甘草酸制剂及其主要成分对大鼠CYP3A酶活性和P-gp转运功能影响的研究

摘要

本文研究了甘草酸制剂对CYP3A酶活性的影响，以及甘草酸制剂主成分18α-甘草酸和18β-甘草酸对P-糖蛋白功能的影响。本研究分为三个部分：第一章：介绍了甘草酸制剂、CYP3A酶和P-糖蛋白研究概况，阐明了研究目的和意义。第二章：对国内外上市的4代甘草酸制剂对肝微粒体CYP3A酶活性的影响进行比较与分析。将CYP3A酶的特异性探针睾酮和不同浓度的甘草酸制剂加入体外大鼠肝微粒体孵育体系，用高效液相色谱法测定睾酮的羟基化代谢产物6β-羟基睾酮的含量，评价甘草酸制剂对大鼠肝微粒体CYP3A酶活性的影响。结果显示，所采用的方法符合生物样品检测标准；上市4代甘草酸制剂对 CYP3A酶表现出诱导或抑制作用，第1、2代甘草酸制剂对CYP3A酶活性的影响以诱导作用为主，第3、4代甘草酸制剂对CYP3A酶活性的影响以抑制作用为主。每种甘草酸制剂对CYP3A酶活性强度的影响与给药浓度有关，结果有显著性差异。联合用药时应考虑不同甘草酸制剂对CYP3A酶活性的影响，研究结果为临床合用药物相互作用的研究以及剂量的调整提供依据。第三章：探究了不同配比18α-甘草酸和18β-甘草酸对 P-糖蛋白跨膜转运功能的影响。选择罗丹明123为P-gp底物和探针，建立Caco-2单层细胞模型，通过检测罗丹明123的荧光强度得到其在细胞中的转运量，了解不同比例甘草酸异构体对P-gp功能的影响，筛选异构体最佳配比。结果表明，当18α-甘草酸和18β-甘草酸配比为6:4时，药物对 P-糖蛋白的抑制作用最强，P-糖蛋白外排功能最弱；当两种异构体配比为0:10时，诱导作用最强，外排率最大。实验结果可以为临床合理用药，以及合并用药时的使用方法、使用剂量的调整提供参考，为新药研发提供依据。

目录

声明

第1章 绪 论

1.1 甘草酸制剂研究进展

1.2 CYP3A酶研究进展

1.2.1 CYP3A酶简介

1.2.2 药物对CYP3A酶活性作用的研究

1.2.3 研究目的与意义

1.3 P-糖蛋白研究进展

1.3.1 P-糖蛋白简介

1.3.2 Caco-2细胞模型简介

1.3.3 研究目的及意义

第2章 4代甘草酸制剂对大鼠肝微粒体CYP3A酶活性影响的比较研究

2.1 引言

2.2 实验部分

2.2.1 动物、试剂与仪器

2.2.2 色谱条件

2.2.3 溶液配制

2.2.4 样品处理

2.2.5 睾酮米氏常数Km的测定

2.3 结果与讨论

2.3.1 专属性实验

2.3.2 方法学考察

2.3.3 不同浓度甘草酸制剂作用下CYP3A酶活性测定

2.3.4 甘草酸制剂对CYP3A酶活性的影响

2.4 结论

第3章 不同配比甘草酸差向异构体对P-gp转运功能的影响

3.1 引言

3.2 实验部分

3.2.1 仪器与试剂

3.2.2 溶液配制

3.2.3 实验方法

3.3 结果与讨论

3.3.1 细胞模型的考察

3.3.2 药物对罗丹明123跨膜转运的影响

3.4 结论

参考文献

致谢

攻读学位期间取得的科研成果