.3 酢浆草干预大鼠肝损伤实验结果

4.4 大鼠血液中NO含量检测

5 讨论

5.1 酢浆草各提取物与其生物活性关系

5.2 酢浆草活性成分的抗氧化作用与肝损伤关系

5.3 酢浆草活性成分的干预肝损伤作用

5.4 酢浆草活性成分对一氧化氮的影响

6 结论

参考文献

致谢