枯草杆菌B⑥菌株胞外多糖发酵条件及免疫活性研究

摘要

本文依据微生物培养基选择和配制的工业发酵生产原则，对BacillussubtilisB1⑥菌株工业化产多糖发酵条件做了系统研究。通过单因素实验、正交实验以及不同发酵条件实验对BacillussubtilisB1⑥产多糖量进行比较，发现在微生物生长发育过程和生物合成过程中，培养基中碳氮的比例(C／N)在发酵工业中非常重要，同时还需要添加大量元素和微量元素，如镁、硫、磷、钾、锰等来促进微生物的生长。结果表明：BacillussubtilisB1⑥菌株工业化产多糖发酵过程中，培养基组成对多糖发酵有重要影响；实验确定了该菌株多糖发酵的最佳培养基配方及发酵条件。 从发酵液中提取BacillussubtilisB1⑥胞外多糖，经过聚丙烯酰胺凝胶电泳和纤维素阴离子交换色谱发现：多糖纯度较高。用纸层析和GC对多糖进行组分分析，结果表明：含量较高的组分为葡萄糖和阿拉伯糖。GC结果还表明：多糖具有标样中出现的7种单糖成份鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、岩藻糖，但由于含量较少，纸层析只有两个显色斑，无法显色其他成分。说明多糖可能由一种高含量的葡萄糖、阿拉伯糖和其他成分组成。 在BacillussubtilisB1⑥胞外多糖功能活性研究方面，通过小鼠游泳实验，发现该菌胞外多糖对抗疲劳能力有一定增强作用；其次，多糖浓度为100μg/ml的溶液能够有效地抑制肿瘤细胞生长，引起其凋亡；通过抗肿瘤实验进一步验证：该菌胞外多糖具有一定的抗肿瘤能力。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

1.1多糖的介绍

1.2多糖的研究概况

1.3多糖的生物活性

1.4细菌多糖研究状况

1.5本课题研究意义及内容

第二章枯草芽孢杆菌B1⑥产多糖发酵条件研究

2.1简述

2.2实验器材和试剂

2.2.1实验仪器和设备

2.2.2主要材料和试剂

2.3实验方法

2.3.1培养基

2.3.2标准曲线的制作

2.3.3碳、氮源对多糖发酵的影响

2.3.4不同金属离子对多糖发酵的影响

2.3.5不同Ca2＋浓度对多糖发酵的影响

2.3.6装液量对多糖发酵的影响

2.3.7起始pH对多糖发酵的影响

2.3.8温度对多糖发酵的影响

2.3.9菌龄对多糖发酵的影响

2.3.10接种量对多糖发酵的影响

2.3.11摇床速度对多糖发酵的影响

2.4实验结果

2.4.1标准曲线

2.4.2碳、氮源对多糖发酵的影响

2.4.3不同金属离子对多糖发酵的影响

2.4.4不同Ca2＋浓度对多糖发酵的影响

2.4.5装液量对多糖发酵的影响

2.4.6起始pH对发酵多糖的影响

2.4.7温度对多糖发酵的影响

2.4.8菌龄对多糖发酵的影响

2.4.9接种量对发酵多糖的影响

2.4.10不同摇床速度对多糖发酵的影响

2.5结论与分析

第三章枯草芽孢杆菌B1⑥胞外多糖分离鉴定和组分分析

3.1简述

3.2实验器材和试剂

3.2.1实验仪器和设备

3.2.2实验材料和试剂

3.3实验方法

3.3.1胞外多糖提取分离及鉴定

3.3.2胞外纯多糖组分分析

3.4实验结果

3.4.1胞外多糖提取

3.4.2胞外多糖纯度鉴定结果

3.4.3胞外多糖组分分析结果

3.5结论与分析

第四章枯草芽孢杆菌B1⑥胞外多糖免疫活性研究

4.1简述

4.2实验材料和方法

4.2.1实验材料

4.2.2实验原理及方法

4.3实验结果

4.3.1胞外多糖对小鼠抗疲劳能力实验

4.3.2胞外多糖诱导小鼠S180细胞调亡的实验

4.3.3胞外多糖抗肿瘤活性研究

4.4结论与分析

第五章展望

致 谢

参考文献：

附录 发表文章