腺病毒介导的小鼠γ-干扰素在小鼠肺上皮细胞中的表达

摘要

目的：观察腺病毒介导的小鼠γ干扰素（ｍＩＦＮγ）在小鼠肺上皮细胞内的转基因表达。方法：腺病毒介导的ｍＩＦＮγ在小鼠肺上皮细胞内的转基因，其表达的ｍＩＦＮγｍＲＮＡ、蛋白质及生物活性分别经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、ＥＬＩＳＡ和抑制鼠弓形体在小鼠巨噬细胞内生长等检测技术确定。结果：病毒的细胞感染增殖率（ＭＯＩ）５０为腺病毒介导的ｍＩＦＮγ在小鼠肺上皮细胞内表达的最适浓度：在感染６ｈ后经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交发现ｍＩＦＮγｍＲＮＡ转录信号，２４ｈ达高峰；在感染１２ｈ后经ＥＬＩＳＡ检测ｍＩＦＮγ蛋白的表达阳性，４８ｈ后达峰值。经重组腺病毒感染的小鼠肺上皮细胞培养上清液中的ｍＩＦＮγ可明显抑制鼠弓形体在经大肠杆菌脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞内的生长。结论：小鼠的ＩＦＮγ可经腺病毒介导向小鼠肺上皮细胞的转移，并可实现早期、高效且相对持久的表达，为细胞因子的体内转基因免疫治疗机制研究奠定了基础。