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英文缩略词表
第一章 绪 论
1.1 引言
1.2 肿瘤发生发展过程及化学预防
1.3 肿瘤细胞代谢
1.3.1 有氧糖酵解简介
1.3.2 异柠檬酸脱氢酶简介
1.4 醉茄素A抑癌作用的研究进展
1.5 研究意义、创新点及研究内容
第二章 实验研究
2.1 实验材料
2.1.1 实验细胞系
2.1.2 药物制备
2.1.3 主要试剂
2.1.4 主要仪器
2.2 实验方法
2.2.1 试剂配制
2.2.2 细胞培养
2.2.3 Western blot检测蛋白表达
2.2.4 IDH酶活测定
2.2.5 线粒体复合体I活性测定
2.2.6 实时荧光定量PCR检测mRNA水平
2.2.7 CHX预处理后检测IDH1蛋白表达
2.2.8 蛋白酶体活性测定
2.2.9 MG132预处理后检测IDH1蛋白表达
2.2.10 免疫沉淀检测泛素化蛋白水平
2.2.11 检测瞬时转染后的IDH1蛋白表达水平
2.2.12 α-KG含量测定
2.2.13 乳酸脱氢酶活性测定
2.2.14 小鼠血管内皮生长因子含量测定
2.2.15 脯氨酸羟化酶活性测定
2.2.16 统计分析
第三章 实验结果
3.1 WA抑制TPA诱导的IDH1表达和酶活下调
3.2 WA通过抑制泛素-蛋白酶体途径稳定IDH1蛋白
3.2.1 WA在转录水平对IDH1的调控作用
3.2.2 WA在翻译水平对IDH1的调控作用
3.2.3 WA在翻译后水平对IDH1的调控作用
3.3 IDH1抑制有氧糖酵解,维持线粒体的正常功能
3.3.1 检测转染效率的结果
3.3.2 IDH1促进催化产物α-KG的积累
3.3.3 IDH1维持线粒体复合体I的活性
3.3.4 IDH1抑制LDH蛋白的表达及活性
3.4 IDH1介导WA对HIF-1α通路及糖酵解的抑制作用
3.4.1 WA抑制HIF-1α通路的活化
3.4.2 IDH1抑制HIF-1α通路的活化
3.4.3 IDH1介导WA对有氧糖酵解的抑制作用
第四章 讨 论
第五章 结 论
参考文献
致谢
个人简介及攻读学位期间取得的研究成果