蛇毒型神经生长因子促进大鼠脑缺血再灌注损伤后神经可塑性的研究

摘要

目的：探讨经侧脑室给予蛇毒型神经生长因子(vNGF)对脑缺血再灌注损伤后大鼠内源性神经前体细胞增殖与迁移的影响。
　　 方法：取健康清洁级雄性Wistar大鼠，按随机分组原则分为2天组(N=30)、7天组(N=30)、14天组(N=30)。每个时间点再分为五个亚组vNGF25u、vNGF50u、vNGFl00u、生理盐水对照组、以及假手术组，每个亚组6只大鼠。生理盐水对照组和vNGF组大鼠采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血-再灌注损伤模型，术后各时间点vNGF亚组在规定的时间段每日采用改良的侧脑室置管术法给予相应剂量蛇毒型神经生长因子，生理盐水对照组给予等渗盐水。在术后每个时间点对脑缺血再灌注损伤后大鼠神经功能恢复的程度进行神经功能评分。采用免疫组织化学法测定术后第2天、第7天以及第14天缺血皮质周围和海马CA3/DG区神经前体细胞标志物Doublecortin(DCX)阳性细胞数以及细胞信号调节激酶(ERK)阳性细胞数。
　　 结果：1、与对照组相比，经侧脑室给予蛇毒型神经生长因子各组第2天开始，大鼠神经功能就显著恢复。各组比较经分析，差异有统计学意义(P＜0.05)。显示了外源性补充蛇毒型神经生长因子的明显正性干预作用。假手术组大鼠无缺血再灌注损伤。2、DCX免疫组织化学结果显示：经侧脑室给予vNGF各亚组DCX阳性细胞在缺血皮质周围和海马CA3/DG区第2天就开始增加，第7天达到高峰，第14天有所下降。与相应时间点对照组相比，呈明显增高趋势。各时间点中vNGF各亚组以vNGF50u表达最多呈现出vNGF干预的量效关系；其中以第7天vNGF50uDCX阳性细胞数目最高，与第2、第14天vNGF50u相比，差异明显(P＜0.03)呈现出vNGF干预的时效关系。3、ERK免疫组织化学结果显示：经侧脑室给予vNGF各亚组ERK阳性细胞在缺血皮质周围和海马CA3/DG区第2天表达为高峰，第7天明显下降，第14天恢复基线水平。与相应时间点对照组相比，呈明显下降趋势。对照组中ERK表达水平，初步体现了ERK的表达趋势。各时间点中vNGF各亚组以vNGF50u表达最少，以第7天vNGF50u为著，呈现出vNGF负性干预的量效关系。
　　 结论：1、脑缺血再灌注损伤可以诱导神经前体细胞在缺血皮质周围及海马CA3/DG增殖，同时还可以激活ERK信号转导途径。2、经侧脑室给予蛇毒型神经生长因子可以有效逆转脑缺血再灌注损伤后神经生长因子匮乏局面，并促进缺血皮质周围及海马CA3和齿状回神经前体细胞增殖与迁移。3、ERK阳性细胞在各组间的表达差异，提示了NGF可以负性调节ERK而发挥促进血管再生和神经发生的作用。4、ERK与DCX阳性细胞在相同时间点相同部位相同干预措施的情况下，表达的明显差异，提示ERK可能对DCX增殖和迁移有一定影响。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

综述一 脑卒中后神经病理生理与神经可塑性机制分析

综述二 啮齿动物类大鼠局灶性脑缺血模型分析

致谢

攻读硕士研究生期间发表的学术论文