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内异消癥汤对子宫内膜异位症在位及异位内膜间质细胞分泌Ang-2的影响

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前言

一 构建子宫内膜异位症患者在位及异位内膜间质细胞模型

材料与方法

1.主要实验试剂与耗材

2.实验仪器

3.主要试剂的配制

4.标本来源

5.实验步骤

结果

1.不同取材途径子宫内膜培养成活情况

2.细胞形态学观察

3.免疫细胞化学鉴定

二 内异消癥汤对体外培养的间质细胞生长的影响

材料与方法

1.主要实验试剂与耗材

2.主要实验仪器

3.主要试剂的配制

4.含药血清的制备

5.细胞的培养

三 内异消癥汤对在位及异位内膜间质细胞分泌Ang-2的影响

材料与方法

1.主要试剂与耗材

2.主要实验仪器

3.试剂配制

4.细胞来源

5.实验步骤

6.Ang-2定量酶联检测方法

结果

讨论

结语

结论

致谢

参考文献

附录

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摘要

背景:子宫内膜异位症是妇科的常见病、难治病之一,近年来患病率逐渐上升,主要表现为进行性加重的痛经,部分患者合并不孕,极大的影响了妇女的身体健康及生活质量。内异症的发生目前尚无确切定论,临床疗效不满意,复发率高达40%。内异症的基础研究成为近年来的研究热点,中医药治疗内异症也成为探讨焦点。
  目的:对内异症患者在位及异位内膜细胞进行培养,研究内异消癥汤对间质细胞生长及分泌血管生成素-2(Ang-2)的影响。
  方法:手术切除子宫或诊断性刮宫获得的内膜组织、手术获得的异位病灶组织,对间质细胞进行体外原代细胞培养,以内异消癥汤为实验组,米非司酮作为对照组,用MTT法检测不同药物、不同浓度对体外培养的间质细胞生长的影响,并用酶联免疫法检测其对间质细胞分泌Ang-2的影响。
  结果:
  1.采用此原代细胞培养方法培养在位及异位内膜间质细胞成功率较高;免疫细胞化学鉴定细胞纯度较高。
  2.内异消癥汤、米非司酮均能抑制体外培养的间质细胞的生长。
  3.内异消癥汤能够降低体外培养的在位及异位内膜间质细胞分泌的Ang-2水平。
  结论:
  1.本实验成功建立了体外培养子宫内膜异位症在位及异位内膜间质细胞模型,为研究子宫内膜异位症提供良好的实验模型。
  2.内异消癥汤能够抑制子宫内膜异位症在位及异位内膜间质细胞的生长,推断其可以作用于异位病灶组织的细胞,使之凋亡,促进病灶的萎缩。
  3.内异消癥汤能够降低子宫内膜异位症在位及异位内膜间质细胞分泌促血管生长因子Ang-2的水平,抑制其种植生长,减缓病灶的增长速度。

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